布魯氏菌Omp10蛋白表位分析及免疫特性研究.pdf

1、目的：通過用生物信息學(xué)技術(shù)預(yù)測布魯氏菌Omp10蛋白的優(yōu)勢表位，對布魯氏菌病急性期患者組和正常對照組中相關(guān)細胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-17和IL-10的檢測，分析其在布魯氏菌病發(fā)病過程中的意義，并通過Omp10蛋白刺激布魯氏菌相關(guān)細胞因子的細胞探討其免疫原性。
　　方法：1）利用IEDB在線軟件和DNAStar軟件，通過分析布魯氏菌Omp10蛋白的分子結(jié)構(gòu)、親水性、柔韌性、表面可及性以及抗原指數(shù)等來確定其B細胞

2、抗原表位及T細胞抗原表位；2）實驗分為布魯氏菌病急性期患者組和正常對照組，采用 ELISA方法檢測血清中細胞因子（IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-17、IL-10）的水平；3）通過ELISPOT法檢測布魯氏菌病急性期患者組及正常對照組外周血單個核細胞（PBMC）經(jīng)布魯氏菌抗原刺激產(chǎn)生IL-17和IL-10的斑點數(shù)。
　　結(jié)果：1）布魯氏菌Omp10蛋白B細胞抗原表位有4個，為26-34、65-75、97-102和115-1

3、20氨基酸殘基。Omp10蛋白T細胞抗原表位有6個，為64-79、72-87、104-119、6-21、9-24和78-93氨基酸殘基；2）布魯氏菌病急性期患者組IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-17表達水平顯著高于正常對照組，而IL-10水平與對照組相比顯著降低；3）經(jīng)Omp10蛋白刺激的布魯氏菌病急性期患者組分泌IL-17的斑點形成細胞遠遠大于正常對照組；而IL-10的斑點形成細胞沒有差異。
　　結(jié)論：1）通過生物信息學(xué)