載多西他賽膠束在克服多藥耐藥及靶向給藥方面的研究.pdf

1、多西他賽，又名多西紫杉醇，是新一代紫杉烷類抗腫瘤藥，其抗癌譜廣，適用于多種癌癥的治療。然而，目前藥物化療效果仍不理想，一方面，由于藥物自身理化性質(zhì)的特點，如水溶性差，使藥物不能有效地達到腫瘤組織。另一方面，腫瘤多藥耐藥性也是化療失敗的重要原因。再一方面，藥物缺乏靶向性，引起患者嚴重的毒副作用，也是臨床上化學(xué)治療的主要障礙。因此，本課題制備的新劑型能夠提高藥物的溶解度、逆轉(zhuǎn)腫瘤細胞的多藥耐藥，同時提高藥物的靶向性，降低毒副作用。本文以PE

2、O-PPO-PCL為主要載體材料來包載多西他賽，主要研究內(nèi)容如下:
　　本文第一部分主要針對P-糖蛋白在癌細胞膜上過度表達而產(chǎn)生多藥耐藥的機理，選取TPGS為P-gp抑制劑，制備了PEO-PPO-PCL/TPGS膠束。我們合成了三種不同疏水鏈段的聚合物，用薄膜水化法制得的三種載多西他賽的PEO-PPO-PCL/TPGS膠束，其平均粒徑分別在25-135 nm之間，符合EPR效應(yīng)的粒徑要求，形態(tài)呈球形，分布均勻。膠束的臨界膠束濃度(

3、CMC)低達-10-6gmL-1，在體內(nèi)不會因為血液的稀釋而破壞結(jié)構(gòu)。載藥膠束的貯藏穩(wěn)定性和血漿穩(wěn)定性均良好，此外，膠束還具有良好的生物相容性，溶血率均低于5％。膠束不僅增加了難溶性藥物多西他賽的溶解度，而且能夠控制藥物的釋放，體外釋放試驗中，載藥膠束的釋藥與原料藥相比，具有很明顯的緩釋作用。體內(nèi)藥動學(xué)實驗顯示，膠束能顯著降低藥物的消除速度，延長其體內(nèi)的循環(huán)時間和作用時間，有助于藥物緩釋及提高生物利用度。細胞實驗結(jié)果表明載藥膠束對耐藥細

4、胞MCF-7/Adr顯示出抑制P-gp的功能，能夠逆轉(zhuǎn)腫瘤細胞的多藥耐藥現(xiàn)象，膠束通過內(nèi)吞進入細胞，攝取顯著提高，細胞毒性比原料藥明顯增加，IC50實驗結(jié)果顯示三種膠束制劑對乳腺癌細胞MCF-7的抑制效果分別是原料藥的能達到原料藥的69，82和100倍。
　　本文第二部分主要針對自吞噬引起多藥耐藥的機理，將自吞噬抑制藥氯喹與多西他賽共同包載在膠束，制成共遞送給藥系統(tǒng)。此制劑是在單載多西他賽膠束制劑基礎(chǔ)上的擴展與改進，既抑制P-pg

5、又抑制自吞噬，達到了雙重逆轉(zhuǎn)多藥耐藥。MTT實驗篩選出當(dāng)多西他賽和氯喹質(zhì)量比為4∶1時，協(xié)同作用最好。對雙載藥膠束的載藥能力、粒徑、形態(tài)、溶血性等進行了系統(tǒng)評價。透析法研究了載藥膠束在磷酸鹽緩沖液(PBS pH7.4，0.5％吐溫80)中的體外釋藥行為。此外，還評價了膠束制劑的細胞攝取;MTT法研究了雙載藥膠束對細胞耐藥性的逆轉(zhuǎn)情況，實驗結(jié)果表明:所制備的膠束制劑粒徑小，分散性好，溶血度低，具有緩釋效果，能顯著增強藥物攝取，逆轉(zhuǎn)腫瘤細胞

6、多藥耐藥，兩種膠束的逆轉(zhuǎn)指數(shù)達到134.16和194.74.
　　本文第三部分主要是在PEO-PPO-PCL膠束的基礎(chǔ)上引入葉酸，構(gòu)建了載多西他賽的FA-PEG2k/PEO-PPO-PCL膠束，葉酸能夠賦予膠束對腫瘤的主動識別能力以及增強膠束的跨膜轉(zhuǎn)運能力，實現(xiàn)膠束的主動靶向性。所得膠束制劑分散度良好，呈均一的球形，平均粒徑為132nm，制劑具有良好的血液相容性，溶血率低，包載的多西他賽釋放緩慢，具有緩釋功能。體外MTT實驗結(jié)果顯