廣州部分公共場(chǎng)所葡萄球菌污染狀況和耐藥譜及其分子特征研究.pdf

1、目的：
　　調(diào)查廣州部分公共場(chǎng)所環(huán)境物體表面葡萄球菌污染情況，揭示其耐藥譜及分子特征，為預(yù)防和控制公共場(chǎng)所葡萄球菌污染提供科學(xué)依據(jù)。
　　方法：
　　采用橫斷面研究設(shè)計(jì)，調(diào)查地鐵、火車(chē)站、汽車(chē)站和醫(yī)院候診大廳葡萄球菌污染狀況；應(yīng)用一系列標(biāo)準(zhǔn)的微生物實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行菌株的分離和鑒定；采用紙片擴(kuò)散法對(duì)所有葡萄球菌進(jìn)行藥物敏感試驗(yàn)；使用PCR技術(shù)檢測(cè)金黃色葡萄球菌中PVL基因和qac基因攜帶情況，并對(duì)金黃色葡萄球菌進(jìn)行多位點(diǎn)測(cè)序

2、分型（multilocus sequencing typing，MLST）；應(yīng)用多重PCR技術(shù)對(duì)耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（methicillin-resistant Staphylococcus aureus，MRSA）的進(jìn)行SCCmec分型。
　　結(jié)果：
　　葡萄球菌污染情況：共采集公共場(chǎng)所物體表面樣本1100份。葡萄球菌檢出率為59.64％（656/1100）：金黃色葡萄球菌污染率為7.55%（83/1100），其中MR

3、S A污染率為1.73%（19/1100）；凝固酶陰性葡萄球菌污染率為52.09%（573/1100），其中耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌污染率為6.09%（67/1100）。各個(gè)場(chǎng)所葡萄球菌污染率由高到低依次為：地鐵（75.63%，242/320）＞醫(yī)院（66.25%，265/400）＞火車(chē)站（43.89%，79/180）＞汽車(chē)客運(yùn)站（35.00%，70/200）；金黃色葡萄球菌污染率由高到低依次為：地鐵（11.25%，36/320）＞

4、汽車(chē)客運(yùn)站（8.50%，17/200）＞火車(chē)站（6.67%，12/180）＞醫(yī)院（4.50%，18/400）。
　　藥物敏感試驗(yàn)：葡萄球菌對(duì)11種藥物均有不同程度耐藥，藥物按照耐藥率由高到低依次為：青霉素（94.05%）＞紅霉素（84.15%）＞克林霉素（57.62%）＞利福平（48.78%）＞甲氧芐啶（42.23%）＞慶大霉素（31.25%）＞莫西沙星（21.29%）＞妥布霉素（14.33%）＞頭孢西?。?2.65%）＞替考拉寧

5、（3.66%）＞利奈唑胺（2.44%）。金黃色葡萄球菌對(duì)頭孢西丁和妥布霉素的耐藥率高于凝固酶陰性葡萄球菌，對(duì)克林霉素和紅霉素的耐藥率低于凝固酶陰性葡萄球菌，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），其他藥物耐藥率在兩組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；甲氧西林耐藥菌株和甲氧西林敏感菌株對(duì)紅霉素耐藥率無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，甲氧西林耐藥菌株對(duì)其他藥物的耐藥率均高于甲氧西林敏感菌株，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；各采樣場(chǎng)所間耐藥率存在一定差異。
　　PVL基因和qa

6、c基因檢測(cè)：有2株MRSA（2/19，10.53%）和9株甲氧西林敏感的金黃色葡萄球菌（methicillin-susceptibleStaphylococcus aureus，MSSA）（14.06%，9/64）攜帶PVL基因，兩組間PVL基因攜帶率沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（Fisher確切概率法，P=1.000）；有9株MRS A（47.37%，9/19）和0株MSSA（0.00%，0/64）攜帶qac基因，兩組間qac基因攜帶率有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異

7、（F is her確切概率法，P＜0.001）。
　　SCCmec分型：在19株MRSA中，SCCmecⅠ型有1株（5.26%），Ⅱ型有3株（15.79%）,Ⅲ型有2株（10.53%），Ⅳa型有5株（26.32%）未分型的有8株（42.11%），未檢測(cè)到Ⅳb型、Ⅳc型、Ⅳd型和Ⅴ型。
　　M LST：金黃色葡萄球菌共檢測(cè)到27種ST型別，頻率由高到低依次為：ST188（26.55%）＞ST5（17.19%）＞S T72（15

8、.63%）＞S T398（12.50%）＞ST6、S T15和ST1462（6.25%）＞ST125（4.69%）＞ST59、S T97和S T2140（3.13%）＞ST8、S T25、ST30、ST88、S T221、S T338、ST537、S T789、S T808、S T1141、S T1311、S T1507、ST1860、ST2114、ST2605和ST2668（1.56%）。根據(jù)ST型別間聚類(lèi)分析，共形成3個(gè)克隆群（CC

9、5，CC59和CC72），4個(gè)成對(duì)體（D6，D30，D188和D398）和8個(gè)單體（ST8，ST15，S T25，S T88，ST97，S T789，S T1141和S T2668）。通過(guò)對(duì)MRS A菌株進(jìn)行菌株間樹(shù)狀聚類(lèi)分析，19株MRSA菌株聚成5個(gè)型別，提示可能存在不同公共場(chǎng)所間菌株交叉?zhèn)鞑サ娘L(fēng)險(xiǎn)。
　　結(jié)論：
　　廣州公共場(chǎng)所環(huán)境物體表面葡萄球菌污染情況嚴(yán)重；這些葡萄球菌對(duì)常用抗生素耐藥率較高；金黃色葡萄球菌中存在一