藥物分析藥物的雜質(zhì)檢查

1、Company Logo,www.themegallery.com,一氯化物檢查法,Cl-+Ag+ H+ AgCl,,,1. 原理　 利用氯化物在硝酸酸性條件下與硝酸銀反應(yīng), 生成氯化銀膠體微粒而顯白色渾濁液, 與一定量標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液在相同條件下產(chǎn)生的氯化銀渾濁程度比較, 判定氯化物是否符合限量,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,2．操

2、作方法(對(duì)照法),樣品管,對(duì)照管,葡萄糖中氯化物檢查,1.0mL,用水稀釋至50mL,6.0mL,0.60g,0.010%,(濃度：10?g Cl－/ml),一氯化物檢查法,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,一氯化物檢查法,3. 結(jié)果觀察方法 暗處放置5min(避免AgCl分解),第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www

3、.themegallery.com,,4．注意事項(xiàng)及討論,,一氯化物檢查法,①  平行試驗(yàn)②  加稀硝酸的目的③ 氯化物的最適檢測(cè)濃度范圍④  供試品溶液不澄清處理方法⑤  供試品溶液有色時(shí)的處理方法,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,,一氯化物檢查法,為了保證樣品管與對(duì)照管的

4、反應(yīng)條件一致,要求樣品管與對(duì)照管要平行操作——平行試驗(yàn).,①  平行試驗(yàn),第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,②  加稀硝酸的目的,,一氯化物檢查法,加速氯化銀混濁的生成，產(chǎn)生較好的乳濁，避免產(chǎn)生碳酸銀、氧化銀、磷酸銀沉淀. 50ml供試液含稀硝酸10ml為宜.過多會(huì)增大氯化銀的溶解度，使?jié)岫冉档?,第

5、三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,一氯化物檢查法,,③氯化物的最適檢測(cè)濃度范圍,50ml供試液中含50~80 ?g的Cl-,　　相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液(10 ?gCl-/ml) 5.0~8.0ml 時(shí)，所顯渾濁梯度明顯。 根據(jù)限量取用適宜的供試品量, 使氯化物的濃度在適宜的范圍內(nèi).,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.

6、themegallery.com,,④  供試品溶液不澄清處理方法,,一氯化物檢查法,供試品溶解后溶液不澄清，應(yīng)過濾，過濾時(shí)的濾紙要先用含硝酸的水溶液(1→100)洗滌, 除去濾紙中含有的氯化物.,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,供試品溶液有色時(shí)的處理方法,a.內(nèi)消色法如枸櫞酸鐵銨中氯化物的檢查。,,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Compan

7、y Logo,www.themegallery.com,,向供試品溶液中加入某種試劑，使溶液顏色褪去后再依法檢查。,,一氯化物檢查法,例：高錳酸鉀中氯化物的檢查 因溶液呈紫色，加入適量乙醇，使顏色消失后再檢查。,b. 外消色法,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,二硫酸鹽檢查法,,,硫酸鹽與氯化鋇在稀鹽酸酸性條件下反應(yīng)，生成硫酸鋇的白

8、色渾濁液,與一定量標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液與氯化鋇在相同條件下生成的渾濁比較.,,1. 原 理,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,二硫酸鹽檢查法,,,2. 操作法,標(biāo)準(zhǔn)溶液：硫酸鉀，0.1mg/mL SO42-,,,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,3．討論,①  平行試驗(yàn)②

9、60; 加稀鹽酸的目的③ 硫酸根的最適檢測(cè)濃度范圍④  供試品溶液不易溶解時(shí)⑤  供試品溶液有色時(shí),二硫酸鹽檢查法,0.1mg~0.5mg SO42-/50ml,50ml溶液中含2ml為宜,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,三鐵鹽檢查法,,硫氰酸鹽法,1. 原理 鐵鹽在鹽酸酸性溶液中與硫氰酸銨生成紅色可溶性硫

10、氰酸鐵配離子,與一定量標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液用同法處理后所呈的顏色進(jìn)行比較.,,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,三鐵鹽檢查法,,,,,2. 操作,樣品標(biāo)準(zhǔn)溶液,,H2O,,25ml,,d.HCl,4ml,30%硫氰酸銨,,過硫酸銨50mg,H2O,,50ml,,,,,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,三

11、鐵鹽檢查法,,2) 最佳比色濃度a. 儀器分析線性范圍5~ 90?g Fe3+ /50mlb. 目視比色濃度范圍10~50?g Fe3+ /50ml,3. 討 論,標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液——硫酸鐵銨(含硫酸？)濃度10 ?g Fe3+/ml,3）過硫酸銨的作用：氧化供試品中兩價(jià)鐵變?nèi)齼r(jià)鐵，防止硫氰酸鐵降解,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,三鐵鹽檢查法,,4)

12、 過量的硫氰酸銨，增加硫氰酸鐵配離子穩(wěn)定性，消除其他酸根離子的干擾5）葡萄糖中用硝酸作氧化劑，但須加熱除去過量硝酸。？6）色調(diào)不一致時(shí)或顏色較淺時(shí)，須加正丁醇或異戊醇提取比較。7）有機(jī)藥物？,3. 討 論,亞硝酸與硫氰酸根反應(yīng)生成紅色的亞硝酰硫氰化物,熾灼后測(cè)定,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,三鐵鹽檢查法,,巰基醋酸法（BP）,原理：氨堿性下與兩價(jià)鐵反

13、應(yīng)成紅色配位離子，比色測(cè)定。加巰基醋酸前先加枸櫞酸溶液。防止產(chǎn)生沉淀。,靈敏度高，但試劑貴。,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,三鐵鹽檢查法,,2Fe3++2HSCH2COOH→2Fe2++SCH2COOH,Fe(SCH2COOH)2→[Fe(SCH2COO)2]2-+2H2O,,SCH2COOH,Fe2++2HSCH2COOH→Fe(SCH2COOH)2+H+

14、,紅色,,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,四重金屬檢查法,,重金屬是指在實(shí)驗(yàn)條件下能與硫代乙酰胺或硫化鈉作用呈色的金屬雜質(zhì)。如：Ag、Pb、Hg、Cu、Cd、Bi、Sb、Sn、As、Ni、Co、Zn等. 重金屬存在影響藥物的穩(wěn)定性及安全性. 鉛易在體內(nèi)積蓄中毒，以Pb為代表。,1. 重金屬的概念,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Co

15、mpany Logo,www.themegallery.com,四重金屬檢查法,第二法:熾灼后檢查法 適用于含芳環(huán)、雜環(huán)以及不 溶于水、稀酸及乙醇的有機(jī)藥物,第一法:硫代乙酰胺法 適用于溶于水、稀酸、乙醇 的藥物,是最常用的方法,第三法:硫化鈉法 適用于難溶于稀酸但能溶于 堿性溶液藥物(巴比妥類、磺胺類),第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,

16、Company Logo,www.themegallery.com,四重金屬檢查法,,適用于溶于水、稀酸和乙醇的藥物.,第一法 硫代乙酰胺法,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,四重金屬檢查法,,硫代乙酰胺在弱酸性 (pH3.5 醋酸鹽緩沖液)條件下水解，產(chǎn)生H2S，與重金屬離子(以Pb2+為代表)生成黃色到棕黑色的硫化物混懸液，與一定量標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液

17、經(jīng)同法處理后所呈顏色比較，判定限量是否符合規(guī)定.,1. 第一法 原 理,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,甲管,乙管,丙管,,,,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,結(jié)果觀察,結(jié)果判定,當(dāng)丙管中顯出得顏色不淺于甲管時(shí)，乙管中顯出的顏色與甲管比較，不得更深；當(dāng)丙管中顯出得顏色淺于甲管，按第二法重新檢查,

18、第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,四重金屬檢查法,,①  標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液濃度②  硫代乙酰胺試液③  溶液的pH④  供試品溶液有顏色時(shí)的處理⑤  干擾物的排除方法,3．討論,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,四

19、重金屬檢查法,,①  標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液濃度,適宜目視比色的濃度范圍27ml溶液中 Pb2+標(biāo)準(zhǔn)溶液10?g/ml 1~2ml,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,四重金屬檢查法,,②  硫代乙酰胺試液,H2S試液：惡臭和毒性；不穩(wěn)定；易被空氣氧化而析出硫；濃度難以控

20、制。,改用硫代乙酰胺為顯色劑（95版藥典）硫代乙酰胺在實(shí)驗(yàn)條件下水解產(chǎn)生H2S，與重金屬離子反應(yīng)。,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,四重金屬檢查法,,pH在3.0~3.5時(shí), 呈色較完全； 酸度增大, 呈色變淺甚至不呈色；若經(jīng)強(qiáng)酸處理，需先加氨水至酚酞顯中性，再加醋酸鹽緩沖液。,溶液的pH對(duì)于金屬離子與硫化氫呈色影響較大。,③  溶液

21、的pH,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,四重金屬檢查法,,④ 供試品溶液有顏色時(shí)的處理,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,a. 外消色法Ⅰ. 稀焦糖溶液調(diào)節(jié)Ⅱ. 指示劑調(diào)節(jié) b.內(nèi)消色法,Company Logo,www.themegallery.com,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegalle

22、ry.com,四重金屬檢查法,,⑤ 干擾物的排除方法,干擾：弱酸性溶液中Fe3+氧化H2S析出S，產(chǎn)生混濁影響檢查.,a. 供試品中微量高價(jià)Fe3+存在,如：葡萄糖酸亞鐵中重金屬的檢查。,排除：加入抗壞血酸或鹽酸羥胺使　　　　Fe3+還原為Fe2+。,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,b. 供試品為鐵鹽（大量的Fe3+）,Fe3+在HCl溶液

23、中能形成配位化合物用乙醚提取 Fe3++HCl →[HFeCl6]2-（黃色）　水層加氨試液調(diào)至堿性,殘存的Fe3+可用KCN掩蔽, 按第三法檢查. 如：枸櫞酸鐵銨的重金屬檢查,四重金屬檢查法,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,四重金屬檢查法,,,1.原理 　　供試品先熾灼破壞后,使有機(jī)結(jié)合的重金屬游離, 再按

24、第一法檢查.,第二法 熾灼后的硫代乙酰胺法,適用于含芳環(huán)、雜環(huán)以及不溶于水、稀酸、乙醇的有機(jī)藥物.,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,四重金屬檢查法,,2. 操作,緩緩熾灼 放冷 H2SO4 0.5-1.0ml供試品 炭化

25、 加熱 HNO3 500-600℃H2SO4 除盡 放冷 完全灰化 蒸干HCl 2ml 水15ml 中性 按第一法檢查 蒸干 氨試液注意：做

26、空白試驗(yàn),,,,,,,,,甲管,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,四重金屬檢查法,,a. HNO3處理后,必須蒸干除盡NO.,3. 討論,b. 熾灼溫度嚴(yán)格控制：500-600℃,c. 控制酸中重金屬的影響，對(duì)照品同法處理 d. 含鈉鹽或氟的有機(jī)藥物在熾灼時(shí) 改用鉑坩堝或硬質(zhì)玻璃 (瑪瑙) 蒸 發(fā)皿.,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Co

27、mpany Logo,www.themegallery.com,四重金屬檢查法,,1. 原理　　在堿性介質(zhì)中,以Na2S為顯色劑, 使Pb2+與S2-作用生成PbS 的混懸液, 與一定量標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液經(jīng)同法處理所呈顏色比較, 不得更深.,第三法 硫化鈉法,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,四重金屬檢查法,,適用于溶于堿性水溶液而難溶于稀酸或在稀酸中即

28、生成沉淀的藥物. 如：磺胺類與巴比妥類藥物,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,四重金屬檢查法,,2. 方法,取供試品適量,加NaOH試液5ml和水 20ml使溶解后,置納氏比色管中,加Na2S試液5滴, 搖勻, 與一定量標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液經(jīng)同法處理所呈顏色比較.,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,

29、四重金屬檢查法,,3. 討論,Na2S 對(duì)玻璃有腐蝕性,久置產(chǎn)生絮狀物,應(yīng)臨用新配.,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,(二) Ag-DDC法,(一) 古蔡氏法,(三),(四) 次磷酸法,五砷鹽檢查法,白田道夫法,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Co

30、mpany Logo,www.themegallery.com,,五砷鹽檢查法,(一) 古蔡氏法（Gutzeit）,1. 原 理　金屬鋅與酸作用產(chǎn)生新生態(tài)的氫與藥物中微量砷鹽反應(yīng)生成具揮發(fā)性的砷化氫,遇溴化汞試紙產(chǎn)生黃色至棕色的砷斑,與同條件下一定量標(biāo)準(zhǔn)砷溶液所生成的砷斑比較,判斷砷鹽的量.,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,反應(yīng)式如下：,溴化汞試紙,第三節(jié)

31、 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,8cm,,,有孔玻璃旋塞,導(dǎo)氣管,AsH3發(fā)生瓶,,,,,溴化汞試紙,,醋酸鉛棉花(60mg),,HCl Zn 粒碘化鉀試液酸性氯化亞錫試液,生成砷斑,吸收硫化氫氣體,2. 裝置,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,3. 操作,④ 加鋅粒2g, 立即將裝妥的導(dǎo)氣管 B 密

32、塞于 A 瓶, 置25-40 ℃水浴中, 反應(yīng)45分鐘, 取出溴化汞試紙, 比較砷斑.,① 導(dǎo)氣管B中裝入醋酸鉛棉花,② 再于旋塞C的平面上放一片溴化汞試紙,③ 樣品、對(duì)照品分別置于檢砷瓶中, 加鹽酸5ml與水21ml, 再加2.5%碘化鉀試液5ml 與0.3%酸性氯化亞錫試液5滴, 在室溫放置10分鐘,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,4. 討 論,1) 試劑的作用,

33、a. KI的作用——還原劑：As5+→As3+,五價(jià)砷生成AsH3的反應(yīng)速度比三價(jià)砷速度慢, 加入 KI 使五價(jià)砷還原為三價(jià)砷后再與活潑氫反應(yīng), 以增大AsH3的生成速度.,,五砷鹽檢查法,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,五砷鹽檢查法,,①還原劑(表現(xiàn)在2方面)Ⅰ. 將五價(jià)砷還原為三價(jià)砷(As5+→As3+),b. 酸性SnCl2的作用,第三

34、節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,,,進(jìn)而促進(jìn)AsH3不斷生成,穩(wěn)定的絡(luò)離子,Ⅱ. 將KI被氧化生成的I2再還原為I-,SnCl2與KI還可抑制銻化氫生成,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,五砷鹽檢查法,,c.PbAc2棉花的作用,——排除硫化物的干擾(1mg S2- ),第三節(jié) 藥物中的一般

35、雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,2)  反應(yīng)最佳條件,a. Zn粒的大小及用量 大?。耗芡ㄟ^1號(hào)篩（850~2000?m，40-80目） 用量：約2g,b. 標(biāo)準(zhǔn)砷溶液：2 ml (1 ? g /ml),五砷鹽檢查法,c. 反應(yīng)時(shí)間/溫度：45min/ 25-40℃,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.theme

36、gallery.com,,a. 供試品是硫化物,亞硫酸鹽,硫代硫酸鹽,排除方法：加入濃硝酸處理,3)  干擾物的排除,五砷鹽檢查法,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,Fe3+能消耗還原劑(KI、SnCl2), 并能氧化砷化氫.,排除方法：先加酸性SnCl2試液使 Fe3+ → Fe2+,五砷

37、鹽檢查法,b. 供試品是鐵鹽(Fe3+),第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,c. 共價(jià)鍵結(jié)合的砷化物,排除方法：進(jìn)行有機(jī)破壞 ——酸破壞法或堿破壞法,五砷鹽檢查法,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,堿破壞法　　a 加入氫氧化鈣 500-600 ?C灼燒

38、 　例：酚磺酞　　b 加入無水碳酸鈉堿融 　　　　例：苯甲酸鈉,五砷鹽檢查法,酸破壞法 加稀硫酸與溴化鉀 例：葡萄糖中砷鹽檢查,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,五砷鹽檢查法,Sb干擾,優(yōu)點(diǎn)：靈敏度高 (1 ?g As),4)古蔡氏法特點(diǎn),缺點(diǎn)：,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢

39、查,Company Logo,www.themegallery.com,,(二) 二乙基二硫代氨基甲酸銀法 (Ag-DDC法) silver diethyldithiocarbamate,,紅色膠態(tài)銀,,,目視比色法,510nm 測(cè)定A值,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,,線性范圍：1～10 μg/40ml,靈敏度高, 0.5g As/30ml 含銻藥物不

40、干擾測(cè)定用于砷鹽的限量檢查和微量砷鹽的含量測(cè)定,書中沒有D,本法不僅用于砷鹽的限量檢查, 而且可用作微量砷鹽的含量測(cè)定.,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,五砷鹽檢查法,,(三) 白田道夫法,對(duì)含銻藥物中砷鹽的檢查不能用古蔡氏法,需用白田道夫法.,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,五砷鹽

41、檢查法,白田道夫法原 理,,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,白田道夫法的特點(diǎn),優(yōu)點(diǎn)：不受Sb干擾,缺點(diǎn)：靈敏度低 ——20?gAs2O3/10ml 加入少量HgCl2,靈敏度提高至2 ?gAs2O3（1.5 ?g As）/10ml.,五砷鹽檢查法,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,

42、www.themegallery.com,,五砷鹽檢查法,(四) 次磷酸法,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,特點(diǎn),用于硫化物、亞硫酸鹽以及含銻藥物等砷鹽檢查；不受S2-,SO32-,Sb干擾,靈敏度較古蔡氏法低,五砷鹽檢查法,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,六干燥失

43、重,,,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,六干燥失重,,,,中國(guó)藥典采用的測(cè)定法 常壓恒溫干燥法減壓干燥法與恒溫減壓干燥法干燥劑干燥法：硅膠、濃硫酸、五氧化二磷,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,六干燥失重,,,,常壓干燥法：適用于受熱穩(wěn)定的藥物方法：,供試品2-5g,恒重的扁形

44、稱量瓶,100-105oC干燥5h,干燥器30min,100-105oC再干燥1h,稱重W2,稱重W1,根據(jù)減少的重量計(jì)算水分百分率,,,,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,六干燥失重,,,,注意事項(xiàng)：1）平鋪厚度，﹤5 mm；疏松物質(zhì)， ﹤10 mm2）干燥時(shí)，瓶蓋置于稱量瓶旁，取出前蓋上3）含較多結(jié)晶水，在相對(duì)高溫條件下，先除去部分水分4）含大量其他

45、水分且熔點(diǎn)低，先在低溫除去大量水分，或先減壓干燥再恒溫干燥；5）不易恒重藥物，一定溫度和時(shí)間減少重量判斷6）供試品為膏狀物，取洗凈粗砂粒和小玻棒干燥至恒重后用于攪勻和干燥,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,六干燥失重,,,,減壓干燥法：適于熔點(diǎn)低、受熱分解的供試品。1）采用減壓干燥器（通常為室溫）；或恒溫減壓干燥器（溫度按各品種項(xiàng)下的規(guī)定設(shè)置），壓力一般&

46、lt;2.67kPa。2）干燥劑：無水氯化鈣、硅膠、或五氧化二磷，有時(shí)不用干燥劑。恒溫減壓干燥器中常用五氧化二磷。,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,六干燥失重,,,,干燥劑干燥法：適用于受熱易分解或易升華的供試品。1）置于干燥器中，利用干燥劑吸收水分，干燥至恒重；2）干燥能力：五氧化二磷 ? 硅膠 ? 硫酸,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Compa

47、ny Logo,www.themegallery.com,六干燥失重,,,,注意事項(xiàng)：1）使用五氧化二磷是需將干燥劑鋪于培養(yǎng)皿中，置干燥器內(nèi)；2）表層結(jié)塊或出現(xiàn)液滴，應(yīng)將表層刮去，加入新的再使用；棄去的五氧化二磷不可倒入下水道，應(yīng)埋入土中，不重復(fù)使用；3）硫酸放于培養(yǎng)皿或燒杯中，可重復(fù)使用，將含水硫酸置于燒杯中加熱冒白煙，在110oC約30min。,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.the

48、megallery.com,Company Logo,www.themegallery.com,,,,水分包括結(jié)合水和吸附水。藥典收載費(fèi)休氏法和甲苯法。費(fèi)休氏法可準(zhǔn)確測(cè)定藥物中的結(jié)晶水、吸附水和游離水。原理：利用碘將二氧化硫氧化為三氧化硫時(shí)，需要一定量的水分參與反應(yīng)，根據(jù)消耗碘的量來測(cè)定水分的含量。H2O+I2+SO2+3C5H5N→2C5H5N·HI+C5H5N·SO3C5H5N·SO3+CH

49、3OH→C5H5N·HSO4CH3,七水分測(cè)定法,滴定反應(yīng)指示終點(diǎn)：自身或永停滴定法,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,,,七水分測(cè)定法,水與費(fèi)休氏試液摩爾比：水：碘：二氧化硫：甲醇：吡啶=1：1：1：1：3,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,A——供試品消耗的Fisher試液的體積B——空白消耗的Fisher試液的體積F——每1ml

50、Fisher試劑相當(dāng)于水的重量(mg)W——供試品的重量,Company Logo,www.themegallery.com,催化劑,硫酸吡啶，不穩(wěn)定,氫碘酸吡啶,甲基硫酸氫吡啶，穩(wěn)定,Company Logo,www.themegallery.com,指示終點(diǎn)方法：①Fisher試液顏色 淡黃色——紅棕色②永停法(以后講）,催化劑,,Company Logo,www.themegallery.com,,八熾灼殘

51、渣,,,熾灼殘?jiān)╮esidue on ignition）：有機(jī)藥物經(jīng)炭化或揮發(fā)性無機(jī)藥物加熱分解后，再經(jīng)高溫?zé)胱?，所產(chǎn)生的非揮發(fā)性無機(jī)雜質(zhì)的硫酸鹽。用于控制有機(jī)藥物經(jīng)炭化或揮發(fā)性無機(jī)藥物中非揮發(fā)性無機(jī)雜質(zhì)。,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,八熾灼殘?jiān)?,,供試品置已熾灼至恒重的坩堝，精密稱定，緩緩熾灼至完全炭化，放冷至室溫，除另有規(guī)定外，加入硫酸使?jié)駶?rùn)，

52、低溫加熱除盡硫酸蒸氣后，于高溫（700-800oC）熾灼至完全灰化，在干燥器內(nèi)冷卻至室溫，精密稱定后，再在（700-800oC）熾灼至恒重。,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,,,0.1%-0.2%,1～2 mg,Company Logo,www.themegallery.com,,八熾灼殘?jiān)?,,藥典要求：ChP和BP均要求恒重；USP和JP殘?jiān)谙薅韧鈺r(shí)才要求恒重。ChP和USP均先炭化后再加硫酸；BP和JP則加硫酸消化

53、兩次；溫度：ChP為700-800oC；USP為800±25oC；BP為800oC；JP為450-550oC,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,八熾灼殘?jiān)?,,注意事項(xiàng)：1）供試品取用量由限量和稱量誤差決定。一般應(yīng)使熾灼殘?jiān)繛?-2mg，限量一般為0.1-0.2%；2）放入高溫爐內(nèi)之前，務(wù)必蒸發(fā)除盡硫酸，以免腐蝕爐膛；3）除盡硫酸蒸氣，應(yīng)低

54、溫加熱，以防由于溫度過高，影響測(cè)定結(jié)果；4）含氟樣品采用鉑坩堝；5）熾灼殘?jiān)糇髦亟饘贆z查是，溫度控制在500-600oC；6）恒重的第二次稱重在繼續(xù)熾灼30min后進(jìn)行。,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,九易炭化物,,,易炭化物（readily carbonizable substances）： 指藥物中存在遇硫酸易炭化或氧化而呈色的微

55、量有機(jī)物質(zhì)。多為未知結(jié)構(gòu)的化合物，用硫酸呈色的方法控制他們的含量。目視比色法。,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,九易炭化物,,,檢查：甲管：加入各品種項(xiàng)下規(guī)定的對(duì)照溶液5ml；乙管：加硫酸（94.5%-95.5%，g/g）5ml，分次緩緩加入規(guī)定量的供試品，振搖使溶解。均靜置15min，甲乙管比較，乙管不得比甲管更深。對(duì)照液種類：1）同”溶液顏色檢

56、查項(xiàng)下“標(biāo)準(zhǔn)比色液；2）由比色用氯化鈷、比色用重鉻酸鉀、比色用硫酸銅按規(guī)定配制的對(duì)照液；3）高錳酸鉀液,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,,,殘留溶劑（residual solvents）：合成原料藥、輔料或制劑生產(chǎn)過程中使用的，但在工藝中未能完全除去的有機(jī)溶劑。毒性程度分四類：避免使用、限制使用、推薦使用、其他溶劑前3類按規(guī)定限量使用，第4類根據(jù)生產(chǎn)工藝，制定限度

57、。,十殘留溶劑測(cè)定法,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,,,十殘留溶劑測(cè)定法,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,,,藥典規(guī)定：殘留溶劑檢查方法為氣相色譜法（GC）?？刹捎锰畛渲?，也可采用毛細(xì)管柱。,十殘留溶劑測(cè)定法,檢測(cè)器常為氫火焰離子化檢測(cè)器（FID）

58、，對(duì)含鹵素的殘留溶劑采用電子俘獲檢測(cè)器（ECD）。FID使用時(shí)，需加尾吹氣，作用：提高靈敏度，消除檢測(cè)器死體積的柱外效應(yīng),第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,色譜系統(tǒng)與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)(System Suitability Tests; SSTs)以直徑為0.25-0.18mm的二乙烯苯-乙基乙烯苯型高分子多孔小球作為固定相，柱溫為80-170℃；并符合下列條件：

59、 ⑴用待測(cè)物的色譜峰計(jì)算的N應(yīng)大于1000； ⑵內(nèi)標(biāo)物與待測(cè)物的兩個(gè)色譜峰的R≥1.5； ⑶每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣5次，所得待測(cè)物與內(nèi)標(biāo)物峰面積之比的RSD≤5%； 若以外標(biāo)法測(cè)定，所得待測(cè)物峰面積的RSD≤10%,Company Logo,www.themegallery.com,進(jìn)行有機(jī)溶劑限度測(cè)定時(shí)，根據(jù)殘留溶劑的限度規(guī)定來確定對(duì)照品溶液的濃度；進(jìn)行定量測(cè)定時(shí)，應(yīng)根據(jù)供試品中實(shí)際殘留溶劑的實(shí)際殘留量確定對(duì)照品溶液的濃

60、度。對(duì)照品溶液的色譜峰面積與供試品溶液中對(duì)應(yīng)的殘留溶劑的色譜峰面積以不超過2倍為宜。,Company Logo,www.themegallery.com,Company Logo,www.themegallery.com,,,,頂空分析法：將含揮發(fā)性雜質(zhì)的供試品置于一耐壓的密閉系統(tǒng)中，在一定的溫度下，經(jīng)過足夠的時(shí)間，該揮發(fā)性雜質(zhì)在氣相或液相中的含量達(dá)到平衡并具一定的比值，取其氣相中氣體進(jìn)行測(cè)定，其結(jié)果與液相中含量成正比。此分析方法亦稱

61、液上氣體分析法，常與氣相色譜法聯(lián)用，稱為頂空氣相色譜法。,十殘留溶劑測(cè)定法,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,,,色譜條件比較：第一法：柱溫一般40-100oC，進(jìn)樣口溫度200oC；以水為溶劑，頂空瓶平衡溫度70-85oC，時(shí)間30-60min；第二法：柱溫先在40oC維持8min，再以8oC/min升至120oC，維持10oC。頂空條件同第一法

62、頂空條件選擇：平衡溫度低于溶解供試品所用溶劑的沸點(diǎn)10oC，注意熱分解產(chǎn)物干擾；平衡時(shí)間——足夠以達(dá)平衡且氣密性不變差,十殘留溶劑測(cè)定法,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,,,頂空瓶加熱溫度一般70~85℃，頂空瓶加熱時(shí)間30~60分鐘。溶液的制備：通常以水為溶劑；對(duì)于非水溶性藥物，可采用N，N-二甲基甲酰胺或二甲亞砜作溶劑。以內(nèi)標(biāo)法按峰面積比值或外

63、標(biāo)法的峰面積作限度檢查和定量測(cè)定,十殘留溶劑測(cè)定法,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,,,注意事項(xiàng)：1）未知雜質(zhì)或其揮發(fā)性熱降解物對(duì)殘留溶劑干擾的排除：保留時(shí)間相同，采用另一種極性相反的色柱系統(tǒng)測(cè)定相同樣品，比較結(jié)果，保留時(shí)間不同，表明有干擾；產(chǎn)生與殘留溶劑相同的物質(zhì)，利用去除該溶劑的對(duì)照樣品的色譜峰來判斷；2）管路對(duì)含氮堿性化合物的吸附干擾的排除：

64、采用惰性的硅鋼材料或鎳鋼材料；采用弱極性色譜柱或經(jīng)堿處理后色譜柱，或采用離子色譜法；3）頂空瓶一般不重復(fù)使用,十殘留溶劑測(cè)定法,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,十一溶液顏色,,,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,,,十一溶液顏色,1、標(biāo)準(zhǔn)比色液比色法： 將

65、藥物溶液與規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)比色液的顏色比較。標(biāo)準(zhǔn)比色液由比色用重鉻酸鉀、硫酸銅、氯化鈷按規(guī)定的比例制備各種色調(diào)標(biāo)準(zhǔn)貯備液，然后用色調(diào)標(biāo)準(zhǔn)貯備液和水按規(guī)定的比例制備各種色調(diào)色號(hào)標(biāo)準(zhǔn)比色液,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,十一溶液顏色,,,2、分光光度法檢查有色雜質(zhì)： 配制一定濃度的供試品溶液，在規(guī)定波長(zhǎng)測(cè)定吸收度，吸收度不得過規(guī)定值。3、色差計(jì)法：

66、 色差計(jì)直接測(cè)定溶液的透射三刺激值，對(duì)溶液顏色進(jìn)行定量表述和分析。目視法難以判斷時(shí)使用。,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,十二溶液澄清度,,,澄清度（clarity of solution）檢查藥品溶液的混濁程度，可反應(yīng)藥物溶液中的微量不溶性雜質(zhì)，主要用于制備注射劑的原料藥或注射劑檢查。ChP中澄清度的檢查法為比濁法原理：藥物溶液中存在分散的細(xì)微

67、顆粒，當(dāng)直線光通過溶液時(shí)，細(xì)微顆粒可引起光的散射，測(cè)量光散射來測(cè)量溶液的濁度。方法：暗室內(nèi)垂直在傘棚燈下，檢查供試品溶液和濁度標(biāo)準(zhǔn)液。,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,十二溶液澄清度,,,濁度標(biāo)準(zhǔn)貯備液制備：1.0%的硫酸肼溶液與10%烏洛托品等容量混合，生成的甲醛腙在水中形成白色渾濁，以不同量的水稀釋可得不同濁度的標(biāo)準(zhǔn)液。濁度標(biāo)準(zhǔn)貯備液制備溫度：25

68、±1℃藥典中澄清的定義為：供試品溶液的澄清度相同于所用的溶劑，或不超過0.5號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液。注意事項(xiàng)：光線，暗處濁度最高；溫度25±1 ℃；溶劑多為水，有時(shí)用酸、堿、有機(jī)溶劑。水為新沸過的冷水,第三節(jié) 藥物中的一般雜質(zhì)檢查,Company Logo,www.themegallery.com,,一、特殊雜質(zhì)的研究規(guī)范,第四節(jié) 特殊雜質(zhì)的檢查與鑒定方法,,二、特殊雜質(zhì)的鑒定,特殊雜質(zhì)的檢查與鑒定,

69、Company Logo,www.themegallery.com,,雜質(zhì)的表觀含量在0.1%及其以上，或在0.1%以下的具強(qiáng)烈生物作用的雜質(zhì)或毒性雜質(zhì)，要求定性或確證其結(jié)構(gòu)。光學(xué)異構(gòu)體檢查多選用手性色譜法，結(jié)合比旋度來控制藥品質(zhì)量,色譜分析法,一、特殊雜質(zhì)的研究規(guī)范,第四節(jié) 特殊雜質(zhì)的檢查與鑒定方法,Company Logo,www.themegallery.com,二、特殊雜質(zhì)的鑒定,對(duì)有機(jī)雜質(zhì)的鑒定研究時(shí)，常需要對(duì)雜質(zhì)