動(dòng)物實(shí)驗(yàn)影響因素

1、第七章 影響實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的因素,第一節(jié) 影響動(dòng)物實(shí)驗(yàn)效果的動(dòng)物因素,一、種屬因素（一）不同種屬動(dòng)物對(duì)同一致病因素的易感性不同，甚至對(duì)一種動(dòng)物是致命的病原體，對(duì)另一種動(dòng)物可能完全無(wú)害。在研究醋酸棉酚對(duì)雄性動(dòng)物生殖功能的影響時(shí)，不同種類動(dòng)物的反應(yīng)很不一樣，如小鼠對(duì)醋酸棉酚很不敏感，不宜選用。而大鼠和地鼠對(duì)醋酸棉酚就很敏感，很適用。（二）選擇不同種屬動(dòng)物做出的實(shí)驗(yàn)結(jié)果有很大差異。由于不同種屬動(dòng)物的藥物代謝動(dòng)力學(xué)不同，對(duì)藥物反

2、應(yīng)性不同，而藥效也不同。,1、吸收過(guò)程的差異：如大鼠吸收碘非?？?，兔和豚鼠吸收很慢，二者對(duì)碘的吸收有差異；2、排泄過(guò)程的差異：如大鼠體內(nèi)的巴比妥3d內(nèi)可排出90％以上，而雞7d內(nèi)僅排出33％。3、代謝過(guò)程的差異：如璜胺藥和異煙肼在犬體內(nèi)不能乙?；?，多以原型從尿排出；在兔和豚鼠內(nèi)能夠乙?；?，多以乙酰化形式隨尿排出。乙?；蟛坏チ怂幚砘钚裕也涣挤磻?yīng)也增加。可見這兩種藥物對(duì)不同種屬動(dòng)物的藥效和毒性都有差別。（三）不同種屬動(dòng)物對(duì)

3、藥物的反應(yīng)也有差異，大鼠、小鼠、豚鼠和兔對(duì)催吐藥不產(chǎn)生嘔吐反應(yīng)，而貓、犬、人則容易產(chǎn)生嘔吐。,二、品系同一種屬不同品系動(dòng)物，對(duì)同一刺激的反應(yīng)有很大差異。例如DBA/2小鼠100％可發(fā)生聽源性癲癇發(fā)作；BALB/cAnN小鼠對(duì)放射線極敏感；C57L/N小鼠對(duì)瘧原蟲易感；STR/N小鼠對(duì)牙周病易感；C57BL小鼠對(duì)腎上腺皮質(zhì)激素（以嗜伊紅細(xì)胞為指標(biāo)）的敏感性比DBA小鼠高12倍。對(duì)微生物的感染，不同品系之間也有很大差異。三、年齡和體

4、重年齡是動(dòng)物的一個(gè)重要的生物量。一般來(lái)講，幼年動(dòng)物比成年動(dòng)物敏感。一般動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)應(yīng)選成年動(dòng)物。,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡和體重一般呈正相關(guān)。常用幾種成年實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的年齡、體重和壽命可參看表。,,表　成年動(dòng)物的年齡、體重和壽命比較,四、性別不同性別動(dòng)物對(duì)同一藥物的敏感性差異較大，對(duì)各種刺激的反應(yīng)也不盡一致。科研工作中一般優(yōu)先選雄性動(dòng)物或雌雄各一半做實(shí)驗(yàn)。五、生理狀態(tài)在一般實(shí)驗(yàn)研究中不宜采用懷孕動(dòng)物。六、健康情況一般情況下，健康動(dòng)物對(duì)

5、藥物的耐受量比有病的動(dòng)物要大，所以有病動(dòng)物比較容易于中毒死亡。健康動(dòng)物對(duì)各種刺激的耐受性一般比不健康、有病的動(dòng)物要強(qiáng)，而且實(shí)驗(yàn)結(jié)果穩(wěn)定，因此一定要選用健康動(dòng)物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，患有疾病或者處于衰竭、饑餓、寒冷、炎熱等條件下的動(dòng)物，均會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。,第二節(jié) 影響動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的環(huán)境因素,一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境的定義人工控制的，供實(shí)驗(yàn)動(dòng)物繁殖、生長(zhǎng)的特定場(chǎng)所及有關(guān)條件，即圍繞實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的所有事物的總和，稱實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境包括外環(huán)境和內(nèi)環(huán)境。（

6、一）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物外環(huán)境是指實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)施以外的環(huán)境。（二）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物內(nèi)環(huán)境是指依科研要求和人們的意愿，將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的生長(zhǎng)、繁殖或活動(dòng)限定在某種特定的人工場(chǎng)所范圍內(nèi)。內(nèi)環(huán)境又分為小環(huán)境和大環(huán)境。,二、影響動(dòng)物實(shí)驗(yàn)效果的環(huán)境因素動(dòng)物的性狀表現(xiàn)主要由遺傳因素和環(huán)境因素決定。動(dòng)物試驗(yàn)處理的反應(yīng)可用此式表示： R＝（A＋B＋C）×D＋E。式中：R＝實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的總反應(yīng)；A＝實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種的共同反應(yīng)；B

7、＝動(dòng)物品種及品系特有的反應(yīng)；C＝動(dòng)物個(gè)體反應(yīng)（個(gè)體差異）；D＝環(huán)境的影響（包括實(shí)驗(yàn)處理）；E＝實(shí)驗(yàn)誤差?？梢姡篈、B、C是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物本身的反應(yīng)，遺傳因素起決定性作用；D是環(huán)境因素，它與動(dòng)物的總反應(yīng)R呈正相關(guān)，并起主要作用。,三、環(huán)境因素的分類（一）氣候因素包括溫度、濕度、氣流、風(fēng)速、換氣次數(shù)等。（二）理化因素包括臭氣、二氧化碳、粉塵、噪聲、照度、消毒劑、有害化學(xué)物質(zhì)等。（三）生物因素包括動(dòng)物飼養(yǎng)密度、微生物、與人和其他動(dòng)

8、物的關(guān)系。,四、各種環(huán)境因素對(duì)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)效果的影響（一）溫度：當(dāng)環(huán)境溫度過(guò)低時(shí)，常導(dǎo)致哺乳類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性周期的推遲，而溫度越過(guò)30℃時(shí)，雄性動(dòng)物則出現(xiàn)睪丸萎縮，產(chǎn)生精子的功能下降。實(shí)驗(yàn)環(huán)境溫度過(guò)高或過(guò)低，都能導(dǎo)致機(jī)能抵抗力下降，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的正確性，甚至造成動(dòng)物死亡。隨著氣溫的升高，小鼠的脈搏數(shù)、呼吸數(shù)和發(fā)熱量都直線下降。（二）濕度當(dāng)環(huán)境濕度達(dá)到飽和狀態(tài)時(shí)（即高溫、高濕的情況下），動(dòng)物體的蒸發(fā)收到抑制，容易引起代謝紊亂，使動(dòng)物

9、機(jī)體抵抗力下降，發(fā)病率增加。在高濕的情況下，有利于病原微生物和寄生蟲的生長(zhǎng)繁殖，墊料與飼料易發(fā)生霉變。對(duì)動(dòng)物的健康不利。在低濕的情況下，大、小鼠的哺乳母鼠常發(fā)生拒哺乳或吃仔鼠現(xiàn)象，甚至仔鼠發(fā)育不良。,低濕使室內(nèi)灰塵飛揚(yáng)，容易引起動(dòng)物呼吸道疾病。當(dāng)溫度為27℃、相對(duì)濕度20℃時(shí)，幾乎所有大鼠都發(fā)生環(huán)尾癥。（三）氣流和風(fēng)流實(shí)驗(yàn)動(dòng)物單位體重與體表面積的比值較大，氣流速度過(guò)小，空氣流通不暢，動(dòng)物體表散熱困難，就易患病，甚至死亡；氣流

10、速度過(guò)大，動(dòng)物體表熱量增加，同樣危急健康。在雙走廊SPF設(shè)施中，空氣流動(dòng)方向是從清潔走廊－飼育室－污物走廊、淋浴室－設(shè)施外，室內(nèi)處于正壓。而在污染或放射性實(shí)驗(yàn)的動(dòng)物房，為了防止微生物和放射性物質(zhì)擴(kuò)散，室內(nèi)必須處于負(fù)壓。國(guó)際上一般規(guī)定設(shè)施內(nèi)的壓力梯度為20～50Pa。布置動(dòng)物籠架、籠具時(shí)應(yīng)盡量避開風(fēng)口。,（四）空氣潔凈度1、氣體污染動(dòng)物糞尿等排泄物發(fā)酵分解產(chǎn)生的污物種類很多，其中氨濃度常是判斷飼養(yǎng)室污染狀況的監(jiān)測(cè)指標(biāo)。氨是一種刺

11、激性氣體，當(dāng)其濃度升高時(shí)，可刺激動(dòng)物眼結(jié)膜、鼻腔黏膜和呼吸道黏膜而引起流淚、咳嗽，嚴(yán)重者甚至產(chǎn)生急性肺水腫而引起動(dòng)物死亡。長(zhǎng)期處于高濃度氨的環(huán)境下，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物上呼吸道可出現(xiàn)慢性炎癥，使這些動(dòng)物失去使用價(jià)值。2、顆粒物污染動(dòng)物飼養(yǎng)間的空氣中顆粒物的來(lái)源主要有兩個(gè)途徑：一種是室外空氣未經(jīng)過(guò)濾處理直接進(jìn)入飼養(yǎng)室內(nèi)；另一種是動(dòng)物的皮毛、皮屑以及飼料、墊料等被氣流攜帶在空氣中漂浮，形成顆粒物污染。這種小顆粒，經(jīng)呼吸道吸入體內(nèi)后到達(dá)細(xì)支氣管與肺

12、泡而引起呼吸道疾病。,（五）通風(fēng)與換氣換氣量的多少可以根據(jù)動(dòng)物代謝量來(lái)定。但一般動(dòng)物房的換氣以換氣次數(shù)來(lái)衡量，即每室的空氣1h更換幾次。雖然換氣次數(shù)越高，空氣越新鮮，但換氣次數(shù)增加勢(shì)必導(dǎo)致能量的損失增加，所以一般控制在適當(dāng)?shù)拇螖?shù)。（六）光照光線對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的影響主要表現(xiàn)在生理和行為活動(dòng)。持續(xù)光照，則過(guò)度刺激生殖系統(tǒng)，產(chǎn)生連續(xù)發(fā)情，大、小鼠出現(xiàn)永久性陰道角化，有多數(shù)卵泡達(dá)到排卵前期，但不形成黃體。光照過(guò)強(qiáng)會(huì)導(dǎo)致雌性動(dòng)物帶仔能力差

13、，甚至出現(xiàn)吃仔和哺乳不良現(xiàn)象。強(qiáng)光照還使動(dòng)物出現(xiàn)視網(wǎng)膜退行性變化，白色大鼠仔540～980Lux照度下持續(xù)65d，其角膜完全變性。,（七）音響噪聲噪聲可引起動(dòng)物緊張，并使動(dòng)物受到刺激?？梢鹪惺蟮牧鳟a(chǎn)或母鼠放棄哺育幼仔。噪聲可造成動(dòng)物聽源性痙攣。（八）居住因素1、籠器具籠器具應(yīng)選用標(biāo)準(zhǔn)的無(wú)毒、耐腐蝕、耐高壓、易沖洗、易消毒滅菌的耐用材料制成，并應(yīng)符合動(dòng)物生理生態(tài)及防逃逸的要求。各類動(dòng)物所占籠具最小面積應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)要求?；\器

14、具內(nèi)外邊角均應(yīng)圓滑、無(wú)銳口。2、墊料墊料應(yīng)使用標(biāo)準(zhǔn)的無(wú)毒、無(wú)異味、無(wú)油脂、吸濕性強(qiáng)，粉塵少的材料，經(jīng)消毒或滅菌后使用。,3、飲水清潔級(jí)以上動(dòng)物必須飲用經(jīng)酸化無(wú)菌、高壓滅菌或超濾去菌的水。（九）生物因素1、空氣中的微生物空氣中微生物的含量是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境檢測(cè)的重要指標(biāo)。2、社會(huì)因素和飼養(yǎng)密度實(shí)驗(yàn)動(dòng)物社會(huì)因素是指在某個(gè)種屬中，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物個(gè)體的優(yōu)劣、社會(huì)地位及飼養(yǎng)密度等。飼養(yǎng)密度可對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的社會(huì)造成明顯影響。,第三節(jié)

15、影響動(dòng)物實(shí)驗(yàn)效果的營(yíng)養(yǎng)因素,第四節(jié) 影響動(dòng)物實(shí)驗(yàn)效果的技術(shù)因素,一、動(dòng)物的選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇原則（一）相似性原則：在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇通常依據(jù)對(duì)試驗(yàn)品的敏感程度，或試驗(yàn)品在體內(nèi)的代謝轉(zhuǎn)歸與人體的相似性來(lái)確定。（二）差異性原則：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)某些刺激的敏感性與人有差異，在實(shí)驗(yàn)中應(yīng)予以注意。（三）易化原則：選擇進(jìn)化程度高或結(jié)構(gòu)技能復(fù)雜的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物做模型，有時(shí)會(huì)使實(shí)驗(yàn)條件控制和實(shí)驗(yàn)結(jié)果獲得變得相當(dāng)困難。,（四）相容或相匹配原則：指

16、實(shí)驗(yàn)條件應(yīng)與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物等級(jí)相匹配。（五）可獲性原則：在不影響實(shí)驗(yàn)質(zhì)量的前提下，選擇最易獲得、最經(jīng)濟(jì)、最易飼養(yǎng)管理的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。（六）重視性、均一性原則：要選擇基因型一致或相似的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。,二、實(shí)驗(yàn)季節(jié)性不同季節(jié)，動(dòng)物的機(jī)體反應(yīng)性有一定改變。家兔的放射敏感性在春夏兩季升高，秋冬兩季降低。犬在春夏兩季照射后的死亡率比秋冬兩季為高。三、生物鐘過(guò)程：機(jī)體的有些功能還有晝夜規(guī)律性變動(dòng)。四、麻醉深度：不同的麻醉劑有不同的藥理作用和副

17、作用，應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求與動(dòng)物種類而加以選擇，,五、手術(shù)技巧手術(shù)熟練可以減少對(duì)動(dòng)物的刺激，減少動(dòng)物的創(chuàng)傷和出血，提高實(shí)驗(yàn)成功率和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的正確性。六、實(shí)驗(yàn)用藥物給藥的途徑、制劑和劑量是影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果很重要的易俗。,動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)一、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)應(yīng)具備的條件動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的正確與否，取決于兩個(gè)方面：一要熟識(shí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)及有關(guān)學(xué)科專業(yè)知識(shí)；二要符合統(tǒng)計(jì)學(xué)要求，而不僅僅在實(shí)驗(yàn)后作統(tǒng)計(jì)處理。二、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的基本類型。（一）完全隨機(jī)化設(shè)計(jì)

18、將動(dòng)物隨機(jī)分配到處理組及對(duì)照組作實(shí)驗(yàn)觀察。先將動(dòng)物按順序編號(hào)，再用隨機(jī)化工具，如查隨機(jī)數(shù)字表，將動(dòng)物分組。,（二）隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)將一窩歸為一區(qū)組，再將各區(qū)組動(dòng)物隨機(jī)分到處理組和對(duì)照組中?！∮捎谕C動(dòng)物在遺傳、營(yíng)養(yǎng)、微生物攜帶上的一致性都較高，而各區(qū)組內(nèi)每只動(dòng)物接受何種處理是隨機(jī)的，所以隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)的均衡性好，可減少誤差，提高實(shí)驗(yàn)效率，統(tǒng)計(jì)分析也較簡(jiǎn)易。（三）配對(duì)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物個(gè)體之間差異較大時(shí)，可采用配對(duì)設(shè)計(jì)。即將個(gè)體差異較小的