匹羅卡品幼鼠致癇模型制作及GFAP、synapsinⅠ表達(dá)變化.pdf

1、中南大學(xué)碩士學(xué)位論文匹羅卡品幼鼠致癇模型制作及GFAP、synapsinⅠ表達(dá)變化姓名：魏超平申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：兒科學(xué)指導(dǎo)教師：尹飛20090501碩士學(xué)位論文中文摘要現(xiàn)今大多數(shù)癲癇動(dòng)物實(shí)驗(yàn)都以成年鼠為研究對(duì)象，少有模擬小兒癲癇的動(dòng)物模型。研究發(fā)現(xiàn)，未發(fā)育成熟的大腦與成熟大腦在癲癇致病因素、發(fā)生發(fā)展、臨床和腦電圖(EEG)表現(xiàn)、對(duì)抗癲癇藥物反應(yīng)以及預(yù)后上均有很大不同。本實(shí)驗(yàn)中，我們以未成年鼠為研究對(duì)象，選用匹羅卡品致癇，研究模型鼠

2、海馬形態(tài)學(xué)改變；通過(guò)免疫組織化學(xué)和免疫印跡方法檢測(cè)GFAP、synapsinI在海馬各亞區(qū)動(dòng)態(tài)表達(dá)，并探討其與發(fā)育期大鼠慢性癲癇的關(guān)系。第一部分匹羅卡品顳葉內(nèi)側(cè)癲癇模型的建立及致癇幼鼠海馬形態(tài)學(xué)改變目的建立一種簡(jiǎn)單可靠、與人類癲癇發(fā)生發(fā)展特征相似的動(dòng)物模型。方法取3周齡健康雄性SD大鼠165只，將其隨機(jī)分為生理鹽水對(duì)照組(30只)、氯化鋰一匹羅卡品實(shí)驗(yàn)組(135只)。實(shí)驗(yàn)組氯化鋰(127mg／kg)聯(lián)合匹羅卡品(50mg／kg)腹腔注射

3、，誘發(fā)大鼠出現(xiàn)癲癇持續(xù)狀態(tài)并持續(xù)90分鐘后予10％水合氯醛中止，再將存活致癇鼠隨機(jī)分為致癇后15小時(shí)、致癇后3周、致癇后8周三個(gè)亞組，每天逐只觀察存活鼠有無(wú)自發(fā)癇性發(fā)作。對(duì)照組給予等量生理鹽水腹腔注射，并隨機(jī)分為生理鹽水注射后15小時(shí)、3周、8周三個(gè)亞組。實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組每亞組再分為兩部分，一部分灌注固定制備切片行尼氏染色、Timm染色，以及GFAP、synapsinI免疫組織化學(xué)染色，另一部分取大腦海馬組織行免疫印跡分析。結(jié)果1、實(shí)驗(yàn)組

4、135只大鼠中941％成功誘發(fā)出現(xiàn)癲癇持續(xù)狀態(tài)，但死亡率高達(dá)688％。致癇后8周組大鼠中70％成年后出現(xiàn)了反復(fù)自發(fā)癇性發(fā)作和EEG上癇樣波發(fā)放。對(duì)照組大鼠行為及EEG表現(xiàn)無(wú)異常。2、致癇后15小時(shí)組大鼠海馬形態(tài)學(xué)未見有苔蘚纖維出芽及神經(jīng)元脫失的改變，但致癇后3周及8周組大鼠海馬均出現(xiàn)了明顯的苔蘚纖維出芽和神經(jīng)元脫失。苔蘚纖維出芽發(fā)生在CA3區(qū)和齒狀回內(nèi)分子層，且致癇后8周組與3周組相比有顯著性差異(PO01)。海馬CAl區(qū)、CA3區(qū)及齒