Pumilio-2在難治性癲癇患者及匹羅卡品致癇大鼠腦組織中的表達研究.pdf

1、目的：檢測 Pumilio2（Pum2）在難治性癲癇患者和氯化鋰-匹羅卡品誘導(dǎo)的癲癇大鼠模型腦組織中的表達變化情況，以探討其在癲癇發(fā)生發(fā)展中的作用。
　　方法：
　　1.收集20例難治性癲癇患者的手術(shù)切除顳葉腦標本，并收集20例嚴重腦外傷患者的顳葉手術(shù)切除標本作為對照。
　　2.選擇成年雄性S-D大鼠建立氯化鋰-匹羅卡品癲癇模型，按照癲癇發(fā)展的不同階段將大鼠隨機分成7個組，分別是生理鹽水對照組、癲癇大發(fā)作后1天、3天、

2、7天、14天、30天和60天組。
　　3.用實時熒光定量PCR檢測miR-134、Pum2和Nav1.6的表達水平，免疫印跡和免疫組織化學(xué)染色技術(shù)進一步驗證Pum2的表達水平，用免疫組織熒光雙標技術(shù)對 Pum2進行細胞定位，用 Golgi染色檢測神經(jīng)元樹突形態(tài)的變化。
　　結(jié)果：
　　1.miR-134在大鼠癲癇模型中各時間點表達均升高，除外癲癇大發(fā)作后7天和14天，在1天、3天、30天和60天時與對照組相比差異都有統(tǒng)

3、計學(xué)意義（p＜0.05）。
　　2.Pum2在難治性癲癇患者腦組織中的表達顯著低于正常對照組（p＜0.05）。
　　3.Pum2在大鼠癲癇模型中的表達下降，實時熒光定量 PCR和免疫印跡分析結(jié)果表明Pum2在癲癇大發(fā)作后各時間點的表達均顯著低于正常對照組（p＜0.05），免疫組織化學(xué)染色顯示 Pum2在癲癇大發(fā)作后3天、7天、14天、30天和60天的表達明顯低于正常對照組（p＜0.05），1天時Pum2的表達降低，但差異無統(tǒng)

4、計學(xué)意義（p＞0.05）。
　　4.免疫組織熒光雙標技術(shù)提示Pum2定位于神經(jīng)元胞漿和樹突內(nèi)，在細胞核以及星形膠質(zhì)細胞中均無表達。
　　5.匹羅卡品誘導(dǎo)的癲癇大鼠海馬區(qū)神經(jīng)元樹突的分支和長度增加，與對照組相比有統(tǒng)計學(xué)差異（p＜0.05）。
　　6.Nav1.6在大鼠癲癇模型中各時間點表達均升高，除外癲癇大發(fā)作后60天,其余時間點與對照組相比差異都有統(tǒng)計學(xué)意義（p＜0.05）。
　　結(jié)論：Pum2在難治性癲癇患者和