重組大腸桿菌BL21(DE3)-rbLF-N高密度培養(yǎng)條件優(yōu)化.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、中國農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文重組大腸桿菌BL21(DE3)rbLFN高密度培養(yǎng)條件優(yōu)化姓名:林少華申請學位級別:碩士專業(yè):農(nóng)產(chǎn)品加工與貯藏工程指導教師:葛克山任發(fā)政20070601AbstractLactofcrrcin,releasedfromtheNterminusoflactoferrinbypepsincleavageatacidicconditionisafragmaaofpolypeptideLactoferrcinhmmany

2、uniquebiologicalfunctions,inwhichtheantimicrobialactivityhasbeenextensive掃investigatedDuetolimitedresourcgandhighcostofthematralbovinelactoferrcingenecloningDNArecombinantandhighcelldensityculturetechnologieSmeapplied,re

3、ducingthecosLimprovingtheefficiencyandcreatingmorebenefitsInthepaper,thefermentationculturemediumsofEcoilBL2l(DE3)/toLFNhavebeenoptimizedTheoptimummediumcompositionswereasfollows(ing,L):trypteml6,yeastexlrnctlO,glucose10

4、,NaCI5,citricacid3,NaHlP04‘2H2028,Na2HP04‘12H2065,Ko腫04‘3H204I,(hat4)2S0410,Ntt4C10I,MgS04‘7H20I13,ZnSq711200028,CaClz2H20004,MnS04H20O0l,AICl36H20001,CroCi2H200001,H3130200005,F(xiàn)eS047E【2000054mfinalharvestdrycellweightof

5、EcoltBL21(DE3)/rbLFNfermentedintheoptimumculturemediumsWag178timesasmanyastha£beforeoptimizationTheoptimuminductionconditionWagthecombinationofadditionofO1mMIPTGwith20g,LlactoseFedbatchcultureprocessofEcoilBL21(DE3)/rbLF

6、NWascarriedouttoproducerecombinantbovinelactofcrrinNpolypeptide(枷—N)ina19LautoconlrolbioengineeringfcrmentorSeveralfeedingstrategies,includingbatchfermentation,pH—statfeeding,exponentialfeedingandcombinat/onofexponential

7、feedingandpHstatfeeding,WeIecomparedtoobtainthevolumetricprodnctiviti%Finally,thecombinedstrategyWasadoptedandhigherconcentrationl印to81359/L(bydrycellweight,DCW)ofbrothbiomassand5259幾rbLFNwereobtainedTheaccumulationoface

8、tateOVCY259/L,whichusual】yoccurredduringtheprocessofhighdensitycultureofEscherichia蒯andespeciallyintheinductionstageWaSavoidedThcplasmidstabilityWasmaintainedathighlevelsKeyword:Lactofetrcin,RecombinantEcoliBL21(DE3),F(xiàn)er

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