枯草芽孢桿菌高密度培養(yǎng)及保護(hù)劑的優(yōu)化研究.pdf

1、本課題是以實(shí)驗(yàn)室保存的枯草芽孢桿菌FC96為實(shí)驗(yàn)材料,通過(guò)摸索該菌株搖瓶發(fā)酵工藝的技術(shù)和數(shù)據(jù),確定適合該菌株發(fā)酵的最佳培養(yǎng)基成分和發(fā)酵條件;進(jìn)一步通過(guò)對(duì)該菌株保護(hù)劑的優(yōu)化。保證該菌株在干燥過(guò)程中最大的存活率。本課題為枯草芽孢桿菌FC96的發(fā)酵生產(chǎn)和保存等一系列研究奠定了基礎(chǔ)。
　　 本課題對(duì)FC96的液體發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行了優(yōu)化研究。通過(guò)單因素篩選試驗(yàn),確定適合FC96液體發(fā)酵培養(yǎng)基的最佳碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽分別為葡萄糖、牛肉膏和磷酸

2、二氫鉀。然后采用響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)化葡萄糖、牛肉膏和磷酸二氫鉀的最佳配比。得出結(jié)論:FC96的液體搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)基成分為:葡萄糖12.11g/L、牛肉膏23.31g/L和磷酸二氫鉀2.33g/L。優(yōu)化后的菌數(shù)達(dá)到了2.97×109CFU/mL,比初始液體搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵水平提高了92.8％。
　　 本課題對(duì)FC96的搖瓶培養(yǎng)條件進(jìn)行了優(yōu)化,得到FC96的最佳接種量為3％、裝液量為100mL/300mL、轉(zhuǎn)速140r/min、初始

3、pH7.5、最佳培養(yǎng)溫度35℃、最佳培養(yǎng)時(shí)間16h。在優(yōu)化后的培養(yǎng)條件下菌數(shù)與初始培養(yǎng)條件相比提高了34.12％。
　　 本課題對(duì)干燥過(guò)程中所添加的保護(hù)劑進(jìn)行了優(yōu)化,干燥過(guò)程中的高溫環(huán)境對(duì)菌株的存活產(chǎn)生了非常大的影響,所以在噴霧干燥過(guò)程中添加保護(hù)劑就顯得尤為重要了。本課題就FC96在干燥過(guò)程中所添加的保護(hù)劑進(jìn)行了優(yōu)化。通過(guò)單因素篩選試驗(yàn)確定甘油、吐溫80和脫脂乳粉這三種保護(hù)劑對(duì)高溫環(huán)境下FC96的存活率有明顯的提高,進(jìn)一步通過(guò)響