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文檔簡(jiǎn)介
1、本文以嗜酸乳桿菌(Lactobacillus acidophilus)La-1為研究對(duì)象,篩選適合工業(yè)化生產(chǎn)的廉價(jià)增殖培養(yǎng)基,研究乳酸菌高密度培養(yǎng)的方法及工藝技術(shù),提高單位體積的菌體數(shù)量,研究細(xì)胞濃縮分離、干燥等工藝條件,探索提高乳酸菌在凍干過(guò)程中存活率的措施,制備高效濃縮型發(fā)酵劑,為高效濃縮型乳酸菌發(fā)酵劑在我國(guó)的推廣應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。
確定La-1菌的發(fā)酵培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件。以玉米粉培養(yǎng)基、酵母浸出液培養(yǎng)基、乳清粉培養(yǎng)基、
2、麥芽汁培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,以試驗(yàn)室常用的MRS液體培養(yǎng)基為對(duì)照培養(yǎng)基,從中篩選出適合嗜酸乳桿菌生長(zhǎng)的乳清粉培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基。通過(guò)Minitab軟件對(duì)乳清粉培養(yǎng)基進(jìn)行優(yōu)化,確定乳酸菌增殖培養(yǎng)基配方為乳清粉12.99%、葡萄糖2.75%、NH4H2PO40.52%。La-1最適生長(zhǎng)溫度為37℃,最適接種量4%,最適起始pH為6.5。
建立La-1菌中空纖維膜和生物反應(yīng)器偶聯(lián)的高密度培養(yǎng)方式,采用孔徑為0.11μm,有效過(guò)濾面
3、積為1.5 m2的中空纖維膜組件,通過(guò)管道與泵和發(fā)酵罐相連。利用膜的分離作用排出乳酸菌代謝產(chǎn)物,同時(shí)流加新鮮培養(yǎng)基,期間順控pH6.0,從而達(dá)到乳酸菌的高密度連續(xù)培養(yǎng),利用此裝置進(jìn)行乳酸菌高密度培養(yǎng),嗜酸乳桿菌菌體密度最終達(dá)到3.1×1010cfu/mL。
對(duì)菌體收集工藝、干燥工藝和菌體保護(hù)劑進(jìn)行了優(yōu)化篩選。結(jié)果表明,將乳酸菌培養(yǎng)液在6000 r/min,離心15 min,能保證較高的菌體得率,最終乳酸菌存活率為30.23
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