青春雙歧桿菌高密度培養(yǎng)方法及凍干工藝的研究.pdf

1、本文研究了補(bǔ)料高密度培養(yǎng)青春雙歧桿菌的工藝，得到了高密度雙歧桿菌培養(yǎng)物，同時篩選出雙歧桿菌凍干菌粉制備的工藝條件，主要內(nèi)容和結(jié)論如下： 1.通過對青春雙歧桿菌進(jìn)行補(bǔ)料高密度培養(yǎng)達(dá)到了較高的活菌數(shù)在青春雙歧桿菌液體分批培養(yǎng)研究的基礎(chǔ)上，通過補(bǔ)加堿液調(diào)整發(fā)酵過程中培養(yǎng)基pH值，補(bǔ)加葡萄糖消除碳源減少對雙歧桿菌增殖的抑制，延長了發(fā)酵過程的對數(shù)生長期，提高了最大活菌數(shù)，實現(xiàn)青春雙歧桿菌的高密度培養(yǎng)。發(fā)酵罐高密度培養(yǎng)對數(shù)生長期由6h提高到

2、14h，延長8h，最大活菌數(shù)從3.9×108cfu/mL提高到4.6×109cfu/mL，提高10.8倍。 2.確定了10L發(fā)酵罐高密度培養(yǎng)青春雙歧桿菌的工藝條件在研究了青春雙歧桿菌發(fā)酵罐分批培養(yǎng)和鹽水瓶補(bǔ)料高密度培養(yǎng)的基礎(chǔ)上，確定發(fā)酵罐高密度培養(yǎng)的工藝條件：10L發(fā)酵罐中培養(yǎng)基滅菌后為8L，初始pH值7.0，通入氮?dú)獗３謮毫?，壓力?.1MPa，接種量5﹪，37℃攪拌培養(yǎng)，轉(zhuǎn)速80r/min。培養(yǎng)6h后發(fā)酵液pH值降至5.76

3、，從發(fā)酵罐補(bǔ)料口滴加堿液保持pH值=6；葡萄糖濃度12h降至4g/L,此時開始補(bǔ)糖，使糖濃度保持在4-6g/L。6-20h為菌體生長的對數(shù)期，在對數(shù)生長期末期放罐，此時發(fā)酵液OD值達(dá)到2.3。 3.篩選得到了青春雙歧桿菌真空冷凍干燥的最佳工藝條件選擇對數(shù)生長期末期發(fā)酵罐補(bǔ)料高密度培養(yǎng)的青春雙歧桿菌發(fā)酵液作為制備凍干菌粉的菌種來源，在無菌條件下6000r/min離心10min，棄上清液，在菌泥中添加發(fā)酵液體積10﹪的保護(hù)劑，充分混