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1、本研究的目的是建立豬組織硫酸黏菌素的微生物檢測(cè)方法,并用于研究硫酸黏菌素在豬體內(nèi)的殘留消除規(guī)律。 本文采用磷酸鹽緩沖液和5%硫酸溶液提取豬肉、肝臟和腎臟中的硫酸黏菌素,并用支氣管炎博德特氏ATCC 4617作為檢測(cè)菌,檢測(cè)豬血清及肌肉、肝臟和腎臟提取液中的硫酸黏菌素。豬血清和豬組織提取液的標(biāo)準(zhǔn)曲線分別在0.2~6.4μg·mL<'-1>和0.025~6.4μg·mL<'-1>范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。肌肉檢測(cè)限為0.15μg·mL<'
2、-1>,肝臟和腎臟檢測(cè)限為0.075μg·mL<'-1>。組織添加3.2、0.8和0.2μg·mL<'-1>藥物的平均回收率在80~102%之間,日內(nèi)變異系數(shù)(CV)在3.9~8.0%之間,日間CV在5.3~10.4%之間。 豬按2.5 mg/kg劑量肌肉注射硫酸黏菌素,一天2次,連續(xù)3天。停藥后各時(shí)間點(diǎn)(12 h、1d、2 d、3 d、5 d、7 d、10 d和14 d)屠宰仔豬并收集血樣和組織樣品進(jìn)行硫酸黏菌素殘留量檢測(cè)。結(jié)
3、果顯示在停藥后12 h各組織藥物含量最高;停藥后1 d臀肌和肝臟檢測(cè)到痕量藥物,血清在停藥2 d后沒有檢測(cè)到藥物,注射部位肌肉在停藥7 d能檢測(cè)到痕量,腎臟在停藥14 d仍然能檢測(cè)到藥物。用SAS、EXCEL和WT1.4軟件計(jì)算藥物在腎臟MRL的時(shí)間分別為6.3、6.5和7.2天,其中WT1.4計(jì)算的休藥期在95%置信區(qū)間為9.6天,因此建議肌肉注射給予黏菌素的休藥期不能低于10天。 本研究通過改進(jìn)微生物檢測(cè)方法和組織提取方法,
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