鯽魚(yú)肌肉中阿維菌素類(lèi)殘留檢測(cè)和消除規(guī)律研究.pdf

1、阿維菌素(AVM)和伊維菌素(IVM)是兩種大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)抗寄生蟲(chóng)藥，在我國(guó)畜禽和水產(chǎn)養(yǎng)殖上已獲廣泛應(yīng)用。為了監(jiān)測(cè)鯽魚(yú)肌肉(包括皮)中AVM和IVM殘留情況，以及為制定合理的休藥期提供科學(xué)依據(jù)，本文建立了鯽魚(yú)肌肉(包括皮)中AVM和IVM高效液相色譜-熒光(HPLC-FLD)多殘留檢測(cè)方法，分別研究了AVM和IVM在鯽魚(yú)肌肉(包括皮)中的殘留消除規(guī)律，并對(duì)重慶市部分地區(qū)的鯽魚(yú)進(jìn)行了肌肉(包括皮)中AVM和IVM的殘留檢測(cè)。 鯽魚(yú)肌肉

2、(包括皮)中AVM和IVM多殘留檢測(cè)的方法學(xué)研究：樣品用乙腈提取，正己烷脫脂凈化，多拉菌素作內(nèi)標(biāo)，經(jīng)1-甲基咪唑和三氟乙酸酐的乙腈溶液在室溫下避光衍生化并在甲醇中水解后，進(jìn)行HPL-FLD檢測(cè)分析。色譜條件為，流動(dòng)相：甲醇/水(94/6，v：v)；流速：1.0mL/min；，檢測(cè)波長(zhǎng)：激發(fā)波長(zhǎng)365nm，發(fā)射波長(zhǎng)475nm；柱溫：35℃；進(jìn)樣量：20μL。結(jié)果，AVM和IVM在5～100ng/g范圍內(nèi)具有良好線(xiàn)性，R2均為0.9998；

3、檢測(cè)限分別為0.8ng/g和1 ng/g，定量限分別為2.7 ng/g和3.4 ng/g；AVM和IVM的提取回收率分別為92.15％～104.53％和91.32％～103.03％；方法回收率分別為90.50％～104.54％和94.08％～106.38％：日內(nèi)和日間變異系數(shù)分別小于9.29％、7.74％和5.84％、6.71％。該方法高效、靈敏、簡(jiǎn)便，其靈敏度、回收率和重現(xiàn)性等符合有關(guān)獸藥殘留檢測(cè)要求，可用于鯽魚(yú)肌肉中AVM和IVM的

4、多殘留檢測(cè)。 AVM和IVM在鯽魚(yú)肌肉中的殘留消除規(guī)律研究：試驗(yàn)?zāi)M水產(chǎn)養(yǎng)殖實(shí)際，在27～31℃的自然水溫中，分兩個(gè)試驗(yàn)進(jìn)行，每個(gè)試驗(yàn)的試驗(yàn)組飼養(yǎng)45 g左右的健康鯽魚(yú)100尾，50尾作對(duì)照組。試驗(yàn)一，在魚(yú)缸中單次潑灑AVM乙醇溶液，使水體中AVM濃度為1.32 ng/mL；試驗(yàn)二組，在魚(yú)缸中單次潑灑IVM乙醇溶液，使水體中IVM濃度為1.23 ng/mnL。對(duì)照組不添加藥物。給藥后0、1、3、5、8、10、11、14、16、2

5、1、25、28、32和35 d取樣，采集鯽魚(yú)肌肉(包括皮)樣品，用本研究所建立的方法分別檢測(cè)鯽魚(yú)肌肉(包括皮)中AVM和IVM殘留量。結(jié)果，給藥后0 d(給藥后4和5 h即為零休藥期)，鯽魚(yú)肌肉(包括皮)中AVM含量為13.68±4.68 ng/g，IVM含量為8.1±1.67 ng/g；AVM和IVM殘留濃度均在給藥后第3 d達(dá)到峰值，分別為36.38±6.20 ng/g和25.47+3.16 ng/g；AVM殘留濃度約在給藥后第10

6、 d降至一半，IVM約在給藥后第11 d天降至一半：鯽魚(yú)肌肉(包括皮)中AVM在給藥后第32 d未檢出，WM在給藥后第28 d未檢出。鯽魚(yú)肌肉(包括皮)中AVM的藥動(dòng)學(xué)主要參數(shù)分別為：峰殘留量(Cmax)為31.42 ng/g，達(dá)峰時(shí)間(Tmax)為3.53 d，曲線(xiàn)下面積(AUC)為469.88d．ng/g，消除半衰期(t2/2)為7.48 d。消除曲線(xiàn)方程：LnC=-0.0922t+3.8985，用此方程計(jì)算消除半衰期t1/2e為7

7、.52 d。鯽魚(yú)肌肉(包括皮)中IVM的藥動(dòng)學(xué)主要參數(shù)分別為：Cmax為24.51ng/g，Tmax為3.91 d，AUC為293.13d ng/g，t1/2k為4.42d。消除曲線(xiàn)方程：LnC=-0.1382t+3.9202，用此方程計(jì)算消除半衰期t1/2e為5.01 d。結(jié)果表明：鯽魚(yú)對(duì)水中的這兩種藥物中吸收快，蓄積濃度不高，滯留時(shí)間較長(zhǎng)，消除較為緩慢。目前，國(guó)內(nèi)外尚無(wú)AVM和IVM在鯽魚(yú)體內(nèi)的MRL(最高殘留限量)及休藥期(WDT

8、)規(guī)定，本研究分別參照歐盟(EC)和中國(guó)農(nóng)業(yè)部法規(guī)中規(guī)定的AVM(標(biāo)記殘留物AVM B1a)在羊肌肉的MRL20μg/kg和25 μg/kg，通過(guò)WDT公式計(jì)算，AVM對(duì)于鯽魚(yú)的WDT理論上分別為9.79 d和7.37 d；通過(guò)WT1.4軟件分析，WDT分別為14.97 d和12.64 d，考慮理論與實(shí)際的差別，建議延長(zhǎng)至19 d；參照歐盟(EC)和中國(guó)農(nóng)業(yè)部法規(guī)規(guī)定的WM(標(biāo)記殘留物IVM H2B1a)在羊肌肉的MRL20 μg/kg