2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、阿維菌素類藥物(Avermectins,AVMs)屬于大環(huán)內(nèi)酯類廣譜驅(qū)蟲藥物,由于其優(yōu)良的驅(qū)蟲活性而廣泛應用于養(yǎng)殖業(yè)。然而作為高毒性的化合物,其在動物可食性組織中的殘留問題令人關注。本研究建立了動物可食性組織中阿維菌素類藥物免疫親和色譜凈化和固相萃取前處理技術,并建立了用于AVMs殘留檢測的液相色譜法(HPLC)和液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法(包括IAC-LC-MS/MS和SPE-LC-MS/MS方法),為阿維菌素類藥物殘留監(jiān)測提供了常規(guī)定量和確

2、證方法。 建立了牛肝臟、牛肌肉和豬肝臟組織中埃普菌素(eprinomectin)、阿維菌素(abamectin)、多拉菌素(doramectin)和伊維菌素(ivermectin)殘留的固相萃取凈化,HPLC-熒光檢測器測定方法。組織樣品用乙腈提取,提取液經(jīng)C18SPE柱凈化,再用N-甲基咪唑,三氟乙酸酐,三乙胺和乙酸室溫衍生化30min,最后HPLC測定。在5、10和150ng/g的添加水平,在上述組織中各藥物的回收率在67.

3、53%-93.65%之間,變異系數(shù)在0.86%-16.99%之間。檢測限為0.5-1.0ng/g;定量限為1-2ng/g。滿足AVMs殘留檢測的要求。 本文通過對阿維菌素進行結構改造,用混合酸酐法與BSA偶聯(lián)合成了完全抗原,免疫家兔獲得了抗ABM的多克隆抗體。該抗體對阿維菌素類藥物的交叉反應:埃普菌素為145.4%、伊維菌素為25.0%、多拉菌素為12.3%。并應用此抗體制備了免疫親和色譜(Immunoaffinetychrom

4、atography,IAC)柱,該IAC柱可同時特異性結合阿維菌素、伊維菌素、多拉菌素和埃普菌素,動態(tài)柱容量分別為3540、3448、3321和3461ng/mLgel,絕對柱容量分別為495、483、465和484ng/mgIgG。IAC柱在一個月的時間內(nèi)重復使用20次后,上述藥物的動態(tài)柱容量仍能達到600ng/mLgel。 國內(nèi)外首次建立了牛肝臟和肌肉組織中埃普菌素、阿維菌素、多拉菌素和伊維菌素殘留的IAC-HPLC-MS/

5、MS檢測方法。組織樣品用甲醇提取,提取液經(jīng)PBS緩沖液稀釋后上IAC柱,用PBS-甲醇和純水-甲醇溶液淋洗,甲醇洗脫,液相色譜-電噴霧陽離子-串聯(lián)質(zhì)譜(LC-ESI+-MS/MS)測定,分別選取m/z為936.6,895.6,921.5和897.5的離子作母離子;m/z為352.0*和490.0,449.3*和327.4,353.2*和449.0,329.1*和753.3的產(chǎn)物離子作質(zhì)譜檢測的確證和定量離子(*為定量離子)。在5、10、

6、20和50ng/g的濃度添加水平,牛肝臟組織中藥物的回收率為62.93%-84.03%,變異系數(shù)為6.02%-17.39%;牛肌肉組織中藥物的回收率為63.25%-86.91%,變異系數(shù)為5.61%-15.92%。上述藥物的確證檢測限為2.5ng/g,定量限為5ng/g。 同時,建立了牛肝臟和肌肉中上述4種藥物殘留的固相萃取凈化-液質(zhì)聯(lián)機測定方法,該方法上述藥物的回收率、檢測限和定量限與IAC-HPLC-MS/MS方法相當。但I

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