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文檔簡介
1、本研究應用高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(HPLC-MS/MS)研究建立了肉羊血清、尿液、肝臟、肌肉和被毛等基質(zhì)中鹽酸克倫特羅(CL)殘留的檢測方法。樣品經(jīng)提取、濃縮及凈化后,采用HPLC-MS/MS檢測,應用基質(zhì)補償消除樣品基質(zhì)對CL測定的影響。在優(yōu)化條件下,血清和尿液中CL的線性范圍為0.2~200ng/mL,肝臟和肌肉中CL的線性范圍為0.1~100ng/g,被毛中CL的線性范圍為0.5~100ng/g,線性相關(guān)系數(shù)(r)均高于0.99。
2、羊血清和尿液中CL的檢測限為0.06ng/mL,定量限為0.2 ng/mL;肝臟和肌肉中CL的檢測限為0.03ng/g,定量限為0.1 ng/g;羊毛的檢測限為0.1 ng/g、定量限為0.5 ng/g。在樣品基質(zhì)中添加不同濃度水平的CL(濃度范圍為5~20ppb),血清中CL的平均回收率為71.50%~86.25%,相對標準偏差(RSD)低于17.63%;尿液中CL的平均回收率為81.54%~113.61%,RSD低于14.23%;肝
3、臟中CL的平均回收率為70.78%~94.20%,RSD低于3.18%;肌肉中CL的平均回收率為100.06%~117.00%,RSD低于7.28%;被毛中CL的平均回收率為88.54%~103.12%,RSD低于8.10%。該方法的靈敏度高,準確度好,能夠滿足肉羊不同組織中CL的測定。
試驗研究了CL在肉羊血清、尿液、肝臟及肌肉中的代謝殘留規(guī)律。18頭健康去勢雜交公羊(30kg±5kg)每頭每天灌胃50μg/kg.BW的
4、CL,連續(xù)給藥21d。給藥及停藥期間,在規(guī)定時間點采集羊的血清和尿液,停藥后于0、1、2、3、7、14d分別隨機選3只羊屠宰,采集肝臟和肌肉測定CL含量。結(jié)果顯示,CL在肉羊體內(nèi)吸收迅速,給藥0.4h就能在血清中檢測到CL為0.72±0.54ng/mL,2h后達到第一次血藥峰值23.30±18.42 ng/mL,第21d達到藥峰值為143.32±7.51 ng/mL;停藥后血清中藥物濃度下降,半衰期為16.5h,第14d下降到3.14±
5、1.86 ng/mL。尿液是CL的主要排泄途徑,給藥后2h尿液中就能檢測到CL,濃度高達423.50±253.72 ng/mL,給藥第21d達最高濃度2070.00±49.71 ng/mL。CL在肉羊體內(nèi)吸收迅速而且代謝消除緩慢,表明該藥物在羊體內(nèi)易于蓄積殘留。
肉羊肝臟中有高濃度的CL殘留,停藥0d為193.33±6.61 ng/g,CL在肝臟中消除較慢,半衰期為25.2h,停藥第14d肝臟中CL的濃度為9.16±0.4
6、4 ng/g:肉羊肌肉中CL殘留濃度較低,停藥0d為14.65±0.64 ng/g,CL在肌肉中消除較快,半衰期為15.8h,停藥第3d降到方法定量限0.1ng/g以下。CL在羊肝臟中的高殘留嚴重威脅著消費者的健康,肌肉在停藥初期也威脅著消費者的健康。肝臟可用作檢測CL在肉羊生產(chǎn)上非法使用的靶標。
試驗研究了CL在羊毛發(fā)中的殘留規(guī)律,研究結(jié)果表明:(1)CL易在羊被毛中蓄積,以100μg/kgBW的劑量給藥4d后,白色羊毛
7、中CL的含量為6.12±0.14ng/g,黑色羊毛中CL的含量為18.11±6.52 ng/g;(2)不同顏色的羊毛對CL的蓄積不同,給藥的第16~28d及停約期間黑色羊毛中CL的含量顯著高于白色羊毛(P<0.05);(3)CL在羊毛中能夠穩(wěn)定存在,在停藥0~10d內(nèi),黑色羊毛和白色羊毛中CL的殘留濃度均保持穩(wěn)定不變,在停藥的第15d,CL的殘留開始出現(xiàn)F降趨勢。被毛是活體檢測CL非法使用較為理想的靶標,建議采集肉羊背部的被毛進行整根檢
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