鹽酸克倫特羅快速檢測(cè)試劑盒的研制與開發(fā).pdf

1、鹽酸克倫特羅（CL）是β-興奮劑的一種，具有促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)，提高飼料利用率，改善瘦肉率的作用。但該藥排泄速率慢，易蓄積在動(dòng)物組織中，引起消費(fèi)者發(fā)生急性中毒，目前已被大多數(shù)國(guó)家列為違禁藥，然而，CL濫用和殘留的問題仍然存在，靈敏、有效的殘留檢測(cè)方法是控制殘留的基本手段。 目前國(guó)際上多使用ELISA方法作為CL快速檢測(cè)的篩選方法，國(guó)內(nèi)檢測(cè)機(jī)構(gòu)一般采用進(jìn)口試劑盒進(jìn)行檢測(cè)，成本高，到貨周期長(zhǎng)，售后沒有保證，但是在這一領(lǐng)域的國(guó)產(chǎn)試劑盒產(chǎn)品又

2、存在著穩(wěn)定性差，假陰性、假陽性率高等缺點(diǎn)，從而使國(guó)產(chǎn)試劑盒在這方面遲遲未打開市場(chǎng)。本實(shí)驗(yàn)著力于研制出穩(wěn)定性好，假陰/陽性率低，能夠與國(guó)外產(chǎn)品相媲美的CL快速檢測(cè)試劑盒。 本試劑盒采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法，通過優(yōu)化條件得到最終反應(yīng)條件為：包被抗原約0.2μg/mL，抗體工作濃度約為0.059μg/mL，總體反應(yīng)時(shí)間為90min，酶標(biāo)二抗的稀釋倍數(shù)為1：1000。建立的標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍為0-8ng/mL，IC50平均為1.0ng

3、/mL，最低檢測(cè)限（LOD）達(dá)0.1ng/mL，標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)批內(nèi)變異系數(shù)為1.28-13.19％，批間變異系數(shù)在5-15％之間，試劑盒保存期在1年以上。與荷蘭（ED）試劑盒比對(duì)實(shí)驗(yàn)表明，本試劑盒的回收率在80％-120％之間，高于ED試劑盒的50％-80％的樣品回收率，同時(shí)本試劑盒可以保持穩(wěn)定1年以上，這與ED試劑盒相當(dāng)，領(lǐng)先于國(guó)內(nèi)試劑盒?？傊?，在標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)符合程度、曲線參數(shù)、實(shí)際樣品回收率等方面與ED試劑盒的測(cè)量結(jié)果相當(dāng)，部分指標(biāo)甚至優(yōu)于ED試