2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
已閱讀1頁,還剩69頁未讀, 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、鹽酸克倫特羅(Clenbuterol Hydrochloride,CLB),又稱瘦肉精,化學(xué)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定,加熱溫度至172℃方可分解,極易在動物組織中殘留。鹽酸克倫特羅對人體危害極大,消費者食用含有瘦肉精的動物肉,會引起急性中毒和慢性中毒。鹽酸克倫特羅是我國在動物飼養(yǎng)過程中禁止使用的一種藥物,許多國家、國際組織均制定有嚴(yán)格的規(guī)定。
  目前常用的檢測CLB的方法主要有酶聯(lián)免疫法、膠體金快速檢測試紙條、高效液相色譜法、氣相色譜-質(zhì)譜法和

2、生物傳感技術(shù)等,但這些方法分別適用不同的檢測對象,各有利弊。因此,開發(fā)一種靈敏、便捷的方法檢測肉中CLB的殘留十分必要。
  本試驗構(gòu)建了一種基于便攜式血糖儀檢測CLB殘留的方法。試驗利用磁性分離技術(shù),建立一種新型磁性免疫生物傳感探針檢測技術(shù),利用便攜式血糖儀檢測免疫反應(yīng)引入的轉(zhuǎn)化酶催化底物產(chǎn)生的信號,準(zhǔn)確地定量CLB殘留。該方法操作簡單、靈敏度高、檢測成本低。
  研究結(jié)果如下:
 ?。?)以單分散羧基磁珠為載體,鹽

3、酸克倫特羅完全抗原(CLB-BSA)為標(biāo)記物制備磁性免疫傳感探針。通過單因素試驗研究了CLB-BSA添加量、反應(yīng)溫度、反應(yīng)時間對偶聯(lián)率的影響;通過Box–Behnken實驗設(shè)計,建立了偶聯(lián)率隨CLB-BSA添加量、反應(yīng)溫度、反應(yīng)時間變化的回歸模型:Y=-151.943+7.700X2+6.095X3-0.0175X1X2+0.0125X1X3-0.01745X12-0.13625X22-0.2325X32?;貧w模型高度顯著,失擬項不顯著

4、,決定系數(shù)高(R2=0.9909),可用于實際預(yù)測。自變量對偶聯(lián)率影響大小的次序為反應(yīng)溫度﹥反應(yīng)時間﹥CLB-BSA添加量。
  通過響應(yīng)面法對磁性免疫傳感探針制備中CLB-BSA添加量、反應(yīng)溫度、反應(yīng)時間進(jìn)行優(yōu)化,得到制備條件的最佳參數(shù)為 CLB-BSA添加量41μg、反應(yīng)溫度25℃、反應(yīng)時間13 h。在最優(yōu)條件下進(jìn)行了5次驗證,實際測得的平均偶聯(lián)率為15.22%,與理論值僅相差0.25%。
 ?。?)制備膠體金/二抗/轉(zhuǎn)

5、化酶復(fù)合物(IgG-AuNPs-Invertase)的最佳膠體金溶液pH為8.5、轉(zhuǎn)化酶濃度為120μg/mL,兔抗羊IgG濃度為12μg/mL,轉(zhuǎn)化酶與兔抗羊IgG濃度比為10:1。
  紫外-可見吸收光譜圖顯示,制備的膠體金溶液具有較好均一性,采用本試驗的標(biāo)記方法,可成功使二抗、轉(zhuǎn)化酶標(biāo)記于膠體金表面;透射電鏡照片顯示,制備的IgG-AuNPs-Invertase顆粒均勻分散,顆粒周圍有一圈模糊可見的暈圈,同時粒徑變大,說明I

6、gG和Invertase被成功標(biāo)記到膠體金顆粒表面。
 ?。?)本試驗優(yōu)化了基于便攜式血糖儀檢測CLB殘留的測定條件,結(jié)果表明:免疫磁珠探針的用量25μg、CLB抗體1:800稀釋、IgG-AuNPs-Invertase稀釋度1:500;轉(zhuǎn)化酶參與水解反應(yīng)的最適溫度為55℃、時間為30 min。
 ?。?)本試驗構(gòu)建了一種基于便攜式血糖儀檢測CLB殘留的方法。試驗表明,該方法靈敏度高,其檢測限為0.1 ng/mL,CLB濃度

7、在0.1~100 ng/mL的范圍內(nèi),具有良好的線性關(guān)系,回歸方程決定系數(shù)(R2)為0.9969;在1 ng/g(低)、5 ng/g(中)、15 ng/g(高)添加水平下其回收率在85%~94%,標(biāo)準(zhǔn)差在5%以內(nèi),說明本方法有較高的準(zhǔn)確度;批內(nèi)變異系數(shù)在1.2%~1.6%、批間變異系數(shù)在1.1%~8.8%,說明再現(xiàn)性和穩(wěn)定性較好;對沙丁胺醇和萊克多巴胺有極低的交叉反應(yīng)性,說明特異性好。
 ?。?)向6份未檢出CLB的肉樣添加CLB

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論