大鼠前扣帶回皮層中趨化因子CX3CL1和CCL21對慢性病理性疼痛的影響.pdf

1、慢性病理性疼痛(chronic neuropathic pain)是指原發(fā)損傷修復(fù)后一直持續(xù)存在的疼痛，流行性病學(xué)顯示60％的慢性病理性疼痛的患者疼痛的持續(xù)時間超過了5年。近幾年，慢性病理性疼痛已經(jīng)成為了困擾人類健康和生命生命質(zhì)量的一個重要的問題。它主要表現(xiàn)為痛覺過敏(hyperalgesia)及痛覺超敏(allodynia);病理性疼痛產(chǎn)生機(jī)制主要分為神經(jīng)源性炎癥反應(yīng)，外周及中樞敏化，神經(jīng)元可塑性改變等等，已有的傳統(tǒng)藥物難以有效的控制

2、。
　　近年來，對于慢性病理性疼痛的很多研究顯示當(dāng)外周神經(jīng)損傷或者神經(jīng)炎癥時，脊髓中的神經(jīng)元細(xì)胞會分泌多種前炎癥細(xì)胞因子和趨化因子，促使膠質(zhì)細(xì)胞的大量激活，激活的膠質(zhì)細(xì)胞進(jìn)一步會釋放炎癥介質(zhì)和興奮性遞質(zhì)，反過來作用于神經(jīng)元細(xì)胞，使神經(jīng)元細(xì)胞處于長期的興奮和異常放電的狀態(tài)，進(jìn)而產(chǎn)生慢性神經(jīng)病理性疼痛。Verge GM和de Jong等人發(fā)現(xiàn)外周神經(jīng)損傷后，脊髓中的神經(jīng)元細(xì)胞可以表達(dá)趨化因子CX3CL1和CCL21，可以直接作用于小膠

3、質(zhì)細(xì)胞上，促進(jìn)小膠質(zhì)細(xì)胞的活化，進(jìn)而影響神經(jīng)元的興奮性。
　　三叉神經(jīng)痛(Trigeminal neuralgia)是指在三叉神經(jīng)周圍部分反復(fù)出現(xiàn)的突發(fā)性短暫的劇烈疼痛，也是近代來非常常見的慢性病性疼痛。研究發(fā)現(xiàn)三叉神經(jīng)痛發(fā)作時，前扣帶回皮層(anterior cingulate cortex，ACC)被明顯激活。本實(shí)驗(yàn)便是重點(diǎn)研究三叉神經(jīng)痛時，前扣帶回皮層中趨化因子CX3CL1，CCL21對小膠質(zhì)細(xì)胞的影響。
　　目的:觀

4、察大鼠在慢性病理性疼痛時，前扣帶回皮層中趨化因子CX3CL1和CCL21的表達(dá)對于小膠質(zhì)細(xì)胞活化的影響。
　　方法:本實(shí)驗(yàn)采用大鼠左側(cè)眶下神經(jīng)結(jié)扎模型(unilateral infraorbitalnerve，CCI-ION)。100只雄性SD隨機(jī)分為5組(n=20)。分別為假手術(shù)組;疼痛組;PBS治療對照組;CX3CL1中和抗體治療組，CCL21中和抗體治療組。假手術(shù)組僅暴露大鼠左側(cè)眶下神經(jīng)，不予結(jié)扎。疼痛組暴露大鼠左側(cè)眶下神經(jīng)

5、并結(jié)扎。這兩組分別于1，3，5，7，14d早晨9:00進(jìn)行行為學(xué)測試，并且于行為學(xué)測試完成之后處死大鼠，取其前扣帶回皮層，分別比較趨化因子CX3CL1，CCL21和CD11b的表達(dá)水平。PBS治療對照組是在眶下神經(jīng)結(jié)扎術(shù)后CCL21和CX3CL1表達(dá)水平最高的當(dāng)天10:00進(jìn)行大鼠前扣帶回皮層給藥，分別給予PBS溶液。CX3CL1中和抗體治療組和CCL21中和抗體組分別于CX3CL1和CCL21蛋白表達(dá)量最大的當(dāng)天10:00于大鼠前扣帶

6、回皮層給予CX3CL1中和抗體和CCL21中和抗體。三組給藥組分別在給藥后6h進(jìn)行行為學(xué)測試，并于行為學(xué)測試完畢后處死大鼠，取前扣帶回皮層組織，Western Blot分別檢測其中CD11b，CX3 CL1，CCL21的蛋白的表達(dá)水平。
　　結(jié)果:各組術(shù)前行為學(xué)測試無明顯統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05);假手術(shù)組，疼痛組術(shù)后兩組相同時間行為學(xué)測試發(fā)現(xiàn)疼痛組大鼠左側(cè)V2區(qū)痛閾明顯下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);三組給藥組給藥后行為