CX3CR1對神經(jīng)病理性疼痛大鼠脊髓小膠質細胞ERK5信號通路的調節(jié)作用.pdf

1、目的:
　　 探討CX3CR1對脊髓小膠質細胞ERK5信號通路的調節(jié)作用，以及CX3CR1/ERK5信號通路在神經(jīng)病理性疼痛發(fā)生與維持過程中的作用。
　　 方法:
　　 通過結扎L5脊神經(jīng)，建立脊神經(jīng)結扎(SNL)疼痛模型。應用免疫組化方法檢測大鼠脊髓ERK5的活化形式——p-ERK5表達的改變，應用免疫熒光雙標確定p-ERK5表達的細胞類型。進一步結合反義寡核苷酸技術，應用von Frey纖維絲和熱輻射痛敏檢測

2、儀，檢測鞘內注射ERK5反義寡核苷酸抑制脊髓ERK5表達對SNL大鼠機械縮足反射閾值(paw withdrawal thresholds，PWT)和熱縮足反射潛伏期(Paw withdrawal latency，PWL)，以確定ERK5在神經(jīng)病理性疼痛中的作用。SNL大鼠鞘內注射CX3CR1中和抗體，觀察阻斷該受體對ERK5活化的影響;鞘內注射CX3CR1的配體CX3CL1，觀察CX3CL1能否激活脊髓小膠質細胞和ERK5，以及抑制ER

3、K5表達能否逆轉CX3CL1的作用，以判定神經(jīng)病理性疼痛條件下CX3CR1對ERK5的調節(jié)作用。
　　 結果:
　　 與假手術組相比，SNL大鼠術后脊髓p-ERK5免疫反應陽性細胞表達增加(P＜0.05)，熒光雙標實驗發(fā)現(xiàn)p-ERK5主要與小膠質細胞標記物Iba1共表達，表明外周神經(jīng)損傷主要激活脊髓小膠質細胞ERK5。鞘內注射ERK5反義寡核苷酸在有效抑制脊髓ERK5表達的同時，緩解了SNL所致的熱與機械痛敏以及脊髓轉錄

4、因子NF-κB的活化（P＜0.05）。與對照組相比，阻斷CX3CR1減少了SNL大鼠脊髓ERK5的活化。鞘內注射CX3CL1后，大鼠脊髓小膠質細胞活化明顯增加，PWT與PWL亦明顯降低（P＜0.05），抑制脊髓ERK5的表達有效地逆轉CX3CL1的上述效應。
　　 結論:
　　 (1)在神經(jīng)病理性疼痛條件下，CX3CL1/CX3CR1通過激活脊髓小膠質細胞ERK5，調節(jié)脊髓小膠質細胞的活化;(2)CX3CR1/ERK5信