諾如病毒sydney株p顆粒與hbga受體的結(jié)合特性及gⅱ.4型廣譜單克隆抗體的制備

1、南方醫(yī)科大學2 0 1 3 級碩士學位論文諾如病毒S y d n e y 株P(guān) 顆粒與H B G A 受體的結(jié)合特性及G I I ．4 型廣譜單克隆抗體的制備C h a r a c t e r i z a t i o no f N o r o v i r u s S y d n e ys t r a i nP p a r t i c l eb i n d t oH B G A r e c e p t o ra n d p r e p a

2、 r a t i o no f G I I ．4b r o a d —s p e c t r u mm o n o c l o n a l a n t i b o d i e s課題來源：國家自然科學基金( N o ．8 1 4 7 3 4 0 2 ) ；廣東省自然科學基金( N o ．2 0 1 4 A 0 3 0 3 1 3 3 3 2 ) ：廣州市科技計劃項目( N o ．2 0 1 5 0 8 0 2 0 0 1 8 )學位申請

3、人導師姓名專業(yè)名稱培養(yǎng)類型培養(yǎng)層次所在學院答辯委員席答辯委成員張婷胡貴方戴迎春流行病與衛(wèi)生統(tǒng)計學學術(shù)型碩士研究生公共衛(wèi)生學院陸家海盧次勇楊智聰柯昌文蘇建新教授教授主任醫(yī)師主任醫(yī)師副研究員2 0 1 6 年0 5 月 2 0 日 廣州1摘要一起。P 區(qū)域又分為P l 亞區(qū)和P 2 亞區(qū)，P 2 亞區(qū)為氨基酸高變區(qū)，根據(jù)基因突變和x 射線晶體結(jié)構(gòu)分析，P 2 亞區(qū)被認為是人類組織血型抗原( H u m a nh i s t o ·

4、b l o o d g r o u pa n t i g e n ，H B G A ) 的受體結(jié)合區(qū)域。由于N o V 既不能在細胞中培養(yǎng)，又沒有合適的小動物模型，所以有關(guān)病原體感染和進化機制的研究受到限制，阻礙廠預防控制感染和疾病治療的進展。隨著基因工程技術(shù)的發(fā)展，為深入探究N o V 的致病機制提供了契機。目前N o V 的V P l 己通過重組的桿狀病毒在昆蟲細胞中得到表達，并于體外自行組裝成不含R N A 的病毒樣顆粒( v i

5、 r u s ·l i k e p a r t i c l e ，V L P ) ，由于V L P 在結(jié)構(gòu)和抗原性方面與天然N o V 相似，具有免疫原性和受體結(jié)合特性，所以可將其作為研究N o V 的替代品。近年來研究者利用大腸桿菌表達系統(tǒng)在體外表達N o VP 區(qū)域形成P 顆粒( PP a r t i c l e ) ，其免疫原性、H B G A 受體的結(jié)合能力及親和力與V L P 相似，因其具備表達周期短，穩(wěn)定性高、操作

6、簡單等特點，是研究N o V 的替代工具，利用P 顆粒可以探究N o V 與H B G A 受體的結(jié)合模式，明確高危易感人群，為研制高效疫苗提供物質(zhì)基礎。N o V 具有基因多樣性，根據(jù)V P l 區(qū)核苷酸序列分析，分為6 個基因組( G e n o t y p e g r o u p ，G ) ，即G I 、G 1 1 、G I I I 、G I V 、G V 、G V I ，主要感染人類的基因組為GI 、G I I ，分別進一步分為

7、9 個和2 2 個基因型。其中G I I ．4 N o V為優(yōu)勢株，引起絕大多數(shù)N o V 胃腸炎暴發(fā)流行。G I I ．4N o V 易變異，每2 ~ 4 年便會出現(xiàn)新的變異株。近期新現(xiàn)的變異株G I I ．4S y d n e y 株于2 0 1 2 年澳大利亞檢出，替代G Ⅱ．4 N e w O r l e a n s 株成為全球流行的優(yōu)勢株，并迅速席卷全球，在美國、英國、荷蘭、日本、澳大利亞、法國及新西蘭等國家引起不同程度的急性