蛛網(wǎng)膜下腔注射pcdna3.1hppe對大鼠神經(jīng)痛的鎮(zhèn)痛作用研究

1、鄭州大學(xué)碩士學(xué)位論文蛛網(wǎng)膜下腔注射pcDNA3.1（+）-hPPE對大鼠神經(jīng)痛的鎮(zhèn)痛作用研究姓名：徐玉英申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：人體解剖與組織胚胎學(xué)指導(dǎo)教師：臧衛(wèi)東;張宏偉20070526鄭州人學(xué)醫(yī)學(xué)院2 0 0 7 年壩f ‘學(xué)位論文 蛛州膜下腔汁射p c D N A 3 ．I ( + 卜h P P E 對神鮐痛人鼠的鎮(zhèn)痛作用研究1 、2 、3 、4 、5 、6 、7 周組各6 只) ?？瞻讓φ战M6 只( 不做任何處理) 。實(shí)驗(yàn)組鞘內(nèi)

2、注射3 0 p _ g ／1 0 0 p 1 重組質(zhì)粒p c D N A 3 ．1 ( + ) - E G F Pl O O p l 。2 ．建立神經(jīng)病理性疼痛模型，即坐骨神經(jīng)慢性壓迫( C C I ) 模型。雄性S D 大鼠2 0只被隨機(jī)分成2 組：C C I 模型組( 6 ／0 絲線結(jié)扎右側(cè)坐骨神經(jīng)) 和C C I 模型假手術(shù)組( 僅暴露出右側(cè)坐骨神經(jīng)，不做結(jié)扎) 。C C I 術(shù)自口連續(xù)測量3 天雙側(cè)后爪熱刺激縮足反射潛伏期( P

3、 a w w i t h d r a w a l t h e r m a ll a t e n c y , P W T L ) ，術(shù)后第5 天開始測量，隔R 1 次，連續(xù)測量6 周。3 ．觀察重組質(zhì)粒p c D N A 3 ，l ( + ) ．h P P E 的鎮(zhèn)痛效應(yīng)。2 0 只C C I 模型鼠被隨機(jī)分成2 組：實(shí)驗(yàn)組( C C I 模型鼠蛛網(wǎng)膜下腔移入3 0 p , g ／1 0 0 p l 重組質(zhì)粒p c D N A 3 ．1

4、( + ) - h P P E1 0 0 p 1 ) 和空質(zhì)粒組( C C I 模型鼠蛛網(wǎng)膜下腔移／x ．3 0 p g ／1 0 0 p ．I 空質(zhì)粒p c D N A 3 ．1 ( + )1 0 0 p 1 ) ；鞘內(nèi)注射后第2 到第1 8 天，檢測雙側(cè)后爪對熱刺激縮足反射潛伏期，第8天進(jìn)行腹腔注射納洛酮( O ．0 8 m g ／k g ) 實(shí)驗(yàn)，用藥前測量一次，用藥后l O 分鐘開始測量，觀察用藥后l d , 時(shí)內(nèi)動(dòng)物雙后肢熱痛

5、閾變化情況。第1 8 天進(jìn)行腦脊液灌流檢測腦脊液中亮氨酸腦啡肽的含量和采用免疫組化技術(shù)測定兩組大鼠脊髓背角N - 甲基一D 一天冬氨酸受體( N —m e t h y l —D —a s p a r t a t er e c e p t o r , N M D A R ) 亞單位N R 2 B表達(dá)的變化。結(jié)果1 ．蛛網(wǎng)膜下腔注射重組質(zhì)粒p c D N A 3 ．1 ( + ) ．E G F P 在大鼠體內(nèi)轉(zhuǎn)染后的時(shí)空效應(yīng)。實(shí)驗(yàn)組：鞘內(nèi)注

6、射重組質(zhì)粒p c D N A 3 ．1 ( + ) ．E G F P2 4 d ' 時(shí)后在大鼠腦脊膜及脊神經(jīng)的外膜上發(fā)現(xiàn)綠色熒光，在大鼠的心、肝、脾、肺、腎及股四頭肌上沒見到p c D N A 3 ．1 ( + ) ．E G F P 的表達(dá)。對照組：與實(shí)驗(yàn)組比較，沒發(fā)現(xiàn)綠色熒光。重組質(zhì)粒p c D N A 3 ．1 ( + ) ．E G F P 在實(shí)驗(yàn)組大鼠的表達(dá)，7 到1 4 天達(dá)到高峰，4 周后明顯下降，第7 周消失。并且未