大蒜總皂苷提取和含量測(cè)定方法的研究

1、比色法測(cè)定大蒜總皂苷含量比色法測(cè)定大蒜總皂苷含量羅紅12劉福玉2李慧2高鈺琪2（第三軍醫(yī)大學(xué)高原醫(yī)學(xué)系：1高原軍隊(duì)衛(wèi)生學(xué)教研室，2病理生理學(xué)教研室，高原醫(yī)學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，全軍高原生理與高原病研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，重慶，400038）摘要：目的要：目的建立一種大蒜總皂苷含量的測(cè)定方法。方法方法以薯蕷皂苷元為對(duì)照品，香草醛冰醋酸高氯酸比色法測(cè)定大蒜總皂苷含量。結(jié)果結(jié)果對(duì)照品在1.67～13.34gml范圍內(nèi)與吸光度呈良好線性關(guān)系回歸方程為:A

2、=0.014C0.012，(R=0.999)，平均回收率97.8%RSD=1.98%。方法學(xué)考察各項(xiàng)指標(biāo)均符合要求。結(jié)論結(jié)論總皂苷測(cè)定方法簡(jiǎn)單，準(zhǔn)確性、穩(wěn)定性和重復(fù)性良好，可作為大蒜總皂苷質(zhì)量控制手段。關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞:大蒜總皂苷；薯蕷皂苷元；比色法分類號(hào)：分類號(hào)：文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：ADeterminationoftotalsaponinsinGarlicbyColimetryLuohong12Liufuyu2Lihui2Gaoyuq

3、i2（1.DepartmentofHighAltitudeMilitaryHygiene，2.DepartmentofPathophysiologyHighAltitudePhysiologyKeyLabatyOfHighAltitudeMedicineMinistryOfEducationThekeylabatyofHighAltitudePhysiologyHighAltitudediseasePLACollegeofHighAlt

4、itudeMedicineThirdMilitaryMedicalUniversity，Chongqing400038China）AbstractObjectiveTodevelopamethodfcontentdeterminationoftotalsaponinsingarlic.MethodsDiosgeninwasusedasareferencesubstancevanillinperchlicacidwasappliedtod

5、eterminethecontentofsaponinsat532nm.ResultsThecalibrationcurveofdiosgeninshowedgoodlinearityintherangeof1.67～13.34gmltheregressionequationwasA=0.014C0.012，R=0.999theaveragerecoveryofcontrolcompoundis97.8%RSD=1.98%.Allthe

6、indexesofthemethodologicalinvestigationmettherequirements.ConclusionThedeterminationmethodissimplerapidsensitiveaccuratewhichcanbeusedfevaluatingtheextractionqualityoftotalsaponins.keywds：garlictotalsaponins；diosgeninCol

7、imetry大蒜在全世界普遍種植，是藥食同源植物，在人們?nèi)粘Ｉ攀持芯哂兄匾匚?。大量?shí)驗(yàn)證明，它不但有抗菌、消炎、殺蟲(chóng)等作用，也有降血脂、降血壓、抗風(fēng)濕、抗腫瘤、調(diào)節(jié)機(jī)體免疫力和抗氧化等多種重要生理功效[14]。大蒜成分復(fù)雜，主要有含硫有機(jī)化合物、糖類、氨基酸類、脂類、維生素、微量元素和皂苷類等多種成分。目前認(rèn)為其活性成分主要是含硫有機(jī)化合物和皂苷類。大蒜中已發(fā)現(xiàn)多種皂苷，主要是呋甾皂苷和螺甾皂苷。大蒜皂苷具有降膽固醇、抗真菌、保護(hù)心血

8、管系統(tǒng)等生物活性作用[58]。然而，關(guān)于大蒜皂苷含量測(cè)定的研究很少，大蒜總皂苷含量分析方法亦未見(jiàn)文獻(xiàn)報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)以薯蕷皂苷元為對(duì)照532nm測(cè)定吸光度。以薯蕷皂苷元對(duì)照品的濃度為橫坐標(biāo)吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。1.2.5穩(wěn)定性試驗(yàn)精密吸取供試樣品和薯蕷皂苷元溶液各50μL，每隔10分鐘測(cè)定其吸光度。1.2.6精密度試驗(yàn)精密吸取薯蕷皂苷元對(duì)照品溶液(1mgml)50μL共7份，分別測(cè)定其吸光度。1.2.7重復(fù)性試驗(yàn)精密吸取供試樣品液5

9、0μL，按“1.2.3”項(xiàng)下方法顯色，測(cè)定吸光度，共測(cè)定同一批次樣品6份，供試品溶液制備按“1.2.1”項(xiàng)下方法。1.2.8回收率實(shí)驗(yàn)精密吸取供試品液，精密加入一定量對(duì)照品溶液，按照樣品含量測(cè)定方法進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算加樣回收率。1.2.9樣品測(cè)定精密稱取各批號(hào)供試品適量，制備供試品溶液，依上述方法顯色，測(cè)定其吸光度，并按標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算總皂苷含量。2結(jié)果結(jié)果2.1大蒜總皂苷含量測(cè)定方法的建立2.1.1檢識(shí)試驗(yàn)表明，樣品具有發(fā)泡性、硫酸反應(yīng)和S

10、alkowski反應(yīng)均為陽(yáng)性，說(shuō)明樣品中含有皂苷類物質(zhì)。2.1.2測(cè)定波長(zhǎng)的選擇對(duì)照品和供試品溶液顯色后均在532nm附近有最大吸收波長(zhǎng)故選擇532nm為測(cè)定波長(zhǎng)。2.1.3線性關(guān)系考察薯蕷皂苷元對(duì)照品濃度在1.67～13.34gml范圍內(nèi)與吸光度呈良好線性關(guān)系回歸方程為:A=0.014C0.012，R=0.999。2.1.4穩(wěn)定性試驗(yàn)：0.5h內(nèi)薯蕷皂苷元測(cè)定值RSD=1.17％（n=4），大蒜總皂苷提取物測(cè)定值RSD=1.26％（n

11、=4）。說(shuō)明供試樣品液和對(duì)照品在0.5小時(shí)內(nèi)測(cè)定基本穩(wěn)定。2.1.5精密度試驗(yàn)：RSD=0.85%(n=7)2.1.6重復(fù)性試驗(yàn)RSD=1.17%（n=6）。2.1.7回收率實(shí)驗(yàn)平均回收率為97.8%，RSD=1.98%。見(jiàn)表2。2.1.8樣品測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表3。表2加樣回收實(shí)驗(yàn)結(jié)果加樣回收實(shí)驗(yàn)結(jié)果樣品樣品總皂苷含量(mg)加入對(duì)照品(mg)測(cè)得量(mg)回收率(%)平均回收率(%)RSD(%)10.020080.014290.033919