人參次苷G中總皂苷的測定及人參皂苷C-K的藥代動力學(xué)研究.pdf

1、第一章：人參皂苷的藥用歷史悠久，本章從人參皂苷的分類，活性，代謝，分析方法幾個方面簡述了人參皂苷的研究進(jìn)展。 第二章：通過索氏提取法去除注射用人參次苷G中可與香草醛試劑顯色的干擾物質(zhì)—聚氧乙烯蓖麻油，使用比色法測定人參次苷G中的總皂苷含量。選用三氯甲烷為洗脫劑，于索氏提取器中回餾3小時，可完全除去聚氧乙烯蓖麻油，以人參皂苷20(S)-Rg3為對照品，使用新鮮配制的5％香草醛冰醋酸—高氯酸溶液顯色，紫外可見分光光度計測定制劑中人參

2、總皂苷的含量。測定的線性范圍為49.2～369μg，r=0.9999；平均回收率為99.9％，RSD為0.9％(n=6)。該法結(jié)果準(zhǔn)確，重現(xiàn)性好，靈敏度高，可用于注射用人參次苷G中人參總皂苷的含量測定。 第三章：人參皂苷C-K為人參皂苷類中的稀有皂苷，屬于人參二醇組皂苷，藥理實驗證明其具有抗癌活性。本章簡述了人參皂苷C-K的發(fā)現(xiàn)過程，制劑的開發(fā)以及藥理活性方面的研究進(jìn)展。 第四章：臨床前藥代動力學(xué)研究是新藥評價的重要組成

3、部分，由于血藥濃度往往很低，要求分析測試方法具有高的靈敏度和好的專屬性。 LC/MS/MS方法是90年代發(fā)展起來的一種新的分析方法，本章簡述了臨床前藥代動力學(xué)研究的基本要求以及使用LC/MS法進(jìn)行藥代動力學(xué)研究的特點。 第五章：人參皂苷C-K在大鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)研究 分析方法的建立：本章建立了使用液相色譜—串聯(lián)質(zhì)譜(LC/MS/MS)測定大鼠血漿中人參皂苷C-K濃度的分析方法，并應(yīng)用此方法對注射用人參皂苷C-K

4、靜脈乳劑在大鼠體內(nèi)的臨床前藥代動力學(xué)進(jìn)行研究。 以甘草次酸為內(nèi)標(biāo)，采用正己烷-二氯甲烷-異丙醇為提取溶劑，大鼠血漿樣品液—液萃取后，經(jīng)CenturySILBDSC18柱(5μm粒徑，50×2.1mmI.D.)分離，以甲醇/乙腈(3：2；V/V)—乙酸銨(10mmol·L-1)(87：13)為流動相，流速為0.25ml/min，柱溫為40℃；串聯(lián)質(zhì)譜法檢測，用于定量分析的母離子和子離子分別為；m/z621.4-161.1(人參皂苷

5、C-K)和m/z469.5-423.5(內(nèi)標(biāo)甘草次酸)。人參皂苷C-K在50μL鼠血中的線性范圍為4.00～4.00×103ng·mL-1，定量下限為4.00ng·mL-1，每個樣品測試時間為5min。日內(nèi)、日間精密度(RSD)小于8％，準(zhǔn)確度(RE)在±10％范圍內(nèi)。該法具有快速、靈敏度高、專屬性強(qiáng)的特點，符合臨床前藥代動力學(xué)研究的基本要求。 大鼠體內(nèi)的藥物動力學(xué)試驗研究：本試驗采用高效液相色譜-質(zhì)譜法對大鼠靜脈注射C-K靜脈

6、乳劑后的藥物動力學(xué)性質(zhì)進(jìn)行了研究。在大鼠體內(nèi)三個劑量(1.5，3.0，6.0mg/kg)呈線性藥代動力學(xué)，在此3個劑量下，對不同性別大鼠的t1/2，CL，AUC0-t進(jìn)行了F檢驗，均無顯著性差異(P＞0.05)。在此3個劑量給藥后，大鼠體內(nèi)AUC0-t，Cmax與3個給藥劑量之間線性相關(guān)。 第六章：人參皂苷C-K在犬體內(nèi)的藥代動力學(xué)研究 分析方法的建立：分析方法基本同大鼠體內(nèi)的方法學(xué)研究，差別在于血漿使用量不同。人參皂苷

7、C-K在100μL犬血中的線性范圍為2.00～2.00×103ng·mL-1，定量下限為2.00ng·mL-1，每個樣品測試時間為5min。日內(nèi)、日間精密度(RSD)小于6％，準(zhǔn)確度(RE)在±10％范圍內(nèi)。 犬體內(nèi)的藥物動力學(xué)試驗研究：使用DAS軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。在犬體內(nèi)三個劑量(0.6，1.2，2.4mg/kg)均為線性藥代動力學(xué)，在此3個劑量下，對不同性別大鼠的t1/2，CL，AUC0-t進(jìn)行了F檢驗，均無顯著性差異(P