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文檔簡介
1、細胞名稱細胞名稱293293和293T293T種屬人組織來源293細胞是轉(zhuǎn)染腺病毒E1A基因的人腎上皮細胞系,293T細胞由293細胞派生,同時表達SV40大T抗原,含有SV40復制起始點與啟動子區(qū)的質(zhì)??梢詮椭啤S肅a3(PO4)2轉(zhuǎn)染效率可高達50%。蛋白表達水平高,轉(zhuǎn)染后23天用堿性磷酸酶分析可較容易地檢測到表達的蛋白。瞬時轉(zhuǎn)染293T細胞是過表達蛋白并獲得細胞內(nèi)及細胞外(分泌的或膜)蛋白的便捷方式。形態(tài)特點上皮細胞致瘤性產(chǎn)物或抗
2、原大T抗原染色體核型亞三倍體人細胞系。染色體眾數(shù)為64,30%的細胞有64條染色體。4.2%的細胞染色體數(shù)目更多。多數(shù)細胞der(1)t(115)(q42q13)der(19)t(319)(q12q13)der(12)t(812)(q22p13)還有四條標記染色體,有的細胞另有5條標記染色體。der(1)與M8(Xq)常常成對出現(xiàn)。N17與N22各有四條。值得注意的是多數(shù)細胞有三條X染色體,兩條Xq,一條Xp。生長特性粘附文獻評價293
3、細胞系是原代人胚腎細胞轉(zhuǎn)染5型腺病毒(Ad5)DNA的永生化細胞。[RF32725]表達轉(zhuǎn)染的腺病毒5的基因。[RF32725]早期報道認為此細胞含有Ad5基因組左端和右端[RF32764],現(xiàn)已清楚僅含有左端序列。[RF50113]此細胞系人腺病毒滴度高。室溫不貼壁,37℃幾日后重新貼壁。表達由整合素beta1亞基與?;Y(jié)合素受體alphav亞基組成的玻基結(jié)合素細胞表面受體.[RF33793]TheAd5wasclonedsequen
4、ceditwasdeterminedthatacolinearseqmentfromnts1to4344isintegratedintochromosome19(19q13.2).傳代293:棄培養(yǎng)基,含0.25%胰酶0.03%EDTA消化液洗滌,棄去,加12ml消化液室溫或37℃消化。加入新鮮培養(yǎng)基,吸出,分到新培養(yǎng)皿中。一傳二至一傳四。293T:生長快,通常倍增時間不到一天。每3~4天1:10至1:20稀釋,5%CO2條件下培養(yǎng)。細
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