適應無血清培養(yǎng)的HEK293細胞系的培育與初步應用.pdf

1、動物細胞體外培養(yǎng)技術自上世紀60年代出現(xiàn)以來，始終以較快的速度發(fā)展。至今為止，血清仍然是一種被廣泛使用的添加成分，但血清作為一種動物來源的培養(yǎng)物，常會引發(fā)一些爭議性問題。新一代的無血清培養(yǎng)基的出現(xiàn)解決了這些問題，其成分明確、性質穩(wěn)定、批次間差異小，為實驗結果的準確性、可重復性提供了重要依據。
　　本研究采用培養(yǎng)液漸進替換的方法獲，采用不同比例的適應液配比，逐梯度馴化人胚胎腎細胞（HEK293），得了一株適應無血清培養(yǎng)的HEK293

2、細胞亞群（293SF）。馴化過程中，作者對培養(yǎng)條件進行優(yōu)化，使293SF細胞系具有貼壁生長、懸浮生長雙重特性。經檢測293SF細胞形態(tài)規(guī)則；蛋白表達能力未發(fā)生明顯變化；隨著傳代，細胞具有較高的穩(wěn)定性。此外，293SF細胞支持復制缺陷型重組腺病毒的包裝和復制，支持重組腺病毒介導的蛋白表達，并且以上性質隨細胞的傳代得到穩(wěn)定保留。貼壁狀態(tài)下生產腺病毒，細胞病變時間由110 h縮短到97 h，同時產率平均提高了43.3％，可降低腺病毒疫苗的生產