藥劑雜環(huán)類藥物分析sysh

1、本章簡(jiǎn)介,,雜環(huán)化合物： 碳環(huán)中夾雜有非碳原子的環(huán)狀有機(jī)化合物，其中非碳原子稱為雜原子，一般為O、S、N等。在化學(xué)合成藥中，已成為現(xiàn)代藥物中應(yīng)用最多、最廣的一大類。,第一節(jié) 吡啶類藥物分析,主要內(nèi)容,1.  結(jié)構(gòu)：本類藥物均有吡啶環(huán),吡啶,異煙肼,尼可剎米,一、基本結(jié)構(gòu),典型藥物的結(jié)構(gòu),,,,,,,,典型藥物的特性,二.主要化學(xué)性質(zhì)：,（1）吡啶環(huán),① 弱堿性:可與金屬離子發(fā)生沉淀反應(yīng)；非

2、水滴定；,②開環(huán)反應(yīng)，降解產(chǎn)物與某些試劑縮合呈色,（2）取代基,①異煙肼:酰肼基有強(qiáng)還原性；能與羰基縮合,②尼可剎米:酰胺基堿性下可水解,放出NH(C2H5)2↑,③紫外吸收,③水解反應(yīng),1、縮合反應(yīng)：與芳醛縮合形成腙（制備衍生物測(cè)熔點(diǎn)）,,黃色：λmax=380nm,三、鑒別試驗(yàn)（一）異煙肼的鑒別,如香草醛、水楊醛、二甲氨基苯甲醛,,熔點(diǎn)：228~231℃,Chp2005：取本品約10mg，置試管中，加水2ml 溶解后，加氨制硝酸銀

3、試液1ml ，即發(fā)生氣泡與黑色渾濁，并在試管壁上生成銀鏡。,2、與氨制硝酸銀反應(yīng),異煙肼與硝酸銀－銀鏡反應(yīng),3、紅外分光光度法,異煙肼的紅外光譜圖,尼可剎米 + 溴化氰,,H2O,戊烯二醛衍生物,,苯胺,黃色,1 戊烯二醛反應(yīng)（köning 反應(yīng)）,（二）、尼可剎米的鑒別,（黃色）,2.酰胺基的分解反應(yīng),與堿共熱,酰胺基,降解產(chǎn)物鑒別,,,紅色石蕊試紙,變藍(lán),尼克剎米的鑒別：取本品2滴，加水1ml，搖勻，加硫酸銅試液2滴與硫氰

4、酸銨試液3滴，即生成草綠色沉淀。,3、沉淀反應(yīng),4、紅外分光光度法,尼可剎米 ChP（2010） 【鑒別】（4）本品的紅外吸收?qǐng)D譜應(yīng)與對(duì)照的圖譜（光譜集 135 圖）一致。,三、雜質(zhì)檢查,異煙肼特殊雜質(zhì)檢查,特殊雜質(zhì)——游離肼 肼是一種誘變劑和致癌物質(zhì) 中國(guó)藥典（2005年版）采用薄層色譜法檢查異煙肼及注射用異煙肼中“游離肼 ”,方法：,供試品溶液：每1ml中含50mg硫酸肼對(duì)照溶液：每1ml中含0.20mg（相當(dāng)

5、于游離肼50μg）吸取供試液10μl 與 對(duì)照溶液 2μl，分別點(diǎn)于同一硅膠薄層板（用羧甲基纖維素鈉溶液制備）以異丙醇-丙酮（3:2）為展開劑，展開后，晾干噴以乙醇制對(duì)二甲氨基苯甲醛試液，15min后檢視,在供試品 主斑點(diǎn) 前方與 硫酸肼斑點(diǎn) 相應(yīng)的位置上不得顯黃色斑點(diǎn) 檢出限量約為0.02％。本法檢出肼的靈敏度為0.1μg,,,,,,,供試品,硫酸肼對(duì)照,尼可剎米——有關(guān)物質(zhì),有關(guān)雜質(zhì)，因其化學(xué)結(jié)構(gòu)不明問(wèn)題：

6、此時(shí)采用何種方法呢？中國(guó)藥典（2005年版）采用薄層色譜法高低濃度對(duì)比法,高低濃度對(duì)比法檢查方法：,供試品溶液：甲醇制每1ml中含40mg的溶液對(duì)照溶液(1)和(2)：精密量取適量供試品溶液，加甲醇分別稀釋成每1ml 中含400μg 和40μg的溶液吸取上述三種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254 薄層板上，以氯仿-丙醇（75:25）為展開劑，展開后，晾干，置紫外光燈(254nm)下檢視。,高低濃度對(duì)比法檢查

7、方法：,置紫外光燈(254nm)下檢視。供試品溶液如顯雜質(zhì)斑點(diǎn)，與對(duì)照溶液(2)的主斑點(diǎn)比較，不得更深；如有1點(diǎn)超過(guò)時(shí)，應(yīng)不深于對(duì)照溶液(1)的主斑點(diǎn)。,,,,,,,,,,,對(duì)照溶液(2) 40μg,對(duì)照溶液(1) 0.4mg,如顯雜質(zhì)斑點(diǎn)，與對(duì)照溶液(2)的主斑點(diǎn)比較，不得更深如有1點(diǎn)超過(guò)時(shí)，應(yīng)不深于對(duì)照溶液(1)的主斑點(diǎn),易氧化物,水分,自學(xué),五、含量測(cè)定,可用于定量的性質(zhì)？異煙肼？還原性、弱堿性尼可剎米？紫外吸收、

8、弱堿性,（一）溴酸鉀法,異煙肼的酰肼基具有還原性溴酸鉀法、剩余碘量法剩余溴量法較為常用,中國(guó)藥典（2005年版）,采用溴酸鉀法測(cè)定異煙肼原料、異煙肼片注射用異煙肼,,原理,取本品約0.2g，精密稱定，置100ml量瓶中，加水使溶解并稀釋至刻度，搖勻； 精密量取25ml，加水50ml、鹽酸20ml與甲基橙指示劑1滴，用溴酸鉀滴定液(0.01667mol/L)緩緩滴定(溫度保持在18～25℃)至粉紅色消失。每1ml的溴酸鉀滴

9、定液(0.01667mol/L) 相當(dāng)于3.429mg的C6H7N3O。,,方法：,注意事項(xiàng)：,①,適量的鹽酸是獲得定量反應(yīng)的基本條件鹽酸用量為20ml時(shí)，加水25ml，指示劑的顏色經(jīng)5分鐘不褪；加水30ml，褪色時(shí)間約為45秒鐘；加水70ml以上時(shí)，在2秒鐘以內(nèi)褪色。測(cè)定中加水75ml，可獲得理想的終點(diǎn)指示。,②,指示劑褪色是不可逆的，滴定過(guò)程中必須充分振搖，以避免因滴定劑局部過(guò)濃而引起指示劑提前褪色。實(shí)驗(yàn)時(shí)，可補(bǔ)加1滴指示

10、劑以驗(yàn)證終點(diǎn)是否真正到達(dá),③,溫度應(yīng)控制在18℃～25℃，緩緩滴定并充分振搖，防止局部濃度過(guò)高終點(diǎn)提前；,（二）非水滴定法,吡啶類藥物多以游離堿狀態(tài)作為藥用如尼可剎米分子結(jié)構(gòu)中氮原子弱堿性可用非水法直接測(cè)定其原料含量,尼克剎米原料的含量測(cè)定,非水堿量法冰醋酸10ml結(jié)晶紫指示液高氯酸滴定液滴定終點(diǎn)：溶液顯藍(lán)綠色,（三）紫外分光光度法,尼可剎米注射液分子結(jié)構(gòu)中含有芳雜環(huán)藥典紫外分光光度法測(cè)定,,用內(nèi)容量移液管精密量取

11、本品2ml，置200ml量瓶中，用0.5％硫酸溶液分次洗滌移液管內(nèi)壁，洗液并入量瓶中，加0.5％硫酸溶液稀釋至刻度，搖勻；精密量取適量，加0.5％硫酸溶液定量稀釋成每1ml 中約含尼可剎米20μg的溶液，照分光光度法，在263nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，按C10H14N2O的吸收系數(shù)為292計(jì)算，即得。,請(qǐng)歸納上述藥物的含量測(cè)定方法異煙肼：采用溴酸鉀法測(cè)定異煙肼原料、異煙肼片、注射用異煙肼尼可剎米原料—非水法、注射液—紫外分光

12、光度法,第二節(jié) 吩噻嗪類藥物分析,一、結(jié)構(gòu)分析,,共同點(diǎn)：（1）硫氮雜蒽母核；（2）含兩個(gè)雜原子多環(huán)共軛體系，有UV吸收；（3）S被氧化生成砜或亞砜；（4）與金屬離子絡(luò)合，生成有色物，可比色測(cè)定,不同點(diǎn)：R，R’取代基不同,主要的化學(xué)性質(zhì),（一）還原性：易氧化呈色 硫氮雜蒽母核中的二價(jià)硫易氧化，不同的氧化劑如硫酸、硝酸、三氯化鐵試液及過(guò)氧化氫等，母核易被氧化成亞砜、砜等不同的產(chǎn)物，隨取代基的不同，呈現(xiàn)不同的顏色，可用

13、于鑒別。,（二）堿性,R取代基上N原子具有堿性可用于含量測(cè)定,（三）金屬離子絡(luò)合呈色,未氧化的硫可與金屬鈀離子形成配位化合物，而氧化產(chǎn)物亞砜、砜則不能，可用于鑒別和含有測(cè)定，具有專屬性。,硫氮雜蒽母核為共軛三環(huán)的π系統(tǒng)，紫外區(qū)三個(gè)吸收峰值，約205nm、254nm、300nm，最強(qiáng)多在254nm附近，根據(jù)2位、10位取代基不同，可引起最大吸收峰的位移。 當(dāng)母核的二價(jià)硫被氧化為砜或亞砜，則呈現(xiàn)四個(gè)峰值。,（四）紫外吸收光譜特

14、性,,,200 300,254,205,300～325,紫外吸收光譜受取代基的影響，特別是S被氧化的程度不同，有不同的改變，在紫移的同時(shí)在270附近產(chǎn)生一新的吸收。紫外吸收用于鑒別,270,,,成為四個(gè)峰,（五）紅外吸收光譜特性,由于取代基R和R’的不同，具有不同的紅外光譜，已被藥典用于不同品種的鑒別。,鑒別試驗(yàn),（一）紫外分光光度法,

15、氧化顯色反應(yīng),本類藥物與H2SO4，HNO3，Br2水，H2O2，F(xiàn)eCl3等試劑的顯色反應(yīng)，如：,未被氧化的硫可與金屬鈀形成配合物；氧化產(chǎn)物無(wú)此反應(yīng)?？蛇M(jìn)行含量測(cè)定，有專屬性，可消除氧化產(chǎn)物的干擾。,3 與金屬離子絡(luò)合,分解產(chǎn)物反應(yīng)（氟元素的顯色反應(yīng)）,,（三）氯化物（四）IR,特殊雜質(zhì)檢查,鹽酸異丙嗪中有關(guān)物質(zhì)檢查 主要指合成過(guò)程中副產(chǎn)物（異構(gòu)體）鹽酸硫利達(dá)嗪中有關(guān)物質(zhì)檢查均采用TLC——供試品稀釋液對(duì)照法

16、,例 鹽酸異丙嗪中有關(guān)物質(zhì)檢查,薄層板——硅膠GF254供試液——10mg/mL對(duì)照液——0.15mg/mL（1） 0.05mg/mL（2）點(diǎn)樣——各10?L，紫外254nm檢測(cè)規(guī)定： 雜質(zhì)斑點(diǎn)不得多于3個(gè) 熒光強(qiáng)度不得較對(duì)照液2強(qiáng) 如有一點(diǎn)超過(guò)，不得甚于對(duì)照液1,五 含量測(cè)定,非水溶液滴定法（原料藥）紫外分光光度法（制劑）氧化還原滴定法色譜法,在非水溶劑中

17、進(jìn)行的滴定分析方法稱為非水滴定法。非水溶劑：指的是有機(jī)溶劑與不含水的 有機(jī)溶劑。,非 水 滴 定 法,非水溶液滴定法（堿量法）,當(dāng)HA酸性較強(qiáng)時(shí)，反應(yīng)不能定量完成，必須除去或降低HA的酸性，使反應(yīng)順利地完成。,BH+?A-,+,HClO4,BH+?ClO4,+,HA,,游離堿類鹽,,被置換出的弱酸,因此，要根據(jù)不同情況采用相應(yīng)測(cè)定條件。,,基本原理,一般方法,供試品,+,冰醋酸,1

18、0ml~30ml,,若供試品為氫鹵酸鹽再加5%醋酸汞的冰醋酸液3ml~5ml,,,結(jié)果,,高氯酸滴定液滴定,,以空白試驗(yàn)校正,常用滴定劑： HClO4-冰HAc溶液 終點(diǎn)指示方法：1.指示劑法 結(jié)晶紫-冰HAc溶液 終點(diǎn)顏色-藍(lán)色/藍(lán)綠色/綠色/黃綠色2.電位法,常用溶劑：冰醋酸，醋酐，丙酮，二氧六環(huán)等,注意事項(xiàng)P128,2.紫外分光光度法,直接分光光度法 例鹽酸氯丙嗪片、注射液的含量測(cè)定 片劑λ

19、254nm處測(cè)定，按E值915計(jì)算含量 注射液λ306nm處測(cè)定，按E值115計(jì)算含量,A. 299nm處是它的最大吸收波長(zhǎng) B. 為了排除其氧化產(chǎn)物的干擾 C. 為了排除抗氧劑的干擾 D. 在299nm處，它的吸收系數(shù)最大 E. 在其他波長(zhǎng)處，因其無(wú)明顯吸收,,例10：中國(guó)藥典對(duì)鹽酸異丙嗪注射液的含量測(cè)定，選用299nm波長(zhǎng)處測(cè)定，其原因是,例11：檢查鹽酸氯丙嗪中“有關(guān)物質(zhì)”時(shí)，采用的對(duì)照溶液

20、為A. 雜質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)溶液B. 標(biāo)準(zhǔn)“有關(guān)物質(zhì)”溶液C. 供試品溶液D. 供試液的稀釋溶液E. 對(duì)照溶液,,第二節(jié) 苯并二氮雜卓類藥物,地西泮 (diazepam),,,七元亞胺內(nèi)酰胺環(huán),,奧普唑侖,,奧沙西泮,氯氮卓,,,,,,,,,,,,結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：,含氮雜原子、六元和七元環(huán)雙環(huán)并合而成，其中1,4-苯并二氮雜卓類藥物是目前臨床應(yīng)用最廣泛的抗焦慮、抗驚厥藥。,地西泮（1959年合成）,,,,,代表性的藥物,,二、主要化學(xué)性質(zhì)

21、,（一）弱堿性：二氮雜卓七元環(huán)上的氮原子堿性如何？具有強(qiáng)堿性但與苯基并合后，其堿性降低可采用非水溶液滴定法測(cè)定含量。,（二）水解性：,藥物的環(huán)通常較穩(wěn)定，但的確存在開環(huán)的情況那么如何水解？在強(qiáng)酸性溶液中可水解，形成相應(yīng)的二苯甲酮衍生物水解產(chǎn)物所呈現(xiàn)的某些特性可供鑒別或含量測(cè)定之用,（三）紫外吸收,藥物分子結(jié)構(gòu)中有共軛體系嗎？有在紫外光區(qū)有吸收吸收。依此鑒別或含量測(cè)定,（一）沉淀反應(yīng) 氯氮卓

22、 橙紅色沉淀 阿普唑侖 ＋ KBiI4 鹽酸氟西泮 也生成橙紅色沉淀 氯硝西泮 放置，顏色變深 因此可以相互區(qū)別。,,,,,,三、鑒別試驗(yàn),（二）硫酸－熒光反應(yīng)： 苯并二氮雜卓類藥物溶于硫酸/稀硫酸在紫外光(365nm)下顯不同的顏色。,（三）.水解后呈芳伯胺反應(yīng) 氯氮卓和奧沙西泮的鹽酸溶液(1→2)，緩

23、緩加熱煮沸，放冷，加亞硝酸鈉和堿性β-萘酚試液，生成橙紅色沉淀，后者放置后顏色變暗。,,（四）分解產(chǎn)物的反應(yīng)（氯化物的反應(yīng)）,有機(jī)氯化合物，氧瓶燃燒法破壞，生成HCl，以5%氫氧化鈉溶液吸收，硝酸酸化，顯氯化物反應(yīng)。,（五）紫外特征吸收,（六）IR：地西泮、阿普唑侖和奧沙西泮,四、特殊雜質(zhì)檢查,有關(guān)物質(zhì)和降解產(chǎn)物氯氮卓中雜質(zhì)主要為氨基物與氧化物地西泮中雜質(zhì)主要為合成中間體與分解產(chǎn)物采用TLC法，HPLC法,五 含量測(cè)定,高效

24、液相色譜法,非水溶液滴定法,紫外分光光度法,例12：硫酸-熒光反應(yīng)為地西泮的特征鑒別反應(yīng)之一。地西泮加硫酸溶解后，在紫外光下顯A. 紅色熒光 B. 橙色熒光C. 黃綠色熒光 D. 淡藍(lán)色熒光E. 紫色熒色,,例13：下列藥物中經(jīng)酸水解后呈茚三酮反應(yīng)，溶液顯紫色的是A. 氯氮卓B. 地西泮C. 鹽酸普魯卡因D. 阿司匹林E. 尼可剎米,,例14：下列藥物中經(jīng)酸水解后可用重氮化-偶合反應(yīng)鑒別的是A. 鹽

25、酸氯丙嗪B. 氯氮卓C. 地西泮D. 醋酸氫化可的松E. 維生素C,,第四節(jié) 喹諾酮類藥物的分析,,喹諾酮類藥物是一類化學(xué)合成抗菌藥，由于具有抗菌譜廣、抗菌作用強(qiáng)、使用安全及易于制造等優(yōu)點(diǎn)，發(fā)展迅速。,具有4-吡啶酮-3羧酸的基本結(jié)構(gòu),,,典型藥物的結(jié)構(gòu),,,,,諾氟沙星,氧氟沙星,環(huán)丙沙星,二、性質(zhì),（1）酸堿兩性 本類藥物因含有酸性的羧基和堿性的哌嗪基，呈酸堿兩性易溶于醋酸、鹽酸和氫氧化鈉溶液中。（2）還原性 分子

26、結(jié)構(gòu)中的哌嗪基具有還原性，遇光易氧化，顏色逐漸變深。（3）紫外吸收 分子中具有共軛體系，可產(chǎn)生紫外吸收，用于鑒別和含量測(cè)定。,三．鑒別試驗(yàn),,（1） N1為叔氨基（丙二酸反應(yīng)） （2）F6顯有機(jī)氟化物的性質(zhì)（氟元素反應(yīng)）,,（3） 紫外吸收特征：5?g/mL本品的0.4％NaOH溶液，λmax＝273nm（4）采用紅外光譜、薄層色譜、HPLC鑒別,三、有關(guān)物質(zhì)的檢查,1.來(lái)源：生產(chǎn)過(guò)程中和貯藏過(guò)程中引入的

27、2.方法：諾氟沙星：高效液相色譜法 氧氟沙星：紫外吸光度法,四、含量測(cè)定,（一）非水滴定法： 氧氟沙星原料藥含量測(cè)定 (二) 高效液相色譜法： 諾氟沙星原料藥及其膠囊 環(huán)丙沙星的原料藥及其制劑 氧氟沙星制劑（三）紫外-可見分光光度法： 諾氟沙星軟膏和乳膏,思考題,1異煙肼發(fā)生銀鏡反應(yīng)是因?yàn)槠浞?/p>

28、子結(jié)構(gòu)中具有A 呲啶環(huán)酰 B共軛系統(tǒng) C酰肼基 D酰胺基,2《中國(guó)藥典》鑒別異煙肼的方法是A三氯化鐵反應(yīng) B與硝酸銀試液反應(yīng)C水解反應(yīng) D沉淀反應(yīng)3《中國(guó)藥典 》測(cè)定異煙肼含量采用的方法是A溴酸鉀法 B非水滴定法C紫外分光光度法 D重氮化一偶合反應(yīng),4地西泮溶于濃硫酸后，在紫外燈下，顯示A淡藍(lán)色熒光 B黃色熒光C黃綠色熒光 D亮綠色熒光5雜環(huán)類藥物

29、的制劑含量測(cè)定多采用A比色法 B酸堿滴定法C紫外分光光度法 D非水滴定法6與氫氧化鈉試液共熱，產(chǎn)生二乙胺氣體，使?jié)駶?rùn) 紅色石蕊試紙變藍(lán)的藥物為 A奮乃靜 B地西泮 C尼克剎米 D異煙肼,思考題,7雜環(huán)類藥物的原料藥含量測(cè)定多采用A酸比色法 C堿滴定法B非水滴定法 D紫外分光光度法,思考題,8溴酸鉀法測(cè)定異煙肼含量是因?yàn)槠渚哂蠥氧