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1、網(wǎng)織紅細(xì)胞檢查的臨床意義,,網(wǎng)織紅細(xì)胞介紹,網(wǎng)織紅細(xì)胞(Reticulocyte,Rtc)是紅細(xì)胞的未成熟階段,是反映骨髓紅系造血功能及判斷貧血和相關(guān)疾病療效的重要指標(biāo)。骨髓中紅細(xì)胞系統(tǒng)的增生發(fā)育過程是:多能以干細(xì)胞→單能干細(xì)胞→原始紅細(xì)胞→早幼紅細(xì)胞→中幼紅細(xì)胞→晚幼紅細(xì)胞→網(wǎng)織紅細(xì)胞→成熟紅細(xì)胞。從原始紅細(xì)胞增殖到晚幼紅細(xì)胞階段共分裂3-4次,約需72小時,紅細(xì)胞數(shù)由一個變?yōu)?一16個,細(xì)胞核由大變小而濃縮,胞漿中含血紅蛋白逐漸增
2、多。,,晚幼紅細(xì)胞以后細(xì)胞即不再分裂,發(fā)育過程中核被排出而成為網(wǎng)織紅細(xì)胞。網(wǎng)織紅細(xì)胞含有少量核糖核酸RNA),用煌焦油藍(lán)染色時成網(wǎng)狀故名網(wǎng)織紅細(xì)胞。網(wǎng)織紅細(xì)胞進(jìn)一步成熟,RNA消失而為成熟紅細(xì)胞。從晚幼紅細(xì)胞發(fā)育到成熟紅細(xì)胞約需48小時,成熟紅細(xì)胞的壽命約為120天。在正常情況下骨髓中有核紅細(xì)胞并不釋放至血循環(huán),只有網(wǎng)織紅細(xì)胞和成熟紅細(xì)胞才釋入血中。因此,檢查末梢血中網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù),可以推知骨髓生紅細(xì)胞的情況。,,過去,計數(shù)Retc十分
3、麻煩費時也不易數(shù)準(zhǔn),現(xiàn)在,部分血液分析儀具有自動檢測網(wǎng)織紅細(xì)胞的功能。儀器最大的優(yōu)點之一是隨時可計數(shù)Retc,十分便利,而且計數(shù)的細(xì)胞多,故很準(zhǔn)確。該類儀器對Retc可提供6個參數(shù),包括網(wǎng)織紅細(xì)胞總數(shù)(Retic#)、網(wǎng)織紅細(xì)胞百分比(Retic%)、網(wǎng)織紅細(xì)胞平均體積(MCVr)、單個網(wǎng)織紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度(CHCMr)、網(wǎng)織紅細(xì)胞分布寬度(RDWr)、單個網(wǎng)織紅細(xì)胞血紅蛋白含量(CHr)等,其中意義最大的,除了總數(shù),百分比以外
4、,最重要的網(wǎng)織紅細(xì)胞血紅蛋白含量(CHr)參數(shù)。,,正常人外周血中甚少,如增加,表示紅系統(tǒng)增生(如急性溶血,多數(shù)溶血性貧血和其他增生性貧血),如貧血仍不見增生,可能是重型再障??关氀委熀竺黠@上升,表示治療有效,反之效果欠佳。故網(wǎng)紅的總數(shù)或百分比對貧血的臨床診斷及療效觀察非常有價值。是血液最常做的項目之一。,網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)的方法,目前檢測網(wǎng)織紅的方法有傳統(tǒng)的顯微鏡目測法、網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)儀、流式細(xì)胞儀、多參數(shù)血細(xì)胞分析儀四種方法。
5、⑴傳統(tǒng)的顯微鏡目測法:人工計數(shù)1000~2000個紅細(xì)胞,網(wǎng)織紅細(xì)胞所占百分?jǐn)?shù)。受主觀因素影響較大,結(jié)果與染色部位、染色時間、染料與血液的比例有關(guān),準(zhǔn)確性較差?! 、凭W(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)儀:網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)儀是專門進(jìn)行網(wǎng)織紅細(xì)胞測定的儀器,可自動染色、自動分析、自動打印各階段網(wǎng)織紅細(xì)胞分布圖,結(jié)果準(zhǔn)確,但儀器昂貴且單一難以廣泛應(yīng)用。,,(3)流式細(xì)胞儀:流式細(xì)胞儀將紅細(xì)胞染色后將含有RNA的網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù),但它不能分析其成熟程度。⑷多參
6、數(shù)血細(xì)胞分析儀:為網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)提供了先進(jìn)的測量手段,這類儀器采用熒光染色和激光測量的原理,不但能客觀準(zhǔn)確計數(shù)、測量網(wǎng)織紅細(xì)胞,而且還能根椐其RNA含量,估計網(wǎng)織紅細(xì)胞的成熟程度,其最大的優(yōu)勢是對網(wǎng)織紅細(xì)胞分群,客觀地將網(wǎng)織紅細(xì)胞分成高熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅(HFR:屬早期網(wǎng)織紅),中熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅(MFR:屬中期網(wǎng)織紅),低熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅(LFR:屬晚期網(wǎng)織紅),同時還能提供網(wǎng)織紅細(xì)胞中的血紅蛋白含量(CH-r)等參數(shù),這些指標(biāo)對臨床及科研頗
7、有價值。,網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)校正,網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)一般以占外周血紅細(xì)胞(RBC)百分?jǐn)?shù)表示,因此易受貧血程度的影響。矯正方法有兩種:網(wǎng)織紅細(xì)胞百分?jǐn)?shù)與紅細(xì)胞絕對數(shù)乘積即絕對網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)(正常范圍:24000~84000/立方毫米)。另一消除貧血程度影響的方法是,網(wǎng)織紅細(xì)胞百分?jǐn)?shù)與實際紅細(xì)胞壓積的積再除以正常紅細(xì)胞壓積(45)。值得注意的是,上述矯正方法往往會使網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)低于實際值,因此如果觀察值已較低,則矯正值無意義。矯正僅用于網(wǎng)織紅
8、細(xì)胞百分?jǐn)?shù)增高時。,各型網(wǎng)織紅細(xì)胞(煌焦油藍(lán)活體染色)絲球型(a)、網(wǎng)型(b)、破網(wǎng)型(c)、點粒型(d)網(wǎng)織紅細(xì)胞,,手工計數(shù)和流式細(xì)胞儀計數(shù)區(qū)別,網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)的傳統(tǒng)方法是使用新亞甲基藍(lán)染料,染色涂片后,光鏡下計數(shù)。但此方法費時,且由于只計數(shù)1000個細(xì)胞,因而存在固有的取樣誤差。使用流式細(xì)胞術(shù)方法進(jìn)行網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù),與傳統(tǒng)的新亞甲基藍(lán)方法相比,存在很多優(yōu)勢。使用流式細(xì)胞術(shù),可以檢測上萬個細(xì)胞,具有很好的取樣精確性。由于使用的是
9、細(xì)胞懸液,可以消除涂片時的分布誤差。同時,它還具有省時、操作簡便等優(yōu)點。,網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)參考范圍及影響因素,成人:絕對值(22~84)×10^9/L.百分率:0.005~0.015(儀器法)。兒童:百分率0.03~0.06(儀器法)。熒光染色激光流式細(xì)胞技術(shù):LFR(低熒光強(qiáng)度比率):0.813~0.909(儀器法)。MFR(中熒光強(qiáng)度比率):0.072~0.154(儀器法)。HFR(高熒光強(qiáng)度比率):0.00
10、9~0.043(儀器法)?!居绊懸蛩亍繕?biāo)本應(yīng)嚴(yán)格使用EDTA-K2抗凝靜脈血,不能用肝素或枸櫞酸鹽抗凝;抽血量1ml,抽血后立即輕輕顛倒混勻,注意切勿用力振搖,以免造成標(biāo)本溶血。,鑒別貧血,網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)在診斷正常細(xì)胞貧血,或僅蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白結(jié)果可以的小細(xì)胞時尤為重要;大細(xì)胞貧血伴網(wǎng)織紅細(xì)胞增多,常提示用葉酸或維生素B12治療有效。,貧血的分類和診斷鑒別,貧血最常發(fā)生在血液病。可能是原發(fā)疾病,但更多的是貧血僅為疾病的一個癥狀。因為貧血
11、可由各種原因引起,貧血的分類應(yīng)結(jié)合臨床和實驗室研究資料一步一步進(jìn)行。 根據(jù)病理學(xué)可將貧血分為骨髓中紅細(xì)胞成長下降、紅細(xì)胞破壞過多、或失血。網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)與骨髓中紅細(xì)胞成長活性有關(guān)。,網(wǎng)織紅細(xì)胞降低的原因,網(wǎng)織紅細(xì)胞降低與紅細(xì)胞成長降低和無效紅細(xì)胞成長有關(guān)。網(wǎng)織紅細(xì)胞減少的原因為: 1.骨髓幼紅細(xì)胞和造血細(xì)胞由脂肪細(xì)胞取代。 2.骨髓中正常造血由腫瘤細(xì)胞或成纖維細(xì)胞取代。 3.骨髓內(nèi)幼紅細(xì)胞的無效成長:由
12、于成熟缺陷和幼紅細(xì)胞在骨髓腔內(nèi)死亡所致。 為了明確最后診斷,骨髓檢查對貧血分類十分必要。,網(wǎng)織紅細(xì)胞增加的原因,網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)目的增加與紅細(xì)胞成長活性增加有關(guān)。紅細(xì)胞破壞過多的病人體內(nèi)可見網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)增加,即在溶血性貧血、或脾功能亢進(jìn)病人,貧血病人骨髓增生對治療的反應(yīng)。 1. 造血細(xì)胞減少 再生障礙性貧血 2.幼紅細(xì)胞造血減少 純紅細(xì)胞再生障礙性貧血 3.骨髓被取代 急性白血病 霍
13、奇金病 非霍奇金淋巴瘤 多發(fā)性骨髓瘤 轉(zhuǎn)移性腫瘤 骨髓纖維化,骨髓硬化,,4.幼紅細(xì)胞成熟障 礙和髓內(nèi)死亡 惡性貧血 地中海貧血 骨髓增生異常綜合征 網(wǎng)織紅細(xì)胞增多: 鑒別診斷范圍 1.溶血性貧血 2.脾功能亢進(jìn) 3.貧血再生階段,細(xì)胞抑制藥和射線治療,流式細(xì)胞儀測定網(wǎng)織紅細(xì)胞的敏感性可用于檢測癌癥病人,可得知藥物和放射治療對骨
14、髓的細(xì)胞毒副作用,特別是紅系造血的影響。迄今為止,這些方法還沒有評價紅細(xì)胞成長的合適方法。用順鉑長期治療的卵巢癌病人網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)增加。網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)增加常發(fā)生在血紅蛋白量下降之前。網(wǎng)織紅細(xì)胞自動檢測可作為早期識別病人產(chǎn)生貧血時的一個有用的潛在指標(biāo)。,骨髓移植,在自體和異體骨髓移植中,紅細(xì)胞成長重建是移植過程中的一個重要且獨立的問題。迄今為止,網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)因其人工計數(shù)技術(shù)的不準(zhǔn)確性而受到限制。外周血粒細(xì)胞增加的檢測是移植開始的最早的實
15、用方法。但是,絕對粒細(xì)胞數(shù)可因病人并發(fā)如感染、移植物抗宿主病而受誤導(dǎo)。預(yù)防性血小板輸注掩蓋了移植后早期血小板成長情況的檢測。網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)是用于檢測骨髓中血細(xì)胞恢復(fù)的另一個非獨立參數(shù)。,,通過流式細(xì)胞儀的網(wǎng)織紅細(xì)胞分析,可準(zhǔn)確評價自體和異體骨髓移植后紅細(xì)胞成長的恢復(fù)情況。在骨髓移植第21天,網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)大于15×109/L,表明移植獲得成功。感染和輸血對網(wǎng)織紅細(xì)胞的生長趨勢都沒有明顯的影響。,,在第21天網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)小于15
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