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1、第二章血液一般檢驗(yàn) BLOOD ROUTINE TEST 第一節(jié) 紅細(xì)胞檢查(二),定義: 嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞(basophilicstipplingcell)是不完全成熟的紅細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)殘存的核酸變性、聚集形成顆粒,經(jīng)堿性染料(如美藍(lán))染色后,細(xì)胞內(nèi)可見(jiàn)到深染的顆粒;若以瑞氏染色,則在粉紅色的胞質(zhì)中見(jiàn)到大小,形狀不一紫紅色或藍(lán)黑色顆粒,故名嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞。,嗜堿性點(diǎn)彩紅細(xì)胞計(jì)數(shù),[檢測(cè)原理] 點(diǎn)
2、彩紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(basiphilic stippling count),用堿性美藍(lán)液作血涂片染色,紅細(xì)胞呈淡藍(lán)綠色,顆粒顯深藍(lán)色;用瑞氏染色,顆粒呈藍(lán)黑色。通常在油鏡下計(jì)數(shù)1 000個(gè)紅細(xì)胞中的點(diǎn)彩紅細(xì)胞數(shù),換算成百分率。,[方法學(xué)評(píng)價(jià)] 點(diǎn)彩紅細(xì)胞計(jì)數(shù)操作目前仍用顯微鏡血涂片染色的傳統(tǒng)檢查法。必要時(shí)可擴(kuò)大紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的數(shù)量。例如,先計(jì)數(shù)50個(gè)視野中點(diǎn)彩紅細(xì)胞數(shù),同時(shí)計(jì)數(shù)5個(gè)視野內(nèi)紅細(xì)胞總數(shù),再按下式求出點(diǎn)彩紅細(xì)胞的百分比。
3、 50個(gè)視野中點(diǎn)彩紅細(xì)胞數(shù)點(diǎn)彩紅細(xì)胞%=———————————— 5個(gè)視野內(nèi)紅細(xì)胞總數(shù)×10,[質(zhì)量控制] 計(jì)數(shù)時(shí)必須選擇紅細(xì)胞分布均勻的區(qū)域計(jì)數(shù)。 [參考值] <0.03% [臨床意義] 點(diǎn)彩紅細(xì)胞計(jì)數(shù)增高主要見(jiàn)于:1.中毒患者 如鉛、汞、銀、鉍等金屬中毒及硝
4、 基苯、苯胺等中毒時(shí),點(diǎn)彩紅細(xì)胞顯著增高。 2.各類貧血 如溶血性貧血、巨幼細(xì)胞性貧血、 惡性貧血、惡性腫瘤等,此時(shí)網(wǎng)織紅細(xì)胞增加 常表示造血旺盛。,,網(wǎng)織紅細(xì)胞(reticulocyte,Ret)是晚幼紅細(xì)胞脫核后到完全成熟紅細(xì)胞間的過(guò)渡細(xì)胞,胞質(zhì)中殘存嗜堿性物質(zhì)核糖核酸(RNA),經(jīng)煌焦油藍(lán)等活體染色后,嗜堿性物質(zhì)凝聚成藍(lán)黑色顆粒,連綴成線,線連接成網(wǎng)。屬于尚未完全成熟的紅細(xì)胞(當(dāng)嗜堿性物質(zhì)消耗
5、殆盡后才被視為成熟紅細(xì)胞),一般為8~9.5μm。,七、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù),[檢測(cè)原理] 1.普通光學(xué)顯微鏡法 活體染色(新亞甲藍(lán)或煌焦油藍(lán))的堿性著色基團(tuán) 網(wǎng)織紅細(xì)胞RNA的磷酸基(帶負(fù)電荷) RNA膠體間的負(fù)電荷減少而發(fā)生凝縮, 藍(lán)色的點(diǎn)狀、線狀或網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)
6、, 顯微鏡下計(jì)數(shù)1000個(gè)紅細(xì)胞中所占的網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù),以百分比或分?jǐn)?shù)數(shù)表示。,,,,[檢測(cè)原理] 流式細(xì)胞儀法2.儀器法 網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)儀 血液分析儀法。 熒光染料與網(wǎng)織紅細(xì)胞中RNA結(jié)合, 發(fā)出特定顏色的熒光進(jìn)行RNA定量精確計(jì)數(shù)網(wǎng)織紅細(xì)胞占成熟紅細(xì)
7、胞的百分?jǐn)?shù)(Ret%)。將網(wǎng)織紅細(xì)胞分成高、中、低熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅細(xì)胞 比率(HFR 、MFR、 LFR)并計(jì)算網(wǎng)織紅細(xì)胞其他參數(shù)。,,,血液分析儀法 提供與網(wǎng)織紅細(xì)胞相關(guān)的多個(gè)參數(shù), 網(wǎng)織紅細(xì)胞絕對(duì)值、 網(wǎng)織紅細(xì)胞百分比、 網(wǎng)織紅細(xì)胞平均體積、 網(wǎng)織紅細(xì)胞血紅蛋白分布寬度、 網(wǎng)織紅細(xì)胞血紅蛋白濃度、 網(wǎng)織紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度、
8、 LFR、MFR、HFR、 網(wǎng)織紅細(xì)胞成熟指數(shù)。,,【質(zhì)量保證】 以手工計(jì)數(shù)法為重點(diǎn)。 1.染料選擇,【質(zhì)量保證】 2.正確辨認(rèn)網(wǎng)織紅細(xì)胞 外周血中網(wǎng)織紅細(xì)胞主要為Ⅳ型,凡含有2個(gè)以上網(wǎng)織顆粒的紅細(xì)胞均應(yīng)計(jì)為網(wǎng)織紅細(xì)胞。 3.網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)方法 (1)Miller窺盤: (2)顯微成像系統(tǒng):計(jì)算機(jī)和細(xì)胞形態(tài)分析軟件, ①HFR:粗顆粒堆積成網(wǎng)狀。 ②MFR:粗顆粒在10個(gè)
9、以上,或細(xì)小顆粒超過(guò)15個(gè)。 ③LFR:細(xì)胞內(nèi)含15個(gè)以下細(xì)小顆粒,①網(wǎng)織紅細(xì)胞百分?jǐn)?shù): 成人和兒童:0.005~0.015 新生兒: 0.02~0.06②網(wǎng)織紅細(xì)胞絕對(duì)數(shù): 成人和兒童: (24~84)X109/L,參考值,臨床意義,1.評(píng)價(jià)骨髓增生能力,判斷貧血類型。(1)網(wǎng)織紅細(xì)胞增多:表示骨髓造血功能旺盛, 各種增生性貧血 (2)網(wǎng)織紅細(xì)胞減少:常見(jiàn)于再生障礙性貧血
10、 (3)鑒別貧血:,臨床意義,2.評(píng)價(jià)療效 (1)觀察貧血療效:貧血隨訪缺鐵貧或巨幼貧有效治療后,2~3d后Ret開始上升,7~10d達(dá)到最高峰(約10%),2周后漸降至正常。 (2)骨髓移植后監(jiān)測(cè)骨髓造血恢復(fù):骨髓移植后第21天,如Ret大于15X109/L,常表示無(wú)移植并發(fā)癥;若骨髓開始恢復(fù)造血功能,首先HFR和MFR上升,其次為網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)值上升。,臨床意義,3.放療和化療的監(jiān)測(cè) 指導(dǎo)臨床適時(shí)調(diào)整治療方案,避免
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