王東琦步長腦心通調(diào)脂抗炎癥保護內(nèi)皮功能和抗動脈粥樣硬化的系列研究

1、步長腦心通調(diào)脂-抗炎癥-保護內(nèi)皮功能和抗動脈粥樣硬化的系列研究,西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院王東琦,動脈粥樣硬化的進程,Modified from Pepine, CJ, Am J Card, 1998,急性心肌梗死,缺血性中風(fēng)/短暫性腦缺血,不穩(wěn)定心絞痛,,,,,,泡沫細胞,脂質(zhì)條紋,中間階段損傷,動脈粥樣化,纖維斑塊,復(fù)合病變破裂,,從十幾歲開始,從30歲開始,從40歲開始,,,,,,主要為脂肪積聚,平滑肌細胞和膠原

2、,栓塞 出血,內(nèi)皮功能不全,周圍血管疾病,,,,,心臟猝死,,,,,穩(wěn)定性心絞痛,,無臨床癥狀,極高危,Lipid lowering with statins UpToDate 13.3 Sep 1, 2005,,調(diào)脂粑目標的目的是 AS-CHD-SCD,,動脈粥樣硬化的發(fā)病機制和危害性,,動脈粥樣硬化 脂代謝紊亂學(xué)說 調(diào)脂治療--脂代謝平衡

3、LDL-oxLDL-foam cell,,平滑肌移行,泡末細胞形成,T細胞激活,血小板粘附聚集,白細胞粘附侵入,,動脈粥樣硬化內(nèi)皮功能障礙學(xué)說　　　　　　 1975-1993RossR創(chuàng)立 動物模型-球囊損傷血管內(nèi)皮,,,,,-屏障功能：血管內(nèi)與內(nèi)皮 下組織 之間的屏障作用；-分泌功能：分泌 NO – ET ，促凝－抗凝等；

4、-調(diào)節(jié)功能：調(diào)節(jié)血管的收收縮和舒張，調(diào)節(jié)血壓；,動脈粥樣硬化慢性炎癥學(xué)說 1999 Ross R 創(chuàng)立 動物模型 – 衣原體感染,,Ross R. Atherosclerosis is an inflammatory disease. N Engl J Med. 1999;340:115-126.,慢性炎癥引起內(nèi)皮的損傷,高血壓 糖尿病 高LDL/TG/TC，低HDL 吸煙 肥

5、胖 少動 高齡 高半胱氨酸血癥 高尿酸血癥 促凝與抗凝紊亂 交感副交感紊亂 衣原體感染 各種病毒感染 遺傳因素MEF2A,,,,,,,,,,,,,,,,1、在各種慢性炎癥和危險因素的作用下，氧化修飾的低密度脂蛋白（ox-LDLc）致使內(nèi)皮損傷，內(nèi)皮功能障礙。,2、損傷的內(nèi)皮細胞激活，使單核細胞、血小板在血管內(nèi)膜表面聚集和粘附。,3、炎癥性單核細胞遷移進入內(nèi)皮下。 4、炎癥細胞—單核細胞和巨噬細

6、胞激活，刺激平滑肌細胞、產(chǎn)生基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）。,Dynamic Balance of atherosclerosisEric J.Topol: Textbook ofCardiovascular Medicine 2003; Atherosclerosis P.5-11,,,5、平滑肌細胞遷移進入內(nèi)皮下組織,形成新的粥樣斑塊的纖維帽。斑塊增大．,6、平滑肌細胞遷移進入內(nèi)皮下組織和粥樣斑塊的纖維帽。6

7、-7、內(nèi)皮細胞遷移并且在各種保護因素的作用下形成纖維帽。,8-9、纖維帽在各種促炎癥因素下破裂或損害，表面血小板聚集，形成血栓，導(dǎo)致急生冠脈事件。纖維帽破裂或損傷后，血栓形成，在各種保護因素的作用下，在血栓的表面形成新的纖維帽，使急性冠脈事件，得到新的平衡。,Dynamic Balance of atherosclerosis:Eric J.Topol: Textbook of Cardiovascular Medici

8、ne 2003; Atherosclerosis P.5-11,,,,,步長腦心通,中醫(yī)藥是中華文明的寶庫，應(yīng)當在動脈粥樣硬化的防治中有更大的貢獻。腦心通是中藥復(fù)方制劑，由黃芪、丹參、川芎、地龍、水蛭等十六味藥物制成，具有益氣活血、化瘀通脈的功效?，F(xiàn)代藥理學(xué)證明，該藥的主要成分地龍、水蛭有抗血栓形成的作用。川芎有擴管、抑制炎癥反應(yīng)的作用。丹參有降脂、抗炎等多種作用……步長腦心通可能在多個環(huán)節(jié)、廣泛領(lǐng)域具有抗動脈粥樣硬化

9、的作用。我們借鑒西藥研究的手段和經(jīng)驗研究步長腦心通抗動脈粥樣硬化的作用原理，試圖從西藥的角度論證中醫(yī)藥理論，為新藥研發(fā)開拓新的途徑。,,動脈粥樣硬化是炎性細胞（主要是單核巨噬細胞）吞噬“入侵”動脈壁的“病原性”脂蛋白即oxLDL的慢性炎癥反應(yīng)過程。巨噬細胞表面清道夫受體（SR）尤其是SR-A和CD36 均介導(dǎo)巨噬細胞吞噬oxLDL。其表達量與泡沫細胞的多少及AS的發(fā)展進程有密切關(guān)系。本研究顯示阿托法伐他汀明顯抑制SR-A和CD36

10、的表達，較對照組分別降低了63.3%和70.5%。腦心通則輕度抑制兩者表達，并呈劑量依賴性，1g/L腦心通使CD36及SR-A表達分別降低22.3%和25%，大約是阿托伐他汀的1/3。,Effects of Naoxintong and Atorvastatin on on SR-A expression,▲P＜0.05 vs. control；★P＜0.05 vs. each group of NXT；※P＜0.05 vs. othe

11、r groups of NXT,,在AS慢性炎癥反應(yīng)過程中， IL-6和TNF-α是兩個傳統(tǒng)的細胞炎癥因子，主要由單核巨噬細胞分泌。腦心通抑制IL-6和TNF-α分泌，最大抑制效果分別為1μmol/L阿托法他汀的32%和33.9%。,▲▲P＜0.01vs. control；★★P＜0.01vs .each group of Naoxintong；※※P＜0.01vs. other groups of Naoxintong,Influ

12、ences of Naoxintong and Atorvastatin on cell inflammatory reaction promoted by oxLDL,,VSMC增殖是AS發(fā)生、發(fā)展過程中最重要的環(huán)節(jié)之一。ox-LDL通過誘發(fā)一系列與細胞增殖有關(guān)的反應(yīng)，包括增加原癌基因的表達，刺激白細胞介素-1及血小板源性生長因子的產(chǎn)生等，促進VSMC的增殖。本研究結(jié)果顯示10mg/L的ox-LDL可刺激VS

13、MC增殖，腦心通具有抑制ox-LDL誘導(dǎo)VSMC增殖的作用。,不同藥物對VSMC增殖的影響,）,與ox-LDL組相比*P<0.01，**P<0.05,,血管內(nèi)皮損傷及功能障礙的特征表現(xiàn)為由內(nèi)皮細胞產(chǎn)生的NO水平降低及所介導(dǎo)的內(nèi)皮依賴性血管舒張功能受損，同時伴有ET-1含量的增加。腦心通不但能夠促進正常狀態(tài)下的血管內(nèi)皮細胞NO的表達與釋放，而且能夠促進損傷狀態(tài)下的內(nèi)皮細胞NO表達與釋放，在高劑量組尤為明顯，呈現(xiàn)出劑量依賴性

14、的趨勢和效應(yīng)。說明腦心通能夠促進血管內(nèi)皮細胞的NO的表達釋放而發(fā)揮保護性作用，,腦心通對ox-LDL損傷HUVEC前NO分泌量的影響,,* P＜0.01 vs對照組比較；** P＜0.05 vs對照組比較；a P＜0.01 vs其余腦心通組比較.,腦心通對ox-LDL損傷HUVEC后NO分泌量的影響,,* P＜0.01 vs ox-LDL組比較；** P＜0.05 vs ox-LDL組比較；b P＜0.05 vs其余腦心通組比較,各組動

15、物血脂水平的比較,a 為p＜0.05，b為p＜0.01，與8周時相比較;c為p＜0.05,d為p＜0,01,與高脂組相比較;e為p＜0.05,f為p＜0,01,與辛伐他汀組相比較,,圖C,圖B,圖A,肉眼觀察可見高脂組腹主動脈內(nèi)膜蘇丹Ⅳ染色顯示陽性區(qū)廣泛,有明顯粥樣斑塊形成, 脂質(zhì)斑塊增厚卷曲，彌漫至整個腹主動脈管壁。腦心通治組可見斑塊成顆粒狀，較薄，面積雖多辛伐他汀組，但顯著少于高脂組。,,兔腹主動脈蘇丹Ⅳ染色（1×） A

16、為高脂組，B為腦心通組，C為辛伐他汀組。紅色區(qū)為粥樣脂紋和斑塊。,,,,,圖A,圖B,圖C,40倍,40倍,40倍,可見高脂組粥樣斑塊形成，內(nèi)皮細胞消失，粥樣斑塊明顯增厚，大量無定形壞死物聚集，并可見灶狀泡沫細胞及炎細胞浸潤，病變累及肌壁淺肌層（圖A）。腦心通組斑塊厚度較辛伐他汀組增厚，但明顯較高脂組薄，由少量泡沫細胞聚集，肌層及外膜無明顯異常（圖B）。辛伐他汀組斑塊最少。,,,,,,,,光鏡Masson’s 三色染色（圖-3）可見高

17、脂組膠原細胞分布不均，有部分溶解（圖A），腦心通組膠原細胞分布較為均勻，幾乎沒有溶解(圖B)，辛伐他汀組膠原細胞分布均勻，位于內(nèi)膜表面，沒有溶解（圖C）。,,兔腹主動脈切片Masson’s 三色染色（10×40） A為高脂組，B為腦心通組，C為辛伐他汀組。,,,,透射電鏡高脂組可見有大量的泡沫細胞形成，膠原纖維排列紊亂，有溶解壞死（圖A），腦心通組泡沫細胞較少，膠原纖維排列基本正常（圖B）,辛伐他汀組幾乎沒有泡沫細胞，膠原纖維