抗動脈粥樣硬化藥物及其配方的藥效研究.pdf

1、目的：比較銀杏黃酮、蚯蚓纖溶酶及二者以不同濃度配比形成的配方藥物對動脈粥樣硬化大鼠的治療效果,并對其作用機(jī)制進(jìn)行初步探討。
　　 方法：60只Wistar大鼠隨機(jī)分為空白對照組和動脈粥樣硬化建模組。建模組使用高脂飼料、丙基硫氧嘧啶及維生素D3誘發(fā)動脈粥樣硬化。至60天建模結(jié)束,將建模組34只存活鼠隨機(jī)分為模型組(6只)、銀杏黃酮治療組(7只)、銀杏黃酮+蚯蚓纖溶酶治療組(7只)、高劑量銀杏黃酮+蚯蚓纖溶酶治療組(7只)、蚯蚓纖溶

2、酶治療組(7只)?？瞻捉M進(jìn)食普通飼料,模型組大鼠繼續(xù)進(jìn)食高脂飼料,4個用藥組大鼠繼續(xù)進(jìn)食高脂飼料并每日給予相應(yīng)的藥物灌胃,療程30天。處死大鼠后檢測血脂水平；主動脈壁油紅O染色,計算斑塊面積；主動脈壁石蠟切片HE染色,光鏡觀察。將小鼠巨噬細(xì)胞(J774A.1)分為銀杏黃酮治療組和蚯蚓纖溶酶治療組,分別向兩組加入六種濃度的銀杏黃酮溶液和蚯蚓纖溶酶溶液,分別培養(yǎng)24、48、72小時,檢測溶菌酶活性、基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)活性和細(xì)胞

3、吞噬能力。
　　 結(jié)果：①藥物治療組大鼠血總膽固醇(TC)和低密度脂蛋白(LDL)明顯低于模型組(均P<0.05),在各藥物治療組中,高劑量銀杏黃酮+蚯蚓纖溶酶治療組大鼠血清高密度脂蛋白(HDL)高于其余組(均P<0.05)。②模型組大鼠主動脈全段均可見不同程度的動脈粥樣硬化病變,病變部位動脈內(nèi)膜粗糙,呈細(xì)顆粒狀向管內(nèi)突起,有人鼙的鈣鹽結(jié)晶的沉積,HE染色光鏡檢布發(fā)現(xiàn),管壁內(nèi)有大量膽固醇結(jié)晶和鈣鹽沉積,呈較典型的粥樣斑塊的改變；

4、Masson染色,見動脈局部基質(zhì)沉積明顯。藥物治療組大鼠的病變多出現(xiàn)在主動脈弓血管分支處,且病變面積明顯小于模型組(均P<0.05),其中配方藥物治療組大鼠的病變面積小于單藥治療組(均P<0.05)。③銀杏黃酮溶液培養(yǎng)的巨噬細(xì)胞的溶蔭酶活性、細(xì)胞吞噬能力與藥物濃度、培養(yǎng)時間正相關(guān)(均P<0.05),MMP-9的活性隨藥物濃度升高呈先升高后下降的趨勢。④蚯蚓纖溶酶溶液培養(yǎng)的巨噬細(xì)胞的溶菌酶活性、細(xì)胞吞噬能力與藥物濃度無明顯相關(guān)性(均P>0

5、.05),僅與培養(yǎng)時間正相關(guān)(均P<0.05)；但MMP-9的活性隨藥物濃度升高、培養(yǎng)時間延長呈上升趨勢。
　　 結(jié)論：動物實驗結(jié)果提示,動脈粥樣硬化動物模型建模成功。銀杏黃酮與蚯蚓纖溶酶均能不同程度地減輕大鼠動脈粥樣硬化病變,其中高劑量銀杏黃酮+蚯蚓纖溶酶治療組作用最明顯；體外實驗表明銀杏黃酮能夠使巨噬細(xì)胞分泌溶菌酶增多,吞噬能力增強(qiáng),發(fā)揮其抗炎抗氧化作用:蚯蚓纖溶酶可使巨噬細(xì)胞MMP-9的活性增強(qiáng),從而促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)降解,使