水蛭調(diào)脂及抗動脈粥樣硬化作用機制的研究.pdf

1、目的:觀察水蛭對早期動脈粥樣硬化大鼠脂代謝、氧化應(yīng)激及內(nèi)皮損傷的影響，探討其可能的抗動脈粥樣硬化作用機制。
　　方法:32只健康雄性Spragune-Dawlay(SD)大鼠，隨機分為:正常對照組(N-ctrl)、模型對照組(M-ctrl)、水蛭低劑量組(H-low)、水蛭高劑量組（H-high），每組8只，普通飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后，N-ctrl繼續(xù)普通飼料喂養(yǎng)，其余各組予高脂飲食，于實驗第3天按6×105U·kg-1一次性腹腔注

2、射維生素D3建立早期AS大鼠模型，水蛭干預(yù)組在造模的同時按10 ml/kg給予藥物灌胃，每天1次，N-ctrl和M-ctrl給予等量生理鹽水灌胃，每周記錄體重一次，以調(diào)整給藥量，連續(xù)10周。實驗?zāi)?，處死大鼠，留取肝臟、睪周和腎周脂肪分別稱重，檢測TC、TG、HDL-C、LDL-C和HCY水平，血清CAT活性，血漿FIB水平;檢測肝臟LPL和HL活性;用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法檢測血清ox-LDL和主動脈壁LOX-1的表達;

3、分別做蘇木素-伊紅(HE)和油紅O染色，光鏡下觀察主動脈的病理變化。
　　結(jié)果:
　　1.大鼠體重、內(nèi)臟脂肪質(zhì)量的變化:實驗初，各組大鼠體重?zé)o差異，每周各組大鼠體重均有增加，自實驗第2周起，模型組大鼠體重明顯高于正常對照組(P＜0.05)，水蛭干預(yù)組大鼠較模型組體重有下降趨勢，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義;與正常對照組比較，模型對照組內(nèi)臟脂肪的沉積明顯增加（P＜0.01或P＜0.05）;與模型對照組比較，水蛭干預(yù)組內(nèi)臟脂肪的沉積明顯減

4、少(P＜0.05)。
　　2.血脂水平的變化:高脂飲食10周，與正常對照組比較，模型組TC、TG和LDL-C顯著增高（P＜0.05或P＜0.01），HDL-C顯著降低(P＜0.01);與模型對照組比較，水蛭治療組TC呈降低趨勢，水蛭高劑量組TG和LDL-C明顯降低，HDL-C明顯升高(P＜0.05或P＜0.01)。
　　3.肝臟LPL和HL活性的變化:與正常對照組比較，模型對照組LPL和HL活性顯著降低(P＜0.05或P＜0

5、.01);與模型對照組比較，水蛭高劑量組LPL和HL活性顯著升高(P＜0.05);水蛭高劑量組與水蛭低劑量組比較，LPL活性顯著升高(P＜0.05)，HL活性呈升高趨勢。
　　4.血漿FIB水平的變化:與正常對照組比較，模型對照組大鼠FIB顯著升高(P＜0.05);與模型對照組比較，水蛭高低劑量組FIB顯著降低(P＜0.05);水蛭高低劑量組間比較，F(xiàn)IB水平呈下降趨勢。
　　5.血清HCY水平和CAT活性的變化:與正常對照

6、組比較，模型對照組血清HCY含量明顯升高（P＜0.05）、CAT活性顯著降低(P＜0.01);與模型對照組比較，水蛭高劑量組HCY含量顯著降低(P＜0.01)、CAT活性顯著升高(P＜0.05);水蛭高劑量組HCY含量較水蛭低劑量組明顯降低(P＜0.05)，CAT活性在治療組間無差異。
　　6.血清ox-LDL和動脈壁LOX-1表達量的變化:與正常對照組比較，模型對照組血清ox-LDL顯著升高(P＜0.01)，血管壁LOX-1表達

7、明顯上調(diào)(P＜0.05);與模型對照組比較，水蛭干預(yù)組血清ox-LDL水平和血管壁LOX-1表達顯著下調(diào)(P＜0.05或P＜0.01);水蛭高劑量組與水蛭低劑量組比較，ox-LDL水平明顯下降(P＜0.05)，血管壁LOX-1的表達呈下降趨勢。
　　7.主動脈形態(tài)學(xué)變化:HE染色可見，正常組大鼠主動脈內(nèi)皮完整，內(nèi)膜光滑，各層結(jié)構(gòu)清晰;模型對照組主動脈內(nèi)膜增厚、不光滑，中層平滑肌細(xì)胞排列紊亂，彈力纖維增生;水蛭干預(yù)組可見內(nèi)、中膜增厚

8、不明顯，平滑肌細(xì)胞排列較整齊，彈力纖維輕度增粗。油紅O染色可見:空白對照組大鼠主動脈無脂滴沉積，模型對照組主動脈有一些脂滴沉積，與模型對照組比較，水蛭干預(yù)組主動脈脂滴沉積均顯著減少。
　　結(jié)論:高脂飲食聯(lián)合腹腔注射維生素D3可成功建立與人類早期AS病變特征相似的大鼠早期AS模型，具有造模死亡率低，符合AS早期纖維和平滑肌增生的特點;水蛭可能通過以下機制干預(yù)AS的形成:(1)水蛭可通過控制大鼠體重，減少睪周和腎周脂肪的沉積，降低AS