鏈脲霉素誘導糖尿病大鼠的早期視覺電生理改變

1、<p>　　鏈脲霉素誘導糖尿病大鼠的早期視覺電生理改變</p><p>　　【關(guān)鍵詞】 糖尿病視網(wǎng)膜病 </p><p>　　關(guān)鍵詞: 糖尿病視網(wǎng)膜病;視網(wǎng)膜電描記術(shù);鏈脲霉素;大鼠 </p><p>　　摘 要:目的 觀察糖尿病大鼠病程早期的視網(wǎng)膜電圖變化. 方法 按照國際臨床視覺電生理學會的標準化方案，采用REPIport系統(tǒng)和銀-氯化銀角膜電

2、極以及不銹鋼針狀電極對鏈脲霉素誘導的糖尿病大鼠模型進行2wk的暗適應(yīng)視網(wǎng)膜電圖（scot-ERG）、振蕩電位（OPs）、明適應(yīng)視網(wǎng)膜電圖（phot-ERG）和30Hz閃爍反應(yīng)記錄（30Hz flicker）. 結(jié)果 大鼠scot-ERG的a波和b波和OPs的O2 波的潛伏期，在1wk時［a波（27.2±1.9）ms，b波（72±6）ms，O2 波（38±4）ms］，與未打藥時相比［a波（24.1±

3、;1.2）ms，b波（64.6±2.9）ms，O2 波（34.1±1.6）ms］，顯著延長，2wk時潛伏期繼續(xù)增加［a波（28.4±1.9）ms，b波（76±10）ms，O2 波（41±6）ms］，幅值一直沒有顯著改變. 結(jié)論 視覺電生理學檢查特別是scot-ERG和OPs波是早期診斷糖尿病視網(wǎng)膜病的可靠手段. </p><p>　　Keywords:diabe

4、tic retinopathy;electroretinography;strep-tozotocin;rats </p><p>　　Abstract:AIM To observe early electophysiological changes in STZ-induced diabetic rats.METHODS According to In-ternational Society for Clini

5、cal Visual Electrophysiology’s standard program，we recorded the scotopic electroretino-graph（scot-ERG），oscillatory potentials（OPs），photopic electroretinograph（phot-ERG）and30Hz flicker response in diabetic rats for2weeks，

6、by using REPIport system，Ag-AgCl corneal contact electrode and stainless steel needle elec┐trode.RESULTS At1week after the onset of diabetes</p><p><b>　　0 引言 </b></p><p>　　糖尿病10～15a后

7、，約半數(shù)患者出現(xiàn)視網(wǎng)膜病變［1］ ，后者是致盲的重要原因之一［2］ .多年來，對糖尿病視網(wǎng)膜病的診斷、治療以及研究多集中于其血管病變上，而對神經(jīng)組織病變研究甚少.我們采用臨床視覺電生理學檢查技術(shù)對糖尿病大鼠視網(wǎng)膜電生理功能的早期變化進行了觀察. </p><p><b>　　1 材料和方法 </b></p><p>　　1.1 材料 健康成年封閉群雄性SD大鼠10只

8、（由第四軍醫(yī)大學實驗動物中心提供）.約8wk齡，體質(zhì)量200～250g.外眼和檢眼鏡檢查屈光間質(zhì)清晰，眼底無改變.予以12h明-暗交替光照，不限食水，室溫18℃～23℃條件下飼養(yǎng).鏈脲霉素（streptozotocin，STZ），美國Sigma公司產(chǎn)品.美國Lifescan公司One Touch血糖儀.尿糖試紙帶，粵藥器監(jiān)［準］字99第240452號，廣州市越秀東方新科技研究所研制. </p><p><

9、b>　　1.2 方法 </b></p><p>　　1.2.1 STZ誘導糖尿病大鼠模型的建立 STZ冰浴溶解于0.1mmol&#12539;L-1 的檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液中，配成10g&#12539;L-1 溶液，pH調(diào)為4.5，按55mg&#12539;kg-1 ip.給藥前大鼠禁食水12h.建模標準:給藥后48h剪尾法取血測其血糖、尿糖，血糖&gt;16

10、.7mmol&#12539;L-1 ，尿糖 以上，出現(xiàn)多尿的大鼠認為建模成功.以后每周測1次血糖、尿糖及質(zhì)量. </p><p>　　1.2.2 視覺電生理學實驗方法 暗適應(yīng)12h以上的大鼠，采用速眠新注射液（批號:吉牧防便字［1990］47號，由長春解放軍農(nóng)牧大學獸醫(yī)研究所提供）ip（0.75mL&#12539;kg-1 ）麻醉.將大鼠固定于自制實驗臺上，安放記錄電極、參考電極及接地電極.記錄

11、電極由直徑為0.2mm的銀絲制成，中間為環(huán)形，兩端各留一柄以便于固定，使用前電鍍氯化.參考電極和接地電極都用不銹鋼針制成.實驗前20min用5g&#12539;L-1 托品酰胺散瞳，再在角膜表面滴加10g&#12539;L-1 甲基纖維素.記錄電極固定于角膜表面，參考電極位于同側(cè)頰部，接地電極置于尾部，對側(cè)眼遮蓋.采用RETIport系統(tǒng)（Roland Consult，德國），根據(jù)國際臨床視覺電生理學會標準化方案進行暗適

12、應(yīng)視網(wǎng)膜電圖（scotopic electroretinograph，scot-ERG）、振蕩電位（oscillatory potentials，OPs）、明適應(yīng)視網(wǎng)膜電圖（photopic electroretinograph，phot-ERG）和30Hz閃爍反應(yīng)（30Hz-flicker response</p><p><b>　　2 結(jié)果 </b></p><p&

13、gt;　　2.1 糖尿病大鼠情況 實驗前大鼠血糖為（4.3±1.4）mmol&#12539;L-1 ，給藥后1wk為（19.5±2.6）mmol&#12539;L-1 ，2wk為（19.0±2.8）mmol&#12539;L </p><p>　　-1 ，較實驗前明顯升高（P&lt;0.01）.大鼠體質(zhì)量給藥前（236±21）g，給藥1wk

14、后降至（225±14）g，給藥后2wk時明顯降低為（203±12）g（P&lt;0.01）.大鼠有明顯的多飲、多食、多尿的癥狀，尿糖為～. </p><p>　　2.2 視網(wǎng)膜電圖（ERG） </p><p>　　2.2.1 scot-ERG 在給藥1wk后，各種光強下誘導的ERG a，b波幅值有升高的趨勢，峰潛時則明顯延長;2wk后則波幅值較1wk時降低，

15、低于實驗前，峰潛時則進一步延長（Tab1，2，F(xiàn)ig1）. </p><p>　　2.2.2 振蕩電位（OPs） 振蕩電位在1wk時其潛伏期較注藥前有顯著延長（P&lt;0.01），2wk時潛伏期亦有延長（P=0.014），幅值有降低的趨勢，但未達到顯著性變化（Tab3，F(xiàn)ig2）. </p><p>　　2.2.3 phot-ERG和30Hz閃爍反應(yīng) 在給藥后1wk和2wk時

16、，phot-ERG和30Hz閃爍反應(yīng)各波幅 值有降低、峰潛時有延長的趨勢，但變異較大，只有phot-ERG b波和30Hz閃爍反應(yīng)各波的潛伏期有顯著增加（P&lt;0.01，Tab4）. </p><p>　　表1 糖尿病大鼠暗適應(yīng)ERG各波的幅值　略 </p><p>　　表2 糖尿病大鼠暗適應(yīng)ERG各波的潛伏期　略 </p><p><b>　

17、　圖1 －圖2 略 </b></p><p><b>　　3 討論 </b></p><p>　　糖尿病視網(wǎng)膜病變的發(fā)病機制，一般認為與糖尿病時高血糖及其代謝產(chǎn)物對微血管，特別是對內(nèi)皮細胞和周細胞造成的損傷有關(guān)，因此目前對糖尿病視網(wǎng)膜病變發(fā)病機制研究、診斷和治療方案的確定多是從防止微血管損傷及改善微循環(huán)的角度進行［2］ .一些研究發(fā)現(xiàn)，在眼底無明顯改變時視

18、覺功能和電生理功能已經(jīng)發(fā)生了變化，提示視網(wǎng)膜神經(jīng)細胞及膠質(zhì)細胞的代謝和功能改變可能先于視網(wǎng)膜血管病變的發(fā)生［3］ .因此，如果能夠明確糖尿病時視網(wǎng)膜神經(jīng)細胞和膠質(zhì)細胞與微血管病理生理改變間關(guān)系，不僅可以提高糖尿病視網(wǎng)膜病變的早期診斷率，而且可為臨床上探索治療方案提供新的思路和理論依據(jù). </p><p>　　表3 糖尿病大鼠不同病程OPs波的幅值與潛伏期　略 </p><p>　　表4 糖

19、尿病大鼠明適應(yīng)ERG和30-Hz閃爍反應(yīng)的幅值與潛伏期　略 </p><p>　　為進一步探討糖尿病早期視網(wǎng)膜神經(jīng)細胞和膠質(zhì)細胞的功能變化，我們采用臨床視覺電生理檢查技術(shù)對糖尿病大鼠的視網(wǎng)膜功能變化進行了研究.臨床視覺電生理觀察指標較多，能夠從不同層次和角度反映視網(wǎng)膜的功能變化.如scot-ERG的a波來源于視網(wǎng)膜光感受器的電位變化，該波是否存在及其幅值的高低取決于光刺激的強度和光感受器的完整性;b波來源于內(nèi)核層

20、的電活動，目前認為是K+ 離子流經(jīng)müller細胞時產(chǎn)生，還與a波和視網(wǎng)膜內(nèi)信號傳遞過程的完整性有關(guān);OPs波則一般認為起源于內(nèi)層視網(wǎng)膜，但具體部位目前尚不肯定，可能起源與無長突細胞或視網(wǎng)膜抑制性反饋回路中，其對視網(wǎng)膜循環(huán)功能變化比較敏感;phot-ERG及閃爍ERG則與視網(wǎng)膜錐細胞的功能密切相關(guān)［4］ .我們的實驗結(jié)果表明，在糖尿病早期，視網(wǎng)膜的電生理功能就已經(jīng)放發(fā)生了明顯的變化，而不是通常文獻所報道的那樣在糖尿病大鼠模型建

21、模2wk至3mo時電生理功能才有明顯的變化.通過不同條件下視覺電生理指標的觀察，我們注意到糖尿病對視網(wǎng)膜功能的影響范圍比較廣泛，如scot-ERG的a波和b波，OPs波、phot-ERG a波和b波及閃爍ERG均受到了不同程度的影響，表</p><p><b>　　參考文獻: </b></p><p>　　［1］Luo CR.Diabetic retinopathy:

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