慢性刺激對(duì)鏈脲佐菌素誘導(dǎo)糖尿病大鼠的影響及治療研究.pdf

1、目的：為了探討慢性刺激在糖尿病發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中的作用，在應(yīng)用鏈脲佐菌素加高脂高糖飲食誘導(dǎo)大鼠糖尿病的過(guò)程中增加了慢性刺激因素，從而觀察慢性刺激在大鼠糖尿病發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中對(duì)糖、脂代謝及內(nèi)分泌系統(tǒng)功能的影響，為臨床上糖尿病合并抑郁的預(yù)防和治療提供有利幫助和借鑒。
　　方法：將清潔級(jí)雄性 Wistar大鼠60只，平均分為5組：正常組(N)；糖尿病模型組(DM)；慢性刺激組(CMS)；糖尿病+慢性刺激組(DM+CMS)及糖尿病+慢性刺激

2、+褪黑素組(DM+CMS+MT)。以高脂高糖飲食結(jié)合腹腔注射鏈脲佐菌素的方法誘導(dǎo)2型糖尿病大鼠模型；應(yīng)用慢性溫和應(yīng)激法誘導(dǎo)大鼠抑郁模型，及兩者結(jié)合建立糖尿病合并抑郁的大鼠模型。觀察各組大鼠一般狀況，如體重、飲食、二便、毛色、精神狀態(tài)等變化，檢測(cè)血糖、血脂、胰島素等指標(biāo)，應(yīng)用強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)和高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)檢測(cè)其行為學(xué)變化，放射免疫方法檢測(cè) HPA軸內(nèi)分泌激素中的促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)和皮質(zhì)醇(CORT)水平的變化，通過(guò)免疫組織化學(xué)方

3、法檢測(cè)各組大鼠的促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)和海馬細(xì)胞caspase-3、bcl-2因子表達(dá)的變化。行為學(xué)指標(biāo)采用配對(duì)T檢驗(yàn)方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，其他指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果采用單因素方差分析及兩兩比較的方法進(jìn)行分析。
　　結(jié)果：
　　1.與正常組大鼠比較，各組大鼠均出現(xiàn)毛色灰暗；體重減輕，飲水量稍增加，食欲降低，自主活動(dòng)減少等抑郁表現(xiàn)。
　　2.在各組大鼠行為學(xué)實(shí)驗(yàn)的觀察中發(fā)現(xiàn)，除正常組大鼠外，其余各組大鼠在強(qiáng)迫游泳中的上竄時(shí)

4、間均較實(shí)驗(yàn)前縮短，不動(dòng)時(shí)間延長(zhǎng)，均不同程度的出現(xiàn)了抑郁行為。高架十字迷宮數(shù)據(jù)顯示，DM+CMS組大鼠進(jìn)入開(kāi)放臂的次數(shù)和時(shí)間卻明顯減少，大鼠出現(xiàn)了焦慮狀態(tài)，MT也未能改善大鼠的焦慮行為。
　　3.除正常組和 CMS組大鼠外，其余各組大鼠血糖水平和血清胰島素水平均明顯升高，但胰島素水平增加的幅度遠(yuǎn)超過(guò)血糖水平的升高幅度，導(dǎo)致胰島素抵抗指數(shù)明顯增加。且DM+CMS組較DM組升高明顯，但DM+CMS+MT組大鼠胰島素抵抗較DM+CMS組大

5、鼠有所緩解。
　　4.各組大鼠的生化指標(biāo)顯示DM、DM+CMS及DM+CMS+MT組大鼠血脂水平均明顯高于正常組大鼠。DM+CMS+MT組大鼠的血清CHO和TG水平較DM+CMS組大鼠有所下降。
　　5.應(yīng)用放射免疫法檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，與正常組大鼠相比，各組大鼠血清 CORT和 ACTH水平均明顯升高，DM+CMS組大鼠ACTH水平升高尤為明顯，給予MT后，CORT和ACTH均有所下降。
　　6.免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示 DM、D

6、M+CMS及 DM+CMS+MT組大鼠胰島境界不清，形狀不規(guī)則，體積變小，免疫反應(yīng)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)目有所減少。DM組、CMS組、DM+CMS組及DM+CMS+MT組大鼠下丘腦室旁核CRH陽(yáng)性細(xì)胞增加，DM+CMS組大鼠最為明顯。
　　7.與正常組相比，各組大鼠海馬 caspase-3及 bcl-2的表達(dá)均有所改變，其中DM+CMS組大鼠海馬caspase-3、bcl-2表達(dá)變化最為明顯，caspase-3表達(dá)量增加，bcl-2表達(dá)量減少