硒對(duì)鏈脲佐菌素誘導(dǎo)的糖尿病大鼠營(yíng)養(yǎng)療效的評(píng)價(jià).pdf

1、本文從營(yíng)養(yǎng)學(xué)的角度研究硒對(duì)糖尿病大鼠的糖代謝、脂代謝及抗氧化系統(tǒng)、ATP酶、NO系統(tǒng)的影響，并探討硒對(duì)糖尿病的營(yíng)養(yǎng)療效及其可能的機(jī)制，從而選擇可行的療效評(píng)價(jià)指標(biāo)，為臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 研究方法：選用健康雄性SD大鼠50只，體重165±10g，適應(yīng)性喂養(yǎng)3天后，按體重隨機(jī)抽取10只為正常對(duì)照組(NC)，剩余的大鼠為造模組，所有大鼠禁食、不禁水12h以上，造模組大鼠一次性尾靜脈注射1％鏈脲佐菌素(STZ)檸檬酸鈉緩沖液(0.1m

2、mol/L，pH=4.5，新鮮配制)50mg/kgbw，NC組給予相應(yīng)容積的檸檬酸鈉緩沖液。注射后恢復(fù)飲食。2周后禁食、不禁水12h，眼眶后靜脈叢采血0.4～0.6ml測(cè)定空腹血糖，血糖值≥16.0mmol/L者為糖尿病大鼠模型，將糖尿病大鼠隨機(jī)分為3組，每組9只(各組血糖的平均數(shù)的差值≤0.5mmol/L)。實(shí)驗(yàn)共四組：正常對(duì)照組(NC)，糖尿病對(duì)照組(DM)，糖尿病+低劑量硒組(DM+lowSe，補(bǔ)硒300μg/kgbw·d-1)，

3、糖尿病+高劑量硒組(DM+highSe，補(bǔ)硒450μg/kgbw·d-1)，補(bǔ)硒量均在常備飼料(經(jīng)本實(shí)驗(yàn)室測(cè)定飼料的硒含量0.070mg/kg)硒水平之上補(bǔ)予，以飲用補(bǔ)硒液的方式補(bǔ)硒，每周調(diào)整一次補(bǔ)硒液濃度。補(bǔ)硒10周，大鼠禁食、不禁水12h，腹腔注射10％水合氯醛(用生理鹽水新鮮配制)4ml/kgbw麻醉大鼠，頸動(dòng)脈取血，肝素抗凝，并及時(shí)離心，分離血漿，低溫保存?zhèn)溆茫∠氯⌒呐K、肝臟、腎臟、胰腺和右后腿股二頭肌.用冷生理鹽水漂洗后濾

4、紙吸干、稱重，低溫保存?zhèn)溆茫糠指闻K和胰腺及時(shí)用10％甲醛固定用于做病理檢驗(yàn)。及時(shí)測(cè)定血糖、糖化血清蛋白(GSP)、肝糖原、肌糖原、血漿膽固醇(TC)和甘油三酯(TG)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GPX)、丙二醛(MDA)、腎臟ATP酶、NO、一氧化氮合酶(NOS)、全血硒、肝硒等指標(biāo)。 研究結(jié)果： 1.硒對(duì)血糖、糖化血清蛋白和糖原的影響治療后糖尿病各組的血糖均比治療前升高并有顯著性差異(P＜0.01)，補(bǔ)硒后糖尿病低劑量補(bǔ)硒

5、組的血糖(26.41±2.47mmol/L)和GSP(1.27±0.18mmol/L)均明顯低于糖尿病對(duì)照組的血糖(33.47±2.60mmol/L)和GSP(1.59±0.14mmol/L)(P＜0.01)，糖尿病高劑量補(bǔ)硒組的血糖(31.29±2.88mmol/L)和GSP(1.50±0.19mmol/L)與糖尿病對(duì)照組的血糖和GSP沒(méi)有顯著性差異(P＞0.05). 糖尿病對(duì)照組的肝糖原(6.01±1.04mg/g)明顯高于

6、正常對(duì)照組的肝糖原(2.95±0.34mg/g)(P＜0.01)，糖尿病低劑量補(bǔ)硒組的肝糖原(3.04±0.31mg/g)和高劑量補(bǔ)硒組的肝糖原(3.26±0.47mg/g)明顯低于糖尿病對(duì)照組的肝糖原(P＜0.01)，且降到正常水平(P＞0.05)，肝臟的PAS染色也與肝糖原的的結(jié)果相一致；糖尿病對(duì)照組和正常對(duì)照組相比肌糖原的含量明顯升高(P＜0.01)，兩個(gè)補(bǔ)硒組和糖尿病對(duì)照組相比肌糖原的含量無(wú)顯著性差異(P＞0.05).

7、2.硒對(duì)血漿TC和TG的影響糖尿病對(duì)照組的血漿TC(1.37±0.06mmol/L)和TG(2.00±0.17mmol/L)明顯高于正常對(duì)照組的TC(0.82±0.07mmol/L)和TG(0.26±0.05mmol/L)(P＜0.01)，糖尿病低劑量補(bǔ)硒組的TC(0.93±0.10mmol/L)、TG(0.88±0.11mmol/L)和高劑量補(bǔ)硒組的TC(1.08±0.12mmol/L)、TG(0.98±0.18mmol/L)含量與糖

8、尿病對(duì)照組相比明顯降低(P＜0.01)。 3.補(bǔ)硒對(duì)體內(nèi)的硒含量和肝、腎功能的影響糖尿病對(duì)照組的全血硒含量高于正常對(duì)照組水平(P＜0.05)，但兩組間肝臟的硒含量沒(méi)有顯著性差異(P＞0.05)，兩個(gè)補(bǔ)硒組的全血硒和肝臟的硒水平均明顯高于糖尿病對(duì)照組的水平(P＜0.01)。 糖尿病對(duì)照組的谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)和肌酐(Cr)明顯高于正常對(duì)照組的GPT和Cr(P＜0.01)，糖尿病低劑量補(bǔ)硒組的GPT和Cr低于糖尿病對(duì)照組水平

9、(P＜0.01)，糖尿病高劑量補(bǔ)硒組的GPT明顯高于糖尿病對(duì)照組的GPT(P＜0.01)。另外肝功能的變化與肝臟的HE染色基本一致。 4.硒對(duì)谷胱甘肽過(guò)氧化物酶和丙二醛(MDA)的影響糖尿病對(duì)照組的全血GPX的活性(52.13±4.45U)和血漿MDA(2.93±0.31μmol/L)均高于正常對(duì)照組GPX(41.88±2.19U)和MDA(2.05±0.31μmol/L)(P＜0.01)，糖尿病低劑量補(bǔ)硒組的全血GPX(62.

10、25±3.86U)明顯高于糖尿病對(duì)照組(P＜0.01)，血漿MDA(2.03±0.43μmol/L)已降低到正常水平(P＞0.05)；而糖尿病高劑量補(bǔ)硒組的全血GPX(56.57±3.66U)也高于糖尿病對(duì)照組的GPX(P＜0.05)，血漿MDA(2.52±0.47μmol/L)低于糖尿病對(duì)照組MDA的(P＜0.05)，高于正常水平(P＜0.05)。 5.硒對(duì)細(xì)胞膜ATP酶的影響腎臟Na+-K+-ATPase：糖尿病對(duì)照組的Na

11、+-K+-ATPase活性明顯低于正常對(duì)照組水平(P＜0.01)，兩個(gè)補(bǔ)硒組與糖尿病對(duì)照組相比Na+-K+-ATPase的活性明顯升高(P＜0.01). 腎臟Ca2+-ATPase：糖尿病對(duì)照組的Ca2+-ATPase活性明顯低于正常對(duì)照組水平(P＜0.01)，兩個(gè)補(bǔ)硒組與糖尿病對(duì)照組相比的Ca2+-ATPase的活性明顯升高(P＜0.01)，且與正常對(duì)照組的酶活性沒(méi)有顯著性差異(P＞0.05)。 6.硒對(duì)NO系統(tǒng)的影響

12、糖尿病對(duì)照組的血漿NO、NOS和誘導(dǎo)型(iNOS)均明顯高于正常對(duì)照組的水平(P＜0.01)，糖尿病低劑量補(bǔ)硒組的血漿NO和iNOS均明顯低于糖尿病對(duì)照組的水平(P＜0.05)，糖尿病低劑量補(bǔ)硒組和正常對(duì)照組相比血漿的NOS無(wú)顯著性差異(P＞0.05)；糖尿病高劑量補(bǔ)硒組的血漿NO明顯低于糖尿病對(duì)照組的NO水平(P＜0.01)。 研究結(jié)論： 1.以STZ誘導(dǎo)的糖尿病大鼠模型血糖明顯升高，并呈進(jìn)行性加重，低劑量補(bǔ)硒能明顯降

13、低血糖，并且GSP的含量也表明硒控制血糖較平穩(wěn)；長(zhǎng)期糖尿病狀態(tài)肝糖原和肌糖原升高，補(bǔ)硒后肝糖原明顯降低，但肌糖原沒(méi)有變化。 2.糖尿病發(fā)生后，血脂升高，補(bǔ)硒能明顯降低血漿中TC和TG的含量。 3.糖尿病發(fā)生后，代表肝功能的GPT和腎功能的Cr在血漿中升高，低劑量補(bǔ)硒能明顯降低GPT的活性和Cr的含量，從而改善肝腎功能。 4.補(bǔ)硒能提高全血GPX的活性，降低血漿MDA。從而提高機(jī)體的抗氧化能力。 5.補(bǔ)硒能