山苦菜組織培養(yǎng)及高效再生體系建立的研究.pdf

1、山苦菜[Ixeris chinensis(Thunb.)Nakai]，屬菊科，苦荬菜屬多年生草本植物。由于其具有重要的食用和藥用價值，人們對之非常親睞。野生資源已不能滿足需要，人工栽培速度亦較慢，故尋求山苦菜快速繁殖的方法尤為重要。本研究通過誘導山苦菜愈傷組織再分化及山苦菜直接分化兩種途徑成功地建立了山苦菜高效再生體系，具體結果：
　　 1.愈傷組織誘導、繼代及分化
　　 (1)愈傷組織誘導：以山苦菜莖段為材料，采用平放

2、和斜插的方式培養(yǎng)，成功得到結果：最佳培養(yǎng)基為恒溫光照條件下的MS+BA1.0 mg·L-1+NAA0.1 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1，且平放的嫩莖誘導效果較好，誘導率達到100％。
　　 (2)愈傷組織繼代：MS+BA1.0 mg·L-1+NAA0.1 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1是愈傷組織繼代的最佳培養(yǎng)基；在恒溫光照、恒溫無光和變溫光照下進行愈傷組織繼代培養(yǎng)，30 d后的增殖倍數(shù)分別為25.2倍、12.7倍和9.

3、8倍，恒溫光照是山苦菜愈傷組織繼代的最佳條件。
　　 (3)愈傷組織分化：愈傷組織分化最佳培養(yǎng)基是恒溫光照條件下1/2MS+蔗糖15 g·L-1，分化率為100％，平均每塊分化出5.6個不定芽，平均苗長達到1.2 cm。
　　 2.不同材料及條件對山苦菜直接分化的影響
　　 分別以山苦菜莖尖、葉片、葉柄和莖段為外植體，直接誘導不定芽。結果表明：莖段為理想材料，最佳培養(yǎng)基為MS+BA0.5 mg·L-1+IBA0.

4、5 mg·L-1+KT0.5 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1，分化率達100％，平均每個莖段分化出56個高度為2.1-3.4 cm的直接分化芽。
　　 3.不同條件對分化芽生根的影響
　　 不同條件下分化芽生根的結果證明：1/4MS+IAA0.2 mg·L-1+蔗糖20 g·L-1是山苦菜分化芽生根的理想培養(yǎng)基，恒溫光照條件下生根效果最好，在3種接種方式中以正插生根效果最佳，生根率達100％，平均每株試管苗生根7.6

5、條、每條根的平均長度4.22 cm。
　　 4.試管苗生根培養(yǎng)的增殖
　　 試管苗生根繼代培養(yǎng)25 d后，試管苗成活率和生根率均為100％，平均增殖倍數(shù)達到了4.8倍，且生根情況較理想，幾乎沒有無效苗。按此速度，理論上1株試管苗1年能繁殖出4.814.6(約為8.8x105萬)株試管苗。
　　 5.煉苗、移栽與定植
　　 山苦菜再生苗移栽的理想基質(zhì)是1/2園土+1/2河沙，移栽成活率為96.5％，定植的成