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1、植物組織培養(yǎng)技術(shù)已經(jīng)應(yīng)用于甜瓜、西瓜、黃瓜等瓜類作物,但對(duì)南瓜的離體培養(yǎng)研究國(guó)內(nèi)報(bào)道不多。因此,對(duì)南瓜的再生體系的建立進(jìn)行探討,對(duì)開展南瓜的快速繁殖、種質(zhì)資源的保存、體細(xì)胞變異育種、遺傳轉(zhuǎn)化系統(tǒng)建立和生物反應(yīng)器的應(yīng)用都具有十分重要的理論意義和應(yīng)用價(jià)值。 本文以5個(gè)南瓜品種為試材,比較了貯藏時(shí)間、消毒時(shí)間、礦質(zhì)元素對(duì)無菌苗培養(yǎng)的影響。以及植物生長(zhǎng)物質(zhì)、品種、外植體類型和取材部位、子葉切割和接種方式等因素對(duì)愈傷組織的誘導(dǎo)、不定芽和不
2、定根的分化的影響,從而建立了南瓜離體組織培養(yǎng)再生體系。 盡量選取貯藏時(shí)間短、質(zhì)量好的種子,以4-5天無菌苗的子葉縱切為2,將其中脈斜插入培養(yǎng)基中,分化率最高。 通過試驗(yàn),篩選出易于誘導(dǎo)不定芽的南瓜品種為綠栗南瓜和夷香紅栗。夷香紅栗的不定芽誘導(dǎo)最適培養(yǎng)基為MS+6BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L,不定芽分化率為37.5%,平均芽數(shù)2.2個(gè);綠栗南瓜最佳培養(yǎng)方式為在MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA0.
3、1 mg/L的培養(yǎng)基中培養(yǎng)12天,再轉(zhuǎn)入MS+6BA 2 mg/L+GA<,3> 0.5 mg/L上繼續(xù)培養(yǎng),不定芽分化率達(dá)到52%,平均芽數(shù)3.7個(gè)。 南瓜只有子葉具有不定芽再生能力,子葉在培養(yǎng)中存在“極性”現(xiàn)象,產(chǎn)生的不定芽都集中在子葉基部的切口處。 當(dāng)不定芽伸長(zhǎng)后,再將其轉(zhuǎn)入MS+1.0 mg/NAA的培養(yǎng)基上,不定芽即分化出不定根,從而形成完整的再生植株。 試驗(yàn)是在南瓜中由不具有隱芽和腋芽的外植體直接誘導(dǎo)
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