家榆組織培養(yǎng)離體再生體系建立的初步研究.pdf

1、本研究以家榆種子和莖段為初始材料啟動(dòng)培養(yǎng)，經(jīng)過(guò)初代培養(yǎng)、繼代培養(yǎng)、生根培養(yǎng)獲得了穩(wěn)定的無(wú)菌苗，并對(duì)試管苗進(jìn)行了煉苗、移栽;同時(shí)通過(guò)對(duì)無(wú)菌苗的葉片、子葉、莖段及室外采集的葉片、莖段進(jìn)行愈傷組織的誘導(dǎo)及分化，分化出不定芽繼而發(fā)育成完整植株，初步建立了家榆的離體再生體系。為今后榆樹(shù)基因工程改良作物和工廠化育苗提供理論依據(jù)和基礎(chǔ)材料。主要研究結(jié)果如下:
　　1.啟動(dòng)培養(yǎng)
　　種子萌發(fā)過(guò)程中，無(wú)菌水和脫脂棉的組合萌發(fā)速度最快;6月中旬

2、取材的莖段其誘導(dǎo)率最高;試管苗獲得率為76.8％，褐化率為17.6％。
　　2.初代培養(yǎng)
　　種子胚芽分化最適合的培養(yǎng)基為MS+6-BA0.2 mg·l-1+IBA0.025 mg·l-1
　　誘導(dǎo)莖段腋芽生長(zhǎng)分化的最佳培養(yǎng)基為MS+6-BA0.1 mg·l-1+IBA0.005 mg·l-1，試管苗的分化率為79.3％，平均苗高為2.75 cm，每苗葉數(shù)4.70。
　　3.繼代培養(yǎng)
　　最佳的繼代周期25

3、-30d，繼代增殖的最佳培養(yǎng)基為MS+6-BA0.1 mg·l-1+IBA0.01mg·l-1，平均苗高、增殖系數(shù)分別為3.2和4.2。
　　4.家榆試管苗生根和移栽試驗(yàn)表明,試管苗生根的最佳培養(yǎng)基為1/2MS+IBA0.05 mg·l-1;平均根長(zhǎng)2.1cm，生根率67.2％。
　　5.愈傷組織培養(yǎng)
　　戶(hù)外葉片最佳取材時(shí)間為4月下旬，誘導(dǎo)率為82.7％;葉片誘導(dǎo)愈傷組織最合適培養(yǎng)基:MS+TDZ0.1 mg·l-1

4、+IBA0.2 mg·l-1，誘導(dǎo)率為89.2％;子葉誘導(dǎo)愈傷組織最合適培養(yǎng)基:MS+TDZ0.05 mg·l-1+IBA0.1 mg·l-1，誘導(dǎo)率為89.7％。
　　子葉和葉片的最合適分化培養(yǎng)基為MS+TDZ0.2 mg·l-1+IBA0.05 mg·l-1平均出芽數(shù)3.8，分化率為87.6％。
　　本試驗(yàn)還選取了家榆的莖段誘導(dǎo)愈傷組織，其誘導(dǎo)率最高的培養(yǎng)基為MS+NAA0.5 mg·l-1+6-BA0.2 mg·l-1