蝴蝶蘭再生體系的建立及組織培養(yǎng)中的污染防治研究.pdf

1、蝴蝶蘭素有“蘭花皇后”之美譽(yù)，具有極高的觀賞價值，但由于自然條件下其種子萌發(fā)極低，且常規(guī)的分株繁殖的增殖率低，難以滿足工廠化生產(chǎn)的需要。目前，蝴蝶蘭試管苗的產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)主要通過組織培養(yǎng)的方式進(jìn)行。
　　 本論文通過誘導(dǎo)蝴蝶蘭花梗腋芽萌發(fā)獲得無菌苗，然后以無菌苗葉片及幼嫩花梗薄層為外植體誘導(dǎo)產(chǎn)生原球莖，并通過原球莖的增殖、分化從而產(chǎn)生完整的蝴蝶蘭幼苗，探討了不同激素種類及濃度對原球莖誘導(dǎo)、增殖及分化的影響，篩選出了各個階段的最適培養(yǎng)

2、基，初步建立了蝴蝶蘭葉片及花梗薄層培養(yǎng)體系，為解決蝴蝶蘭試管苗產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)提供了新的途徑，同時為蝴蝶蘭形態(tài)建成機(jī)制闡明提供了新的培養(yǎng)體系。
　　 實驗結(jié)果表明，以葉片為外植體的培養(yǎng)體系中，MS+16mg/L 6-BA+0.8mg/L NAA的培養(yǎng)基PLB誘導(dǎo)率最高，達(dá)69.3％；TDZ和NAA的組合使用對蝴蝶蘭花梗薄層原球莖的誘導(dǎo)有明顯的促進(jìn)作用，MS+9mg/L TDZ+0.2mg/LNAA為蝴蝶蘭花梗薄層誘導(dǎo)原球莖的最佳培養(yǎng)基

3、，原球莖誘導(dǎo)率可高達(dá)40.7％。原球莖增殖的最佳培養(yǎng)基為MS基本培養(yǎng)基添加8mg/L BA和0.1mg/L NAA，過高濃度的BA或NAA都會造成原球莖增殖率的下降；MS附加2mg/L BA、0.1mg/L NAA、10-15％椰子汁、0.1-0.2％蛋白胨及0.1％活性炭適合于叢芽的增殖及分化培養(yǎng)。
　　 針對蝴蝶蘭試管苗產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)過程中的污染問題，本論文還對產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)接種間和培養(yǎng)間中的常見污染菌進(jìn)行了分離與鑒定，共鑒定出了9

4、個菌種，分屬于5個屬：芽孢桿菌屬、俊片菌屬、棒桿菌屬、節(jié)桿菌屬和副球菌屬；同時研究了不同抑菌劑及其組合對這些菌種的抑菌效果，結(jié)果表明，鏈霉素在200mg/L時對2號和6號菌有明顯的抑制作用；唑啉鈉在200mg/L時對1、3、7和9號菌有明顯的抑制作用；曲松鈉在100mg/L時對3、5、8和9號菌的抑菌效果明顯；慶大霉素濃度為100mg/L時對1號和9號菌有明顯的抑制作用；而50-100mg/L的混合抑菌劑（鏈霉素+頭孢唑啉鈉+慶大霉素+