不同授粉的度尾文旦柚裂果相關(guān)差異蛋白的研究.pdf

1、度尾文旦柚是福建省仙游縣特有的名貴果品，果實品質(zhì)優(yōu)良，但裂果問題嚴重。其具有自交不親和性和很強的單性結(jié)實能力，經(jīng)琯溪蜜柚異花授粉處理后，種子數(shù)明顯增多，但能夠有效地減少其裂果率。因此，探究琯溪蜜柚異花授粉能克服裂果的分子機理，對于提高度尾文旦柚的果實品質(zhì)和經(jīng)濟效益，具有重要的理論和實踐意義。 本研究以度尾文旦柚為試驗材料，運用蛋白質(zhì)組學方法對琯溪蜜柚授粉不裂果和自交裂果的子房和果皮蛋白質(zhì)進行比較研究。主要研究結(jié)果概括如下：

2、 1.樣品制備是影響檢測蛋白質(zhì)種類多少和雙向電泳圖譜質(zhì)量的一個重要因素，本文比較了三氯乙酸/丙酮沉淀法(TCA)和裂解液直接提取兩種方法對文旦柚果皮蛋白質(zhì)的提取效果，結(jié)果表明：TCA法不能有效地提取果皮蛋白質(zhì)，裂解液直接提取法得到的圖譜背景干凈，蛋白質(zhì)點清晰，說明裂解液直接提取法適用于文旦柚果皮蛋白質(zhì)的提取。 2.通過比較分析琯溪蜜柚授粉不裂果和自花授粉裂果果皮的蛋白質(zhì)圖譜，共找出13個差異蛋白。其中有4個蛋白質(zhì)呈上調(diào)表達，9

3、個蛋白質(zhì)呈下調(diào)表達。差異蛋白經(jīng)膠內(nèi)酶解和MALDI-TOF-TOF/MS分析，獲得的PMF通過數(shù)據(jù)庫檢索，鑒定了10個蛋白質(zhì)。 在鑒定出的10個差異蛋白質(zhì)中，其中兩個為未知蛋白質(zhì)。其他蛋白質(zhì)分別為胞液谷氨酰胺合成酶，在氮同化過程中起著十分重要的作用；2，3-二磷酸甘油酸的磷酸甘油變位酶，與能量代謝有關(guān)；S-腺苷同型半胱氨酸水解酶，與細胞內(nèi)的甲基化反應(yīng)有關(guān)；蘋果酸酶，是蘋果酸代謝中的關(guān)鍵酶；果糖二磷酸醛縮酶，屬于光合作用相關(guān)蛋白質(zhì)

4、；超氧化物歧化酶和過氧化氫酶，與抗氧化作用有關(guān)。 3.通過分析比較琯溪蜜柚授粉和自花授粉發(fā)育早期子房的蛋白質(zhì)圖譜，共找出28個差異蛋白。其中有7個蛋白質(zhì)呈上調(diào)表達，21個蛋白質(zhì)呈下調(diào)表達。差異蛋白質(zhì)經(jīng)膠內(nèi)酶解和MALDI-TOF-TOF/MS分析，獲得的PMF通過數(shù)據(jù)庫檢索，鑒定成功20個蛋白。 在鑒定成功的20個差異蛋白質(zhì)中，其中五個為未知蛋白質(zhì)。根據(jù)蛋白質(zhì)的功能，找出可能與裂果有關(guān)的蛋白質(zhì)：鈣調(diào)素和鈣網(wǎng)質(zhì)蛋白前體與細