不同蜂蜜中蛋白的差異研究.pdf

1、本實驗對荔枝、龍眼、洋槐、枇杷、椴樹、油菜六種蜂蜜分別進(jìn)行取樣，然后對六種蜂蜜的蛋白進(jìn)行提取、分離和純化；用SDS-PAGE 凝膠電泳技術(shù)和雙向電泳技術(shù)對六種蜂蜜的蛋白質(zhì)進(jìn)行對比和分析，從中找出它們的共同蛋白和差異蛋白，通過對蜂蜜蛋白的檢測和分析，從中找出蜂蜜蛋白質(zhì)圖譜，進(jìn)而對蜂蜜真假的檢測提供有力的證據(jù)。
　　 通過對六種蜂蜜蛋白的研究和分析，得出如下結(jié)論：
　　 (1)六種蜂蜜中的蛋白含量極低，而且蛋白含量各不相同，

2、荔枝、龍眼、洋槐、枇杷、椴樹、油菜六種蜂蜜的蛋白質(zhì)含量依次為：0.280mg/ml、0.208 mg/ml、0.272 mg/ml、0.176 mg/ml、0.224 mg/ml、0.192 mg/ml。
　　 (2)六種蜂蜜的原蜜和成品蜜的蛋白質(zhì)百分含量基本一致，說明蜂蜜加工過程對蛋白質(zhì)的影響不大。
　　 (3)對六種蜂蜜蛋白定量后，按相同蛋白量上樣進(jìn)行電泳，圖譜結(jié)果顯示它們的蛋白在55 kD 附近含量都很大，但相互之

3、間存在蛋白量的差異。大部分蛋白條帶分布在20kD-110 kD 之間，六種蜂蜜蛋白種類雖然有很大的相似性，但六種蜂蜜也有各自的特異蛋白。
　　 (4)取等體積的六種蜂蜜，提取蛋白后將其定容到相同體積，各取10 μL 進(jìn)行SDS-PAGE 凝膠電泳，得出六種蜂蜜的蛋白圖譜在55 kD、35 kD、30 kD和25 kD處都有蛋白條帶，但是六組樣品中的蛋白條帶分布和顏色深淺卻不相同；從六種蜂蜜蛋白圖譜中可以得出枇杷蜂蜜蛋白含量最低；

4、荔枝和龍眼蜂蜜的蛋白含量較高；椴樹蜂蜜在116 kD處的蛋白條帶比其他樣品要深的多，說明這些蛋白質(zhì)種類雖然相同但含量不同。荔枝蜂蜜在65 kD處有明顯的區(qū)別于其他樣品的條帶出現(xiàn)，龍眼蜂蜜在120 kD處有特異性蛋白條帶，洋槐蜂蜜在85 kD、50 kD和22 kD處有特異性條帶出現(xiàn)，油菜蜂蜜的特異蛋白在23.5 kD處，通過對蛋白含量和特異性蛋白的檢測可以得出六種蜂蜜蛋白之間存在明顯的差異。
　　 (5)分離出六種蜂蜜蛋白并定量

5、，按相同蛋白量進(jìn)行雙向電泳，發(fā)現(xiàn)六種蜂蜜蛋白的等電點基本都集中在pH 4-7 之間。六種圖譜的分布區(qū)域基本一致，每種蜂蜜的圖譜中對應(yīng)區(qū)域都存在其特有的蛋白分布點，分布最豐富的蛋白點集中在pH 6-9 且分子量在25kD-100 kD 之間。選取四個主要的區(qū)域進(jìn)行分析，在分子量為26 kD 且pH在5-7 之間，六種蜂蜜蛋白點表達(dá)量各不相同；分子量為85 kD 且pH 從6.5-7.5 之間六種蜂蜜的蛋白點表達(dá)量不同；分子量在55 kD