雞傳染性貧血病毒與其它免疫抑制性疾病共感染的相互作用.pdf

1、雞傳染性貧血病毒（Chicken anemia virus，CAV）是破壞雛雞造血系統(tǒng)，致使淋巴器官萎縮以及導(dǎo)致成年雞免疫抑制的主要病原。CAV在世界主要養(yǎng)禽國家分布廣泛，在其感染期間致使雞體極易受到其它病原的侵襲并常常伴有其它病原的共感染以及多重感染，進(jìn)而給養(yǎng)禽業(yè)帶來了巨大的損失，是危害養(yǎng)禽業(yè)的主要病原體之一。因此，對CAV致病性的研究越深入越有利于實(shí)踐生產(chǎn)中對該病的預(yù)防和治療。
　　 本文將CAV山東分離株（CAV-SDLY

2、08株），在MSB1細(xì)胞上培養(yǎng)傳代，并測定病毒滴度。將含有103 FCID50的CAV的細(xì)胞上清感染1日齡SPF雞只，研究CAV-SDLY08株與其它免疫抑制性疾病（MDV、ALV-J）共感染的相互協(xié)同作用。
　　 將CAV-SDLY08株和馬立克氏病病毒（MDV）人工單一和共同感染1日齡的SPF雞，分別于感染后14、21、28、35日齡檢測雞體紅細(xì)胞壓積的變化，并檢測雞群疫苗免疫3周后的抗體反應(yīng)，以探討CAV與MDV共感染對雞

3、體的免疫抑制是否有協(xié)同作用。結(jié)果表明，在血液分析方面，CAV與MDV共感染組較病毒單一感染組與對照組差異極顯著，不僅加重了雞群貧血現(xiàn)象，而且延長了貧血的病理癥狀；而在禽流感病毒（AIV，H5/H9）疫苗、新城疫病毒（NDV）疫苗和傳染性法氏囊病毒（IBDV）疫苗免疫后3周的抗體檢測中，CAV與MDV共感染組較其它各實(shí)驗(yàn)組差異極顯著，抗體滴度大大低于其它實(shí)驗(yàn)組；此外，CAV與MDV共感染組，雞體生長狀況明顯差于實(shí)驗(yàn)各組，有6只雞只死亡（6

4、/25），大大增加了病毒單一感染時的死亡率。綜上研究證明，CAV與MDV共感染在免疫抑制作用上有協(xié)同作用。
　　 同法研究CAV-SDLY08株與雞白血病-J亞群病毒（ALV-J）共感染對雞體的免疫抑制是否有協(xié)同作用。結(jié)果表明，CAV與ALV-J共感染在免疫抑制作用上同樣有協(xié)同作用。
　　 根據(jù)已發(fā)表的雞傳染性貧血病毒C14株（CAV-C14株）的基因序列設(shè)計(jì)合成一對特異性引物，以CAV-C14株感染的MSB1細(xì)胞為模板

5、，擴(kuò)增了CAV-VP1基因內(nèi)部的一段序列。將PCR產(chǎn)物按正確的閱讀框架克隆到表達(dá)性載pGEX-6p-1谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶（GST）基因的下游。將構(gòu)建好的表達(dá)載體質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到大腸桿菌BL21中，誘導(dǎo)表達(dá)目的蛋白。把從SDS-PAGE膠中回收的目的蛋白免疫小鼠，并收集陽性血清，即為抗CAV-VP1的血清。同時，收集CAV感染的新鮮病料，經(jīng)4％多聚甲醛固定后，做成石蠟切片。應(yīng)用免疫組織化學(xué)的方法，用抗CAV-VP1的陽性血清檢測定位切片中CAV抗原