IL-21在鴕鳥免疫器官發(fā)育中的變化規(guī)律研究.pdf

1、鴕鳥渾身都是寶，飼養(yǎng)價值很高。3月齡前的雛鴕鳥因為正處于生長期，各器官系統(tǒng)尚未發(fā)育完全，容易受到各種致病因子的侵襲，從而誘發(fā)疾病，影響其健康生長。免疫器官是機(jī)體抵抗外部致病因子的重要屏障，其功能的發(fā)揮是通過T、B細(xì)胞起作用，免疫器官的發(fā)育程度決定了機(jī)體對疾病的抵抗能力。鴕鳥的育雛期時間較長，在此段時間內(nèi)，鴕鳥生長發(fā)育較快，很容易受到外界各種致病因子的侵襲。為了提高鴕鳥育雛的成活率，減少此期疾病的發(fā)生，相關(guān)學(xué)者已經(jīng)進(jìn)行了大量的研究。但迄今

2、為止，尚未見有關(guān)鴕鳥免疫器官發(fā)育規(guī)律的報道。
　　 IL-21是在2000年由美國華盛頓大學(xué)的Parrish Novak等人首次發(fā)現(xiàn)的一種新型細(xì)胞因子，其主要由活化的CD4+T、NKT等細(xì)胞分泌，它能調(diào)節(jié)T、B和NK細(xì)胞的功能，并在調(diào)節(jié)B細(xì)胞產(chǎn)生免疫球蛋白中起主導(dǎo)作用。目前國內(nèi)外對IL-21的研究主要集中在IL-21與相關(guān)疾病方面，但對IL-21在鴕鳥免疫器官中的分布及其隨日齡的變化規(guī)律尚未見報道。
　　 綜合以上原因，

3、本課題采用HE染色及免疫組織化學(xué)定位表達(dá)(SABC)技術(shù)，對鴕鳥免疫器官的組織形態(tài)結(jié)構(gòu)及發(fā)育變化規(guī)律、IL-21在免疫器官中的分布及變化規(guī)律進(jìn)行研究，以期為鴕鳥的疾病預(yù)防及治療提供理論依據(jù)。
　　 首先，研究了鴕鳥免疫器官的組織學(xué)變化規(guī)律。本試驗以1d、30d、60d、90d及334d的健康鴕鳥作為試驗對象，采用石蠟切片、HE染色，對鴕鳥的胸腺、脾臟和法氏囊的組織學(xué)結(jié)構(gòu)及增齡性變化規(guī)律進(jìn)行了研究。試驗結(jié)果表明：胸腺的皮質(zhì)與髓質(zhì)面

4、積比例隨日齡增加逐漸降低；在胸腺髓質(zhì)中觀察到了3種形態(tài)的胸腺小體，依次為單細(xì)胞小體、同心圓小體和團(tuán)塊狀小體，單細(xì)胞小體出現(xiàn)較早，可能與胸腺細(xì)胞的發(fā)育相關(guān)，同心圓小體和團(tuán)塊狀小體出現(xiàn)較晚，可能與胸腺細(xì)胞的凋亡相關(guān)。脾臟的被膜厚度隨日齡增長而明顯增寬，在334d被膜厚度達(dá)到最大值；ld的脾臟中可見動脈周圍淋巴鞘及橢球，并且動脈周圍淋巴鞘和橢球面積隨日齡增加明顯增大：30d的脾臟中可見脾小結(jié)，并且脾小結(jié)的數(shù)量隨日齡的增大而增多。腔上囊小結(jié)面積

5、及其髓質(zhì)面積隨日齡增加而增大，囊小結(jié)皮質(zhì)厚度隨日齡增加先增大后減小。黏膜固有層的疏松結(jié)締組織隨日齡增長有向囊小結(jié)髓質(zhì)中轉(zhuǎn)移的趨勢，334d的囊小結(jié)髓質(zhì)基本被疏松結(jié)締組織填充，說明法氏囊的功能已減退，法氏囊已經(jīng)開始走向退化萎縮。
　　 其次，研究了IL-21在鴕鳥免疫器官內(nèi)的分布及增齡性變化規(guī)律。本研究以1d、15d、30d、45d、60d、75d、90d及334d健康鴕鳥為試驗對象，采用石蠟切片、免疫組織化學(xué)技術(shù)對鴕鳥免疫器官內(nèi)

6、IL-21陽性細(xì)胞的形態(tài)學(xué)特點、分布及發(fā)育變化規(guī)律進(jìn)行了研究。試驗結(jié)果表明：IL-21陽性細(xì)胞在胸腺中呈圓形及卵圓形，主要分布于胸腺髓質(zhì)，在皮質(zhì)及皮質(zhì)與髓質(zhì)交界處也有分布；IL-21在胸腺中的表達(dá)強(qiáng)度和陽性細(xì)胞數(shù)量隨日齡增長先逐漸上升后下降，在75d達(dá)表達(dá)強(qiáng)度和陽性細(xì)胞數(shù)均達(dá)最大值。IL-21在脾臟中的陽性細(xì)胞主要分布于動脈周圍淋巴鞘及橢球周圍淋巴鞘周圍，且其表達(dá)強(qiáng)度及陽性細(xì)胞數(shù)也隨日齡增長先上升后下降，并在90d達(dá)到峰值。與胸腺及脾臟

7、相比，IL-21在腔上囊中的表達(dá)強(qiáng)度和陽性細(xì)胞數(shù)均較低，其陽性細(xì)胞主要表達(dá)于黏膜固有層，且其陽性細(xì)胞表達(dá)強(qiáng)度隨日齡增長也先增加后降低，在90d達(dá)到峰值。以上結(jié)果表明，IL-21在鴕鳥的胸腺、法氏囊、脾臟中均有分布，說明其有可能還參與先天性免疫向獲得性免疫的轉(zhuǎn)換；且其隨日齡變化呈現(xiàn)一定的規(guī)律性，基本上是在1到90d IL-21表達(dá)強(qiáng)度及表達(dá)量隨日齡的增加而逐漸上升，根據(jù)這些變化可以推論出IL-21可能參與T、B細(xì)胞的增殖與分化，誘導(dǎo)T、B