雞外周免疫器官中淋巴細(xì)胞發(fā)育的研究.pdf

1、外周免疫器官起源于中胚層，形成于胎兒晚期，主要包括脾臟、淋巴結(jié)和消化道、呼吸道和泌尿生殖道的淋巴小結(jié)等，是免疫活性細(xì)胞定居、增殖和對(duì)抗原刺激發(fā)生免疫應(yīng)答的場(chǎng)所．外周免疫器官中淋巴細(xì)胞由中樞免疫器官遷移而來(lái)，經(jīng)抗原刺激而分化增殖，繼而產(chǎn)生免疫學(xué)功能．外周免疫器官作為產(chǎn)生免疫應(yīng)答的重要場(chǎng)所，是反映動(dòng)物機(jī)體健康狀況的晴雨表，其組織結(jié)構(gòu)與功能隨著免疫應(yīng)答而發(fā)生變化。哺乳動(dòng)物出生后通過(guò)口服母乳不斷獲得母源抗體，而雛雞出殼后，母源抗體獲得相對(duì)有限．

2、在出殼初期，雛雞如何保護(hù)自身不受病原體的侵?jǐn)_，外周免疫器官如何發(fā)育、功能是否完善、能否提供及時(shí)有效的免疫保護(hù)呢？這些已成為目前亟待解決的重要研究課題． 本研究選擇9、11、13、15、18、20日齡雞胚及1、4、7、14、21、35、56日齡雛雞，每個(gè)時(shí)期分別采集5只雞（胚）的脾臟、盲腸及食管與腺胃結(jié)合處等部位，并制作冰凍切片。利用HE染色方法觀察雛雞不同生長(zhǎng)發(fā)育階段外周免疫器官組織發(fā)育過(guò)程和結(jié)構(gòu)特征；利用免疫組化法結(jié)合計(jì)算機(jī)圖

3、像分析技術(shù)研究不同生長(zhǎng)發(fā)育階段T、B淋巴細(xì)胞及其亞群在外周免疫器官中的出現(xiàn)、遷移、組織定位、增殖等一系列發(fā)育過(guò)程；利用圖像分析軟件和數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)軟件分析不同生長(zhǎng)階段外周免疫器官中T、B淋巴細(xì)胞及其亞群的比例、動(dòng)態(tài)變化規(guī)律及相互關(guān)系． 研究結(jié)果表明： 1、在組織結(jié)構(gòu)方面，脾臟實(shí)質(zhì)內(nèi)的白髓與紅髓在胚胎18日齡后明顯可辨，4日齡雛雞脾臟中形成明顯可辨的動(dòng)脈周圍淋巴鞘和橢球周圍淋巴鞘；盲腸基部T、B淋巴細(xì)胞在胚胎20日齡時(shí)開(kāi)始出現(xiàn)，

4、即初步形成盲腸扁桃體；食管與腺胃結(jié)合處在4日齡時(shí)形成明顯的隱窩結(jié)構(gòu)，即食管扁桃體初步形成；14日齡時(shí)，三種器官中首次出現(xiàn)生發(fā)中心；隨著日齡的增長(zhǎng)，外周免疫器官特征結(jié)構(gòu)不斷發(fā)育成熟，脾臟在21日齡時(shí)達(dá)到成熟水平，盲腸扁桃體和食管扁桃體在35日齡時(shí)達(dá)到成熟水平． 2、在T、B淋巴細(xì)胞出現(xiàn)時(shí)間方面，脾臟中IgM+和IgA+細(xì)胞在胚胎15日齡時(shí)開(kāi)始出現(xiàn)，IgG+細(xì)胞、CD3+和CD8+T淋巴細(xì)胞在胚胎18日齡時(shí)出現(xiàn)，CD4+細(xì)胞在胚胎2

5、0日齡時(shí)出現(xiàn)；盲腸扁桃體中CD3+、CD8+和IgM+細(xì)胞在胚胎20日齡時(shí)開(kāi)始出現(xiàn)，而CD4+、IgG+和IgA+細(xì)胞均在雛雞出殼后1日齡時(shí)出現(xiàn)；食管扁桃體中CD3+、CD4+、CD8+、IgM+和IgG+細(xì)胞均在胚胎20日齡時(shí)開(kāi)始出現(xiàn)，而IgA+細(xì)胞則在雛雞出殼后1日齡時(shí)出現(xiàn)． 3、在T、B淋巴細(xì)胞數(shù)量變化方面，外周免疫器官中T、B淋巴細(xì)胞的數(shù)量隨日齡增長(zhǎng)，整體均呈上升趨勢(shì)．脾臟在21日齡時(shí)達(dá)到穩(wěn)定，食管扁桃體和盲腸扁桃體均在

6、35日齡時(shí)達(dá)到穩(wěn)定；脾臟中T淋巴細(xì)胞亞群以CD8+細(xì)胞為主，B淋巴細(xì)胞則以IgG+細(xì)胞為主，并在7日齡后數(shù)量超過(guò)CD3+T淋巴細(xì)胞；盲腸扁桃體中T淋巴細(xì)胞亞群以CD8+細(xì)胞為主，B淋巴細(xì)胞以IgM+細(xì)胞為主，并在35日齡后數(shù)量超過(guò)CD3+T淋巴細(xì)胞；21日齡后，食管扁桃體中B淋巴細(xì)胞以IgA+細(xì)胞為主，數(shù)量超過(guò)CD3+細(xì)胞，CD4+細(xì)胞的數(shù)量多于CD8+細(xì)胞。 4、在T、B淋巴細(xì)胞組織定位方面，脾臟中CD3+、CD4+和CD8+

7、T淋巴細(xì)胞主要分布在動(dòng)脈周圍淋巴鞘中，而IgM+、IgG+和IgA+細(xì)胞主要分布在橢球周圍淋巴鞘和生發(fā)中心中；4～7日齡時(shí)，盲腸扁桃體中T淋巴細(xì)胞主要分布在粘膜固有層的中下部區(qū)域，而B(niǎo)淋巴細(xì)胞則主要分布在中上部區(qū)域，隨后各日齡T、B淋巴細(xì)胞均勻地分布在粘膜固有層中；在食管扁桃體的T淋巴細(xì)胞聚集物中，CD4+細(xì)胞緊密排列，主要占據(jù)中央部位，CD8+細(xì)胞主要散布在外周，同時(shí)B淋巴細(xì)胞又環(huán)繞在整個(gè)T淋巴細(xì)胞聚集物的外周；B淋巴細(xì)胞聚集物主要為

8、生發(fā)中心，其中存在大量IgM+、IgG+和IgA+細(xì)胞，同時(shí)T淋巴細(xì)胞又環(huán)繞在整個(gè)B淋巴細(xì)胞聚集物的外周． 5、外周免疫器官的組織結(jié)構(gòu)發(fā)育和淋巴細(xì)胞發(fā)生之間存在密切的關(guān)系，淋巴細(xì)胞遷入淋巴器官刺激組織結(jié)構(gòu)的發(fā)育成熟，同時(shí)成熟的組織結(jié)構(gòu)又為淋巴細(xì)胞發(fā)育成熟并行使功能活動(dòng)提供場(chǎng)所。外周免疫器官的組織結(jié)構(gòu)和淋巴細(xì)胞發(fā)育在35日齡均達(dá)到成熟水平，這也表明雛雞外周免疫器官的免疫功能在35日齡時(shí)達(dá)到成熟． 通過(guò)對(duì)雞外周免疫器官的組織