雞脾臟中T淋巴細胞發(fā)育及其免疫功能發(fā)生的研究.pdf

1、本研究分別選擇了13、15、18、20日雞胚及1、7、14、21、35、56日齡雛雞，每個時期取5只雞的脾臟，制作冰凍切片，分別進行HE染色和免疫組化染色；同時在上述胚胎20同以后的各時期另取5只雞胚或雛雞的脾臟，分離淋巴細胞，進行淋巴細胞轉(zhuǎn)化試驗。 利用HE染色方法觀察雞不同生長發(fā)育階段脾臟的組織結(jié)構(gòu)，結(jié)果表明：脾臟實質(zhì)內(nèi)的白髓與紅髓在胚胎18日以后能辨認出來，4日齡雛雞脾臟中形成明顯可辨的動脈周圍淋巴鞘，14日齡時才觀察到脾

2、小體。隨著日齡的增長，脾臟的這些特征結(jié)構(gòu)不斷發(fā)育成熟：21日齡時，白髓和紅髓的分界和比例達到穩(wěn)定，此后脾小體繼續(xù)變大，而且數(shù)目增多，35日齡和56日齡更為明顯。 利用免疫組織化學(xué)方法結(jié)合計算機圖象分析技術(shù)研究不同生長發(fā)育階段T淋巴細胞及其亞群在脾臟中的發(fā)育過程，結(jié)果表明，CD3<'+>T淋巴細胞從胚胎18日齡開始個別地出現(xiàn)在脾臟中，主要分布在動脈周圍淋巴鞘和紅髓中。隨著日齡的增長，CD3陽性細胞的數(shù)量整體呈上升趨勢，在21日齡時

3、達到穩(wěn)定。在4日齡前，CD3陽性細胞表面CD3分子蛋白表達量較少，說明4日齡前脾臟中的CD3<'+>T淋巴細胞還未成熟。CD4<'+>和CD8<'+>T細胞出現(xiàn)時間不同，CD8<'+>細胞出現(xiàn)較早，而且數(shù)量始終多于CD4<'+>細胞。隨著日齡增長，二者數(shù)量整體呈上升趨勢，都在21日齡時達到峰值，顯著高于此前各日齡(P<0.05)。CD4<'+>和CD8<'+>細胞表面陽性分子蛋白表達量都在7日齡時達到穩(wěn)定，說明7日齡脾臟中的CD4<'+

4、>和CD8<'+>T淋巴細胞達到成熟水平。CD4<'+>細胞主要分布在動脈周圍淋巴鞘中，而且脾小體中也存在CD4<'+>細胞，紅髓中直到21日齡才明顯觀察到CD4<'+>細胞；CD8<'+>細胞在動脈周圍淋巴鞘中和紅髓中都有大量分布，但是脾小體中沒有CD8<'+>細胞分布。CD4<'+>/CD8<'+>的比值基本維持在0.3-0.5之間。 不同時期雞脾臟淋巴細胞進行淋巴細胞轉(zhuǎn)化實驗，結(jié)果表明：雞從4日齡起，脾臟中的T淋巴細胞開始

5、具備與刀豆蛋白(ConA)進行反應(yīng)并發(fā)生增殖的功能，同時發(fā)現(xiàn)4-7日齡脾臟淋巴細胞有很高的自身增殖活性。不同時期脾臟T淋巴細胞的ConA刺激指數(shù)總體呈上升趨勢，說明脾臟中T淋巴細胞的細胞免疫功能隨著年齡的增長而增強。 研究發(fā)現(xiàn)：脾臟組織結(jié)構(gòu)發(fā)育、T淋巴細胞發(fā)育和T淋巴細胞免疫功能發(fā)生三者之間存在密切的關(guān)系，T淋巴細胞的遷入會充實脾臟的組織結(jié)構(gòu)如動脈周圍淋巴鞘；脾臟的特殊組織結(jié)構(gòu)又會為淋巴細胞行使功能活動提供場所；同樣T淋巴細胞執(zhí)