利用cDNa-AFLP技術(shù)對大白菜、蘿卜雜交種差異表達(dá)基因的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、雜種優(yōu)勢是生物界普遍存在的十分重要的生物學(xué)現(xiàn)象，并在多種動(dòng)植物中得到成功的利用。蕓薹屬（Brassica）作物是雜種優(yōu)勢利用最為普遍的一類作物。國內(nèi)外學(xué)者在近一個(gè)世紀(jì)對雜種優(yōu)勢機(jī)理的研究中做了大量的理論和實(shí)驗(yàn)探討，在方法和指導(dǎo)思想上取得了一些進(jìn)展，提出了許多的學(xué)說。雜種優(yōu)勢產(chǎn)生的機(jī)理仍然是一個(gè)末解之謎，還有許多問題需要深入研究。
　　 本文以大白菜和蘿卜雜交種及其親本為材料，應(yīng)用cDNA-AFLP技術(shù)研究基因的差異表達(dá)，方法如下

2、:在蓮座期剪取嫩葉，提取葉子的總RNA，利用反轉(zhuǎn)錄酶將其反轉(zhuǎn)錄成cDNA后進(jìn)行AFLP(amplifiedfragmentlengthpolymorphism)指紋圖譜分析。cDNA-AFLP操作中選擇EcoRⅠ和MseⅠ對雙鏈cDNA進(jìn)行限制性酶切，得到的粘性末端分別連接上人工接頭，預(yù)擴(kuò)增后再用64對選擇性引物擴(kuò)增并在6％聚丙烯酰胺凝膠電泳后用銀染方法染色進(jìn)行指紋圖譜分析。
　　 本研究共得到44個(gè)在雜種F1特異表達(dá)的差異片段

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