評(píng)價(jià)小檗堿作為天然化合物抑制桃褐腐菌.pdf

1、桃褐腐病是桃樹最嚴(yán)重的病害，該病由桃褐腐菌侵染桃樹的花、葉、果實(shí)引起，對(duì)桃產(chǎn)區(qū)經(jīng)濟(jì)損害極其嚴(yán)重。近半個(gè)世紀(jì)以來，人們一直致力于尋找高效、低毒、不易使桃褐腐菌產(chǎn)生抗藥性的殺菌劑。小檗堿作為植物源天然化合物，具有環(huán)境友好的特點(diǎn)，并且已經(jīng)證實(shí)其能有效抑制桃褐腐菌的生長(zhǎng)，但目前尚處于研發(fā)的初步階段，需要進(jìn)一步評(píng)估小檗堿作為新型桃褐腐菌殺菌劑的潛力。本文比較了小檗堿與其他四種代表性抗菌劑的藥效，對(duì)小檗堿和多菌靈進(jìn)行復(fù)配及藥效評(píng)價(jià)，研究小檗堿抑制桃

2、褐腐菌的分子機(jī)理，從而分析小檗堿的應(yīng)用前景。
　　 在藥效對(duì)比實(shí)驗(yàn)中，小檗堿、多菌靈、戊唑醇、咯菌腈以及嘧菌酯均對(duì)桃褐腐菌表現(xiàn)出明顯的抑菌活性，其中多菌靈的抑菌活性最高，MIC為0.05 g/mL，EC50僅為0.012μg/mL。小檗堿在與四種殺菌劑抑菌藥效的橫向?qū)Ρ戎?，發(fā)現(xiàn)小檗堿藥效作用優(yōu)于嘧菌酯。
　　 在復(fù)配農(nóng)藥的抑菌試驗(yàn)中，嘗試將小檗堿和多菌靈進(jìn)行復(fù)配，并在實(shí)驗(yàn)中采用了共毒因子法對(duì)復(fù)配農(nóng)藥進(jìn)行評(píng)價(jià)，發(fā)現(xiàn)小檗堿與

3、多菌靈的最優(yōu)復(fù)配比為小檗堿6.95μg/mL+多菌靈0.0019μg/mL，此時(shí)共毒因子為27.1，具有協(xié)同增效作用。結(jié)果表明，在小檗堿中只要加入極為少量的多菌靈就能起到協(xié)同增效的效果，也能更好的避免桃褐腐菌出現(xiàn)抗藥性。
　　 最后，本實(shí)驗(yàn)通過逆轉(zhuǎn)錄PCR手段初步研究小檗堿對(duì)桃褐腐菌的基因作用位點(diǎn)。主要研究了微管蛋白基因（β-tub）、角質(zhì)酶基因(cutl)、細(xì)胞色素P450甾醇14α-脫甲基酶基因（Mfcyp 51）、ABC轉(zhuǎn)

4、運(yùn)載體基因(Mfabcl)、交替氧化酶基因(Mfaoxl)和雙組份組氨酸激酶(Mfosl)。首先建立了連續(xù)多代受小檗堿脅迫桃褐腐菌模型，相比原代桃褐腐菌，受小檗堿連續(xù)八周脅迫生長(zhǎng)的桃褐腐菌在cutl、Mfcyp 51、Mfabcl基因均有差異表達(dá)，而β-tub、Mfaoxl、Mfosl沒有差異表達(dá)。證明了小檗堿脅迫桃褐腐菌需要超常表達(dá)或者突變cutl、Mfcyp 51和Mfabcl基因，才能躲避小檗堿的滅菌作用。這些結(jié)果都證明了小檗堿作