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文檔簡介
1、持續(xù)性冷應激通過復雜的生理生化途徑嚴重影響家禽的生長發(fā)育和生產性能的發(fā)揮,增強雞的抗冷應激能力是培育抗逆性品種的重要育種性狀之一。本研究以6周齡淮南麻黃雞公雞為試驗動物,取其肝臟組織體外培養(yǎng)細胞,經核因子E2相關因子2(Nuclear factor erythroid-2p45-related factor 2,Nrf2)的抑制劑——Kelch樣ECH相關蛋1(Kelch-like ECH-associated protein 1,KE
2、AP1)處理后,利用染色質免疫共沉淀結合深度測序(Chromatin immunoprecipitation sequence,CHIP-Seq)和免疫共沉淀(Co-immunoprecipitation,CoIP)新技術,探討在持續(xù)低溫脅迫下,其肝臟細胞Nrf2抗氧化信號轉導反應路徑。結果如下:
1.通過灌流雞的肝臟組織獲得的雞肝臟細胞,運用貼壁培養(yǎng)法培養(yǎng)于10cm培養(yǎng)皿,生長至80％左右,細胞呈現扁平多邊形。
2
3、.CHIP-Seq獲得的富集DNA與雞全基因組序列比對,測序片段廣泛分布于1、2、3、4、w和z染色體上,序列經基序分析獲得12bp的轉錄區(qū)結合位點。
3.CHIP-Seq測序結果與雞全基因組序列比對,其可能相關基因經GO富集分析和KEGG Pathway分析,獲得具有多個功能和存在于多條通路的基因,其中在抗氧化應激通路上的相關基因主要有VAT1L、TYRP1、TPH2、KCNAB1、HAAO、EFCBP1、DHRS11、CY
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