高氧對A549細(xì)胞Nrf2及其相關(guān)抗氧化酶表達(dá)影響的研究.pdf

1、目的：研究高氧對A549細(xì)胞Nrf2及其相關(guān)抗氧化酶HO-1和Gpx2表達(dá)的影響,探討Nrf2在高氧肺損傷中的作用及機(jī)制。
　　方法：A549細(xì)胞體外培養(yǎng),并隨機(jī)分為空氣組和高氧組,兩組分別暴露于空氣和95％的氧氣中,分別于暴露0h,0.5h,6h,12h后在倒置相差顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)及形態(tài)學(xué)變化;CCK-8法檢測細(xì)胞活性;2',7'-二氯二氫熒光素二乙酯(DCFH-DA)染色流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞內(nèi)ROS水平;并通過實(shí)時(shí)熒光定

2、量PCR測定A549細(xì)胞Nrf2、HO-1和Gpx2mRNA的表達(dá)。
　　結(jié)果：(1)與空氣組比較,高氧暴露后A549細(xì)胞生長狀態(tài)明顯不良,懸浮細(xì)胞增多,細(xì)胞活性下降;(2)與空氣組比較,高氧暴露0.5h后A549細(xì)胞內(nèi)ROS生成明顯增加;(3)與空氣組比較,高氧暴露0.5h和6h后A549細(xì)胞Nrf2mRNA表達(dá)增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);(4)與空氣組比較,高氧暴露0.5h后A549細(xì)胞HO-1mRNA表達(dá)無明顯變

3、化,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,高氧暴露6h后HO-1mRNA表達(dá)顯著增強(qiáng),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);(5)與空氣組比較,高氧暴露0.5h和6h后A549細(xì)胞Gpx2mRNA表達(dá)增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　結(jié)論：高氧暴露導(dǎo)致A549細(xì)胞生長不良、活性進(jìn)行性下降,同時(shí)細(xì)胞內(nèi)ROS生成明顯增加;高氧暴露可上調(diào)A549細(xì)胞Nrf2及其相關(guān)抗氧化酶HO-1和Gpx2mRNA的表達(dá),提示內(nèi)源性的Nrf2及其相關(guān)抗氧化酶HO-