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1、南開大學(xué)碩士學(xué)位論文干擾素調(diào)節(jié)因子7DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域中賴氨酸殘基的作用姓名：張敏申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：微生物學(xué)指導(dǎo)教師：王金忠201205AbstractInterferonregulatoryfactor7(IRF7)isamemberoftheIRFfamilywhichplaysimportantrolesintwoaspectsOneisregulatingtheexpressionofinterferonandtheothe
2、risDarticipatingintheantiviralimmuneresponseIRF一7isaDNAbindingproteincontaining503aminoacidsTheN—terminal151aminoacidresiduesofIRF7constituteitsDNAbindingdomain(DBD)，whichisresponsibleforitsbindingtotheinterferonstimulat
3、edresponseelement(ISRE)ThefunctionofIRF7carlberegulatedbyposttranslationalmodificationsincludingphosphorylation，acetylation，ubiquitinationandSUMOylationLysineresiduesarepotentialsitestbrthesemodifications，andmayserveasta
4、rgetstomodulatethefunctionsofIRF7TherearefivelysineresiduesintheIRF7DBDIthasbeenreportedthatlysineresiduemutationSmayhaveaffectedthefunctionofIRF7，andsomelysineresiduemutaftonsintheIRF7DBDmayhaveabolishedthefunctionofIRF
5、7In“sstudv’eachofthelysineresiduesofIRF一7DBDwasmodifiedintothearginineresiduebysitedirectedmutagenesisSixexpressionplasmidswereconstmcted，whichexpressedrecombinantwildtypeorgRoRmutantIRF7DBDDroteinseachfusedwitha6xhistid
6、inetagandaFLAGtagThe6xhistidinetagandtheFLAGtagwereusedforproteinpurificationanddetectil3n，respectivelyThentherecombinantwildtypeormutantIRF一7DBDproteinswerepurified，andtheirabilitiestobindwiththeISREweredetectedusingthe
7、DNABINDmicroplateItisshownthatthewildtypeIRF7DBDcarlbindwiththeISREspecificallyComparedwimthewildtype，thebindingabilitiesofmutantsK45R，K50R，K61R，K92RandK120RwereonlV13％，54％，22％，28％and16％ofthatforthewildtype，indicatingtha
8、ttheselysineresiduemutationsaffectedthebindingabilityofIRF7DBDwiththeISRETheseresultsdemonstratedtheimportantrolethatIRF7lysineresiduesplayedinitsDNAbindingabilityandprovidedevidenceforthefurtherusageottheDNA—BINDmicropl
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