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文檔簡介
1、目的:從人的骨髓中分離出間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC),研究其對胃癌SGC7901細(xì)胞的細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期的影響及其可能的作用機(jī)制。
方法:從人的骨髓中分離培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞,在光鏡下觀察其形態(tài),用流式細(xì)胞儀(FCM)檢測其細(xì)胞表面標(biāo)記,誘導(dǎo)其向成骨細(xì)胞轉(zhuǎn)化,取MSC上清液,按照MSC與胃癌細(xì)胞體積比為1:4、1:8、1:16分為3個實驗組,相同體積的胃癌細(xì)胞組為正常對照組。分別作用24h、48h、72h后,運(yùn)用MTT比色法測量細(xì)胞
2、增殖和流式細(xì)胞儀(FCM)檢測細(xì)胞周期的變化以及蛋白質(zhì)印跡(Western-blot)檢測細(xì)胞周期蛋白D2的表達(dá)變化。
結(jié)果:①在光鏡下觀察分離培養(yǎng)的MSC呈貼壁細(xì)胞呈梭形、多角形成纖維細(xì)胞樣形態(tài),大小均一;流式細(xì)胞儀(FCM)顯示MSC高表達(dá)CD29、低表達(dá)CD34;成骨誘導(dǎo)中,MSC經(jīng)ALP染色呈強(qiáng)陽性,出現(xiàn)鈣化結(jié)節(jié)。②三個不同體積比實驗組與對照組相比顯示MSC能抑制腫瘤細(xì)胞的生長。③實驗組與對照組相比MSC影響細(xì)胞周
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